通竅活血湯對腦梗死急性期大鼠MTL及GAS的調節作用*

安朋朋 李 紅 唐 明 楊秀麗 張 毅 徐偉俊 唐曉曉

（1.山東省青島市海慈醫療集團，山東 青島 266033；2.山東省青島開發區第一人民醫院，山東 青島 266555）

通竅活血湯對腦梗死急性期大鼠MTL及GAS的調節作用*

安朋朋1李 紅1唐 明1楊秀麗1張 毅1徐偉俊1唐曉曉2

（1.山東省青島市海慈醫療集團，山東 青島 266033；2.山東省青島開發區第一人民醫院，山東 青島 266555）

目的 研究通竅活血湯對腦梗死急性期大鼠胃動素及胃泌素的影響。方法 制備大鼠大腦中動脈梗死模型，隨機分為腦梗死組、通竅常規劑量組、通竅低劑量組、西咪替丁組、假手術組、并設正常組。分別給予生理鹽水、通竅活血湯常規劑量、通竅活血湯低劑量、西咪替丁、生理鹽水灌胃，并于4、7 d后測定胃動素（MTL）、胃泌素（GAS）含量。結果 腦梗死組4、7 d時MTL、GAS含量較相應正常組、假手術組及通竅常規劑量組大鼠有明顯升高（P＜0.01）；與通竅低劑量組相比，通竅常規劑量組更能明顯降低MTL、GAS水平（P＜0.01）。4 d時西咪替丁組、通竅常規劑量及低劑量MTL、GAS水平較7 d時明顯偏高（P＜0.05）。結論 通竅活血湯能有效調節腦梗死急性期胃動素及胃泌素的表達，并且與劑量成正比關系，此可能為其治療腦梗死后胃腸功能障礙的機制。

通竅活血湯 腦梗死急性期 胃動素 胃泌素 調節

腦梗死是嚴重威脅人類生命健康的臨床常見病之一，具有高發病率、高死亡率、高致殘率的特點［1-2］。腦梗塞死亡率及致殘率的高低往往取決于急性期治療是否得當，尤其是常見并發癥的治療［3］。胃腸功能障礙是腦梗死急性期最常見的并發癥之一［4-5］。目前應用常規H2受體阻滯劑及質子泵抑制劑療效欠佳。本研究即從腦梗死血瘀致病的基本病機出發，觀察通竅活血湯對胃動素（MTL）及胃泌素（GAS）的調節作用，驗證活血化瘀中藥對腦梗死急性期胃腸損傷的保護性作用，并探討其可能的藥理機制?，F報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 健康雄性清潔級Wistar大鼠，體質量（200±20）g。由山東大學動物實驗中心提供，動物合格證號：0009265。

1.2 試藥與儀器 通竅活血湯組方為桃仁9 g，紅花9 g，赤芍 3 g，川芎 3 g，生姜 9 g，大棗 21 g，老蔥 3 根，按照藥物比例為 3∶3∶1∶1∶3∶7∶10 配制，并加麝香 0.15 g，黃酒250 mL。以上藥物均由青島市海慈醫療集團3級實驗室提供并配制。西咪替丁片（規格為0.2 g/片。昆明振華制藥廠有限公司生產，批準文號：國藥準字H53020657）。0.9%氯化鈉注射液、10%水合氯醛、蒸餾水（青島市海慈醫療集團提供）。DPC-GAMMA-C12型γ計數器 （美國德普公司）；MTL、VIP放射免疫分析藥盒（北方生物技術有限公司）。

1.3 動物分組及模型制備 采用線栓法制備大鼠大腦中動脈梗死模型。將大鼠分為通竅常規劑量組、通竅低劑量組、腦梗死組、假手術組、西咪替丁組，并設正常組。共計6組，每組各8只。各組大鼠每日給予灌胃1次，通竅常規劑量組給予2 mL質量濃度為1.3 g/mL通竅活血湯灌胃；通竅低劑量組給予1 mL 0.9%氯化鈉注射液加質量濃度為1.3 g/mL通竅活血湯1 mL稀釋后灌胃；西咪替丁組按照0.1 g/kg標準灌胃。其余各組給予2 mL 0.9%氯化鈉注射液灌胃。

