比對兩臺VITROS3600全自動免疫分析儀檢測血清孕酮及β-HCG結果的一致性分析

吳紅麗,任颯爽,李相會,王秀明,李志武

(秦皇島市婦幼保健院 檢驗科,河北 秦皇島066000)

孕酮(Prog)在妊娠早期由卵巢黃體和滋養層細胞分泌，孕12周后主要由胎盤分泌，當異位妊娠時，滋養層細胞未能發育完全，分泌的HCG和其他幾種激素的量不足，導致血清Prog水平下降[1]。人類絨毛膜促性腺激素(HCG)是受孕后胎盤合體滋養層細胞合成分泌的一種糖蛋白，其β亞基(β-HCG)具有高特異性[2]。臨床上，醫生對患者血清β-HCG和Prog的連續監測，來判斷早孕，異位妊娠，葡萄胎及絨毛膜癌等疾病的療效和預后。研究顯示，血清β-HCG及孕酮的聯合檢測可顯著提高異位妊娠早期診斷的檢出率[3]。為了比較兩臺強生VITROS3600全自動免疫分析儀對同一檢測項目測量結果的一致性，作者對兩臺強生VITROS3600全自動免疫分析儀進行了β-HCG和Prog的對比實驗分析，以確保同一實驗室兩臺相同儀器檢測結果的可靠性。

1 材料與方法

1.1 對象

根據EP9-A2文件的要求[4]，隨機收集我院60例患者的新鮮血清標本，其中未懷孕的正常女性20人，年齡20-31歲，平均(25.250±3.416)歲；正常早孕女性20人，年齡22-32歲，平均(26.850±3.100)歲；宮外孕患者20人，年齡26-35歲，平均(29.600±2.501)歲，無溶血、黃疸及脂血。按照項目檢測標準要求保存。

1.2 儀器

兩臺VIVITROS3600全自動免疫分析儀(于2011年購置簡稱儀器1)、(于2012年購置簡稱儀器2)。

1.3 試劑

儀器1、儀器2所用試劑均為美國強生公司提供配套試劑。

1.4 定標

儀器1、儀器2在常規開機后分別使用美國強生公司原廠的校準品(LOT0780)和(LOT1800)對β-HCG及Prog進行定標。

1.5 質控

使用美國伯樂公司提供的質控品Biorad1(低值)、Biorad2(中值)、Biorad3(高值)分別對儀器1、儀器2進行日常室內質控，保證結果均在控。

1.6 精密度

1.7 樣本測定

將3組血清樣本均分兩份，分別在儀器1、儀器2上進行平行測定，每組每天測5份樣本，連續測定4天，得到60對測定值。檢測原理基于化學發光反應。

1.8 統計學分析

利用SPSS11.5統計學軟件對儀器1、儀器2測定的數據進行配對t檢驗和相關性檢驗的統計學分析。

2 結果

2.1 精密度比較

2.2 對比實驗

將儀器1、儀器2分別檢測120份血清樣本得到的結果進行配對樣本t檢驗，同時進行線性相關統計分析?？梢娙M患者的檢測結果配對t檢驗的P值均大于0.05，說明兩臺儀器的測量結果在統計學上無差異，并且相關性良好(P<0.01),相關系數r>0.975，符合美國臨床實驗室標準化委員會EP9-A文件的要求[6]，說明實驗數據范圍適合，滿足實驗要求。

表1 兩臺儀器精密度的比較

表2 兩臺儀器檢測β-HCG結果的比對及相關性分析

表3 兩臺儀器檢測Prog結果的比對及相關性分析

3 討論

臨床上檢測血清孕酮濃度對預測女性排卵期和評價卵巢排卵功能都有十分重要的意義[7]。定時監測血清孕酮濃度還可以幫助診斷懷孕前3個月的先兆性及習慣性流產[8]。此外，黃體功能紊亂時血清孕酮濃度要低于正常水平[9]。檢測血清β-HCG的水平可用于先兆流產、異位妊娠及多胎妊娠的診斷及療效監測。

VITROS3600全自動免疫分析儀是強生公司2010年推出的新型全自動免疫分析儀，其優點是系統特有的MicroSensor技術，可對患者的血清、血漿和腦脊液等樣本的質量進行預先評估，進一步篩選出溶血、脂血和黃疸的不合格樣本，分析儀會對這些不合格樣本進行標記。此外，VITROS3600全自動免疫分析儀對檢測血清β-HCG還具有兩個顯著的優勢。首先，擴大了對β-HCG檢測的線性范圍(2.39 mIU·ml-1-15 000 mIU·ml-1)，提高了早孕血清β-HCG的檢出率；其次，對β-HCG檢測的正常參考值為25.00 mIU/mL，相對于其他常用的免疫分析儀有所提高，降低了假陽性的檢出率，使早孕診斷的準確率得到了明顯的提高[10]。

為了保證本科室的兩臺VITROS3600全自動免疫分析儀測量結果的準確性和一致性，作者在兩臺儀器的精密度均符合CLIA’88(1988年美國國會頒布的臨床實驗室修正案)的前提下進行了對比試驗，結果顯示：兩臺儀器對孕酮及β-HCG的測量結果無顯著性差異(P>0.05)，并且相關性良好(P<0.01),相關系數r>0.975，呈正相關。說明兩臺儀器在同一試驗室檢測結果具有較高的一致性和準確性，避免了結果差異給臨床診斷帶來的困擾，可以同時發布檢測結果。

參考文獻：

[1]Buckley RG,King KJ,Disney JD,et al.Serum progesterone testing to predict ectopic pregnancy in symptomatic first-trimester patients[J].Ann Emerg Med,2000,36(2):95.

[2]馬瓊麟,曾 維,牛承榮.化學發光法檢測血β-HCG及臨床應用[J].中國現代醫生,2008,46(1):36.

[3]張 勵,劉建華.血清β-HCG和孕酮聯合檢測用于異位妊娠早期診斷的臨床觀察[J].中國婦幼保健,2012,27(1)：81.

[4]National Committee for Clinical Standards.Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples[S].Approved Guideline-second edition NCCLS,EP9-A2.

[5]劉 新,李順君,黃湘寧.Vitros5.1FS自動化學分析儀應用評價[J].實用醫院臨床雜志,2008,5(6):90.

[6]National Committee for Clinical Laboratory Standards.Method comparison and bias estimation using patient samples[S].approved guideline,EP92A,pennsylvania.NCCLS,1986,1.

[7]Dunn JF et al.Transport of Steroid Hormones:Binding of 21 Endogenous Steroids to Both Testosterone Binding Globulin and Corticosteroid-binding Globulin in Human Plasma[J].J Clin Endocrinol,1981,53:58.

[8]Hull MGR et al.The Nature of a Single Serum Progesterone Measurement in the Midluteal Phase,as a Criterion of Potentially Fertile Cycle (“Ovulation”) Derived from Treated and Untreated Conception Cycles[J].Fertil Steril,1982,37:355.

[9]Hensieign PA,Fainstat T.Corpus Lutum Dysfunction:Serum Progesterone Levels in Diagnosis and Assessment of Therapy for Recurrent and Threatened Abortion[J].Fertil Steril,1979,32:396.

[10]王曉樂,邱潮林,嵇桃瑛.強生VITROS 3600全自動免疫分析儀檢測血清β-HCG的臨床應用評價[J].標記免疫分析與臨床,2010,18(4):268.