廣佛手配方顆粒的FT-IR鑒別研究

羅文匯 ，畢曉黎 ，李養學，彭麗詩 ，董玉娟

（1.廣東省中醫藥工程技術研究院，廣東 廣州 510095；2.廣州中醫藥大學，廣東 廣州 510405）

廣佛手配方顆粒的FT-IR鑒別研究

羅文匯1，畢曉黎1，李養學1，彭麗詩2，董玉娟2

（1.廣東省中醫藥工程技術研究院，廣東 廣州 510095；2.廣州中醫藥大學，廣東 廣州 510405）

目的建立快速客觀地鑒別廣佛手配方顆粒的方法。方法對廣佛手配方顆粒進行紅外光譜掃描，分析、比較所得圖譜，研究其共有的吸收峰峰位和峰強度。結果各批次的廣佛手配方顆粒之間差異較小，都具有相同的特征吸收峰。結論利用紅外光譜圖分析可以直觀、快速、準確地鑒別廣佛手配方顆粒。

廣佛手；配方顆粒；紅外光譜；鑒別

廣佛手為蕓香科植物佛手Citrus medica L.var.sarcodactylisSwingle的干燥果實，主產于廣東省德慶、高要等地，市場上主要流通品種有廣佛手（產地廣東）和川佛手（產地四川）。廣佛手配方顆粒是以廣佛手飲片為原料，采用現代制藥工業的先進工藝和方法制成的顆粒，保持了原藥材飲片的藥性、藥味和藥效。具有疏肝理氣、和胃止痛、燥濕化痰的功效，用于肝胃氣滯、胸脅脹痛、胃脘痞滿、食少嘔吐、咳嗽痰多[1]。目前在佛手的研究中常用的分析方法除了傳統的性狀、顯微、理化、薄層色譜鑒別[2-4]外，還有以橙皮苷作為指標成分定量分析[5]，并利用 HPLC[6-7]、GC-MS 等[8]方法建立指紋圖譜，以及DNA測序的方法[9-10]。紅外光譜法具有譜圖特征性強、重現性好、需樣品量小、操作簡單等優點，在中藥研究領域中已經獲得較為廣泛的應用，可以作為中藥配方顆粒質量控制和真偽鑒別的依據。本文采用傅立葉變換紅外光譜（FT-IR）對廣佛手配方顆粒進行鑒別研究，為廣佛手配方顆粒質量標準制定快速客觀的鑒別方法奠定基礎。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Nicolet 6700 FT-IR紅外光譜儀、OMNIC8.0軟件（美國Thermo Fisher公司）；YP-2壓片機（上海山岳科學儀器有限公司）。

1.2 試藥

廣佛手配方顆粒 （批號：0603124、0703043、0707041、0711097、0801016），廣佛手藥材，川佛手藥材由廣東一方制藥有限公司提供；佛手對照藥材（批號：120933-200303）購于中國藥品生物制品檢定所；光譜純KBr粉末（英國BDH公司）；水為Millipore超純水；其他試劑均為分析純。

2 方法

2.1 丁酮提取物的制備

取廣佛手配方顆粒1 g，加水10 mL，加熱溶解，水溶液用丁酮振搖提取2次，每次15 mL，合并丁酮液，蒸干，于105℃干燥7 h，即可。

2.2 供試品的制備

分別取廣佛手配方顆粒以及丙酮提取物、廣佛手藥材、川佛手藥材等樣品粉末約2 mg，加入約200 mg在120℃干燥4 h的KBr粉末，在研缽中研磨、混勻，轉移至YP-2壓片機模具中，30 MPa左右的壓力，經1～2 min將樣品壓成透明的薄片[11]。壓片的厚度約1～2 mm。

2.3 光譜測定

將上述樣品置于FT-IR儀（DTGS檢測器，分辨率4 cm-1、掃描次數32次，掃描時實時扣除水和CO2的干擾）中，測定光譜范圍在4 000～400 cm-1之間的紅外光譜圖。

2.4 精密度試驗

取同一份廣佛手配方顆粒0603124的KBr片連續測定5次。采用OMNIC 8.0軟件進行分析，譜圖間的相關系數分別為：1.000 0、0.999 8、0.998 3、0.998 1、0.9974，RSD為0.11%，說明該儀器的精密度良好。

2.5 重復性試驗

取同一份廣佛手配方顆粒樣品（0603124），分別精密稱取6份樣品，平行壓片測量，采用OMNIC 8.0軟件進行分析，譜圖間的相關系數分別為1.000 0、0.999 4、0.998 5、0.997 8、0.997 3、0.996 7，RSD 為0.13%，說明所得紅外譜圖具有良好的重復性。