1.4 指標測定 空腹采下腔靜脈取血4 mL，2 mL注入含7.5%2Na-EDTA和抑肽酶各40 μL的試管中，混勻，4℃，3000 r/min離心 10 min，取血漿，置-70℃保存待測MTL；另2 mL注入非抗凝試管，置4℃，3000 r/min離心10 min，取血清，-70℃保存待測GAS。

1.5 統計學處理 應用SPSS13.0統計軟件。計量資料以（±s）表示，組間比較采用方差分析和F檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 各組MTL含量比較 各組同一時間MTL水平的比較見表1。4 d與7 d時正常組與假手術組大鼠各組血清MTL水平相比均無差異（P＞0.05）。西咪替丁組與通竅低劑量組血清MTL水平相比無明顯差異 （P＞0.05）；通竅活血湯常規、低劑量、西咪替丁組MTL水平較同一時間正常及假手術組亦均有升高（P＜0.01）；4 d時腦梗死組MTL水平較正常組、假手術組及通竅常規劑量組均有明顯升高（P＜0.01），比通竅低劑量組略有升高（P＜0.01），與西咪替丁組相近；通竅常規量組較低劑量組、西咪替丁組更能降低MTL水平 （P＜0.01）；7 d時腦梗死組較其余各組均明顯升高 （P＜0.01），通竅常規劑量組較西咪替丁組MTL水平降低（P＜0.05），較通竅低劑量組則明顯降低（P＜0.01）。

各組不同時間MTL水平比較見表1。4 d時西咪替丁組、通竅常規劑量及低劑量組MTL水平較7 d時明顯偏高（P＜0.05）；腦梗死組、正常對照組及假手術組不同時間前后對比MTL含量變化無差異 （P＞0.05）。

表1 各組大鼠MTL含量比較（pg/mL，±s）

表1 各組大鼠MTL含量比較（pg/mL，±s）

與正常對照組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；與假手術組比較，▼P＜0.05，▼▼P＜0.01；與腦梗死組比較，■P＜0.05，■■P＜0.01； 與西咪替丁組比較，★P＜0.05，★★P＜0.01；與通竅常規劑量比較，☆P＜0.05，☆☆P＜0.01；與通竅低劑量組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與同組 4 d 比較，◇P＜0.05，◇◇P＜0.01。 下同。

組 別 n正常組 8假手術組 8腦梗死組 8西咪替丁組 8通竅常規劑量組 8通竅低劑量組 8 4 d 117.01±11.38▼▼■■★★☆☆**117.67±12.73▲▲■■★★☆☆**189.51±13.48▲▲▼▼☆☆*7 d 119.79±10.61▼▼■■★★☆☆**120.27±11.48▲▲■■★★☆☆**183.05±14.49▲▲▼▼★★☆☆**177.45±13.64▲▲▼▼☆☆ 152.16±12.66▲▲▼▼■■☆◇151.23±7.46▲▲▼▼■■★★ 138.72±8.02▲▲▼▼■■★**◇174.21±14.25▲▲▼▼■☆☆** 156.60±11.87▲▲▼▼■■☆☆◇

2.2 各組GAS含量比較 各組同一時間GAS水平比較見表2。4 d與7 d時正常組與假手術組大鼠GAS水平相比均無明顯差異（P＞0.05）。西咪替丁組與通竅低劑量組GAS水平相比無明顯差異（P＞0.05）；通竅常規劑量、低劑量、西咪替丁組GAS水平較相應正常及假手術組亦均有升高（P＜0.01）；腦梗死組GAS水平較其余各組均明顯偏高 （P＜0.01）；4 d時通竅常規劑量組GAS水平比低劑量組偏低（P＜0.05），比西咪替丁組降低更明顯 （P＜0.01）；7 d時通竅常規劑量組較西咪替丁組、通竅低劑量組GAS水平明顯降低（P＜0.01）。

表2 各組大鼠GAS含量比較（pg/mL，±s）

表2 各組大鼠GAS含量比較（pg/mL，±s）

組 別 n正常組 8假手術組 8腦梗死組 8西咪替丁組 8通竅常規劑量組 8通竅低劑量組 8 4 d 130.51±8.03▼▼■■★★☆☆**136.93±13.48▲▲■■★★☆☆**216.28±12.12 ▲▲▼▼★★☆☆**7 d 135.29±6.97▼▼■■★★☆☆**132.12±10.39▲▲■■★★☆☆**209.02±6.38▲▲▼▼★★☆☆**184.10±9.45▲▲▼▼■■☆☆ 173.11±10.65▲▲▼▼■■☆☆◇166.64±11.48▲▲▼▼■■★★* 152.14±8.54▲▲▼▼■■★★**◇180.42±10.08▲▲▼▼■■☆ 168.48±8.01▲▲▼▼■■☆☆◇

各組不同時間GAS水平的對比見表2。4 d時西咪替丁組、通竅常規及低劑量GAS水平較7 d時明顯偏高（P＜0.05）；腦梗死組、正常組及假手術組不同時間前后對比血清GAS含量變化無差異（P＞0.05）。

3 討 論

腦梗死急性期胃腸功能障礙多被認為與胃酸分泌過多及胃腸動力異常引起［6-7］。胃泌素是最強的促胃酸分泌的激素，可使壁細胞最大限度分泌胃酸［8］。急性腦梗死后在應激等因素刺激下腦組織及胃腸組織缺血缺氧，迷走神經及胃腸黏膜神經叢高度興奮，刺激胃泌素分泌，血清胃泌素水平升高，胃酸分泌增多，增強了胃酸對胃腸黏膜的損害，引起胃黏膜糜爛、潰瘍出血［9］。MTL則能強烈刺激上消化道機械運動和生理肌電活動，引起胃腸周期性收縮運動［10］。同時MTL作為腦腸肽，也是中樞促進胃腸運動的主要調控因素之一，其調控機制與下丘腦—腦垂體功能軸密切相關［11］。急性腦梗死后腦組織破壞，顱內壓升高，直接或間接壓迫下丘腦等結構，促使血漿MTL濃度升高。MTL的釋放量與胃腸活動成正比，MTL釋放增多，胃腸蠕動增快，MTL釋放減少，胃腸蠕動減慢［12］。胃腸的異常運動破壞了胃腸黏膜的屏障功能，從而引起胃腸的相關癥狀。

本實驗研究結果表明，MTL及GAS在腦梗死急性期的含量均顯著升高。無論4 d還是7 d腦梗死組兩種胃腸激素含量遠高于正常組及假手術組。由此可以推測，MTL、GAS的升高與腦梗死急性期胃腸功能障礙發生有密切聯系。同時MTL及GAS將有可能成為急性腦梗死早期胃腸功能障礙的判斷標準之一。

血瘀是急性腦梗死的致病因素，同樣也是腦梗死發生的病機的關鍵［13］。血瘀貫穿于急性腦梗死的各個部位及階段，因此腦梗死胃腸功能障礙的發生與血瘀密切相關［14］?；鐾ńj不僅是治療急性腦梗死的有效法則，同樣對防治急性期胃腸功能障礙有積極意義。通竅活血湯是清代王清任《醫林改錯》中活血化瘀的代表方劑之一，該方具有活血、通竅、行瘀、通經之效［15］。本研究結果發現通竅活血湯和西藥干預后兩種激素水平均較腦梗死組有所降低，且常規劑量組較低劑量組激素水平調節更為明顯。也從側面反映了MTL、GAS降低可能有助于胃腸功能的恢復。結合實驗結果可知，通竅活血湯通過降低MTL、GAS水平，減少因腦梗死而出現的胃酸過度分泌及胃腸運動異常，減輕了胃腸功能障礙的癥狀，且通竅活血湯的療效與劑量成正比。

本實驗研究提示MTL及GAS的升高可作為腦梗塞胃腸功能障礙早期判斷要點，證實了通竅活血湯對腦梗死急性MTL及GAS具有較好的調節作用，充分說明了活血化瘀法對急性腦梗死胃腸損傷具有良好的保護性作用，也為臨床應用提供了有效方藥。

［1］毛蕾，張玉蓮.急性腦梗死溶栓治療的中醫藥應用及研究概況［J］.中國中西醫結合急救雜志，2012，19（2）：126-128.

［2］張珊珊，趙玉章，柳華，等.血漿同型半胱氨酸水平與急性腦梗塞近期臨床預后關系的研究［J］.西部醫學，2013，25（6）：840-842.

［3］王芳.急性腦梗塞的治療研究［J］.中國實用醫藥，2013，8（19）：257-258.

［4］楊秀麗，安朋朋，王成崗，等.腦梗死急性期并發胃腸動力障礙 1206 例臨床分析［J］.中國老年學雜志，2012，32（11）：2410-2411.

［5］李朝陽，張穎，馮君梅.中西醫結合治療腦梗死后吞咽困難的臨床觀察［J］.中國中西醫結合急救雜志，2012，19（6）：375-376.

［6］Gomersall CD，Joynt GM，Freebairn RC，et al.Resuscitation of critically ill patients based on the results of gastric tonometry：a prospective，randomized，controlled trial［J］.Crit Care Med，2010，28 （3）：607-614.

［7］趙東，付志新，張津華.重癥腦卒中患者胃腸道衰竭的預防性治療對預后的影響［J］.山東醫藥，2010，50（4）：79-80.

［8］Feng G，Xu X，Wang Q，et al.The protective effects of calcitonin gene-related peptide on gastric mucosa injury after cerebral ischemia reperfusion in rats［J］.Regul Pept，2010，160（1-3）：121-128.

［9］曹碧波，談超，丁明亮，等.生長抑素和胃泌素檢測在合并上消化道出血顱腦損傷中的意義［J］.中國實用神經疾病雜志，2012，15（9）：67-68.

［10］陳明，曹澤偉.胃動湯對糖尿病胃輕癱患者胃動素胃泌素的影響［J］.天津中醫藥，2013，30（3）：142-144.

［11］古麗拜爾·馬爾提，薛峰，徐珞.下丘腦-腦垂體胃動素對消化間期胃運動的調控［J］.海軍醫學雜志，2012，33（1）：14-17.

［12］索靜宇，徐華.胃腸動力的影響因素［J］.臨床消化病雜志，2013，25（4）：249-250.

［13］耿昌，梅曉明，閆政謀，等.中醫藥綜合治療急性缺血性腦梗死的臨床研究［J］.中國中西醫結合急救雜志，2009，16（6）：356-358.

［14］唐明，安朋朋.腦卒中急性期胃腸功能障礙的中醫證型觀察及分析［J］.世界中西醫結合雜志，2011，6（11）：968-970.

［15］唐云志，金波，李軍.通竅活血湯治療腦震蕩后遺癥［J］.中國中西醫結合急救雜志，2008，15（5）：288.

The Regulatory Effect of Tongqiaohuoxue Decoction on MTL and GAS of Rats with Cerebral Infarction in Acute Period

AN Pengpeng，LI Hong，TANG Ming，et al.Haici Medical Center of Qingdao City，Shandong Province，Shandong，Qingdao266033，China

Objective:To observe effect ofTongqiaohuoxue Decoctionon changes of motilin （MTL） and gastrin（GAS） of rats with cerebral infarction in acute period.Methods:Cerebral infarction models were made and randomly divided into cerebral infarction group，Tongqiaohuoxue Decoctionroutine dose group，low dose group，Cimetidine group，sham operation group，and control group.The rats were given Saline，Tongqiaohuoxue Decoctionroutine dose，Tongqiaohuoxue Decoctionlow dose，Cimetidine，and Saline enema separately.At 4th day and 7th day，inferior vena venous blood samples were collected to detect the MTL and GAS concentrations by radioimmunoassay.Results:At 4th and 7th day the MTL and GAS of cerebral infarction group were still higher than those of normal group，sham operation group andTongqiaohuoxue Decoctionroutine dose group （P＜0.01）；Compared withTongqiaohuoxue Decoctionlow dose group，MTL and GAS inTongqiaohuoxue Decoctionroutine dose group decreased （P＜0.01） significantly.In 4th day，MTL and GAS in Cimetidine group，Tongqiaohuoxue Decoctionroutine dose group andTongqiaohuoxue Decoctionlow dose group were higher than those in 7 th day （P＜0.05）.Conculsion:Tongqiaohuoxue Decoctioncan effectively regulate the expression of motilin （MTL） and vasoactive intestinal peptide（GAS），which is proportional to dose.It may be the mechanism treating gastrointestinal dysfunction after cerebral infarction.

Tongqiaohuoxue Decoction；Acute period of cerebral infarction；Motilin；Gastrin；Regulating

R285.5

A

1004-745X（2014）07-1276-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2014.07.025

山東省中醫藥科技發展計劃項目（2009-203）

2014-04-02）