2.6 數據處理

平均圖譜及二階導數光譜的獲得均采用美國Thermo Fisher公司OMNIC 8.0操作軟件，平滑點數為13。

3 結果

3.1 各批次廣佛手配方顆粒和佛手藥材紅外掃描圖譜（見圖1-14）

3.2 各批次廣佛手配方顆粒和佛手藥材IR主要吸收峰峰位（靈敏度：80）。見表1-2。

3.3 結果分析

3.3.1 一維紅外光譜分析 通過對廣佛手藥材、川佛手藥材、廣佛手配方顆粒和廣佛手配方顆粒丁酮提取物紅外光譜圖各峰峰形及強度進行比較，如圖1-14，所列出的是不同批次顆粒的IR圖譜，通過這些IR圖譜，可以發現各批次均有一定的相似性。川佛手藥材在2 854 cm-1上有吸收，而廣佛手藥材在657 cm-1上有吸收，這是區別于兩種佛手的特征吸收峰，見表1。配方顆粒和藥材的紅外光譜圖在 3 400、2 928、1 625、1 415、1 240、773、530 cm-1附近均出現共同吸收峰可以做為廣佛手配方顆粒的鑒別峰；丁酮提取物紅外光譜圖在3 432、2 928、1 718、1 625、1 512、1 384、1 075、875 cm-1附近出現吸收峰，見表2。3 432、3 400 cm-1附近為佛手黃酮和多糖中υO-H的吸收峰；2 928 cm-1附近為亞甲基C-H反對稱伸縮振動吸收峰；1 718、1 625 cm-1附近為羰基特征峰；1 512、1 415 cm-1附近為苯環C=C伸縮振動吸收峰；1 384 cm-1附近為-CH3基團面內彎曲振動產生的特征峰；1 240 cm-1附近為黃酮類成分C-O伸縮振動吸收峰；1 075 cm-1附近為糖苷類成分的吸收峰；875、773 cm-1的吸收峰為佛手化學成分所含苯環面外彎曲振動與環彎曲振動引起的吸收峰。

3.3.2 二階導數光譜分析 圖15為廣佛手藥材、川佛手藥材和廣佛手配方顆粒的二階導數光譜圖（全波段）。從整體上看，廣佛手配方顆粒的二階導數光譜圖，其峰強度較小。其中3 200～2 500 cm-1波段，廣佛手藥材和廣佛手配方顆粒峰形相似，而與川佛手藥材峰形差別較大。另外，還進一步選取了1 800～500 cm-1波段進行了分析，如圖16所示，在1 750、1 260、1 157、1 024、985、894、818、711、578 cm-1附近，廣佛手藥材、川佛手藥材和廣佛手配方顆粒有相似的譜峰，其中1 104 cm-1，1 024 cm-1附近的譜峰，川佛手藥材的相對峰強度均增強，其余均減弱。廣佛手藥材相對于廣佛手配方顆粒，在615 cm-1附近出現一個譜峰。 另外在 1 193、1 101、949、894、832、657、605、581、563 cm-1附近的譜峰， 廣佛手配方顆粒的相對峰強度均減弱；而在1 402、695 cm-1的譜峰，其相對峰面積強度增加。

表1 各批次廣佛手配方顆粒和佛手藥材IR主要吸收峰峰位（cm-1）

表2各批次廣佛手配方顆粒丁酮提取物IR主要吸收峰峰位（cm-1）

圖15 藥材與配方顆粒二階導數光譜圖

3.3.3 匹配度分析 采用OMNIC 8.0軟件的譜庫建立與檢索對廣佛手藥材、川佛手藥材及廣佛手配方顆粒進行匹配度分析，廣佛手配方顆粒與廣佛手藥材紅外光譜的匹配度為98%以上，而廣佛手配方顆粒與川佛手藥材紅外光譜的匹配度為85%～93%，說明紅外光譜法可用于廣佛手配方顆粒的鑒別。

圖16 藥材與配方顆粒1 800～500cm-1二階導數光譜圖

4 討論

紅外光譜法應用在中藥配方顆粒方面主要根據紅外光譜的峰數、峰位、峰形和峰的強度，以及某一波數吸收峰的有無，指紋區的面貌等進行判斷，總的原則是比較紅外光譜的全貌。本研究還對廣佛手配方顆粒的丁酮提取物進行了紅外光譜研究，發現丁酮能有效地除去輔料的影響，可以獲得準確的檢測結果，在控制廣佛手配方顆粒方面有良好的效果。

紅外光譜運用二階導數譜，使一些不明顯的信息突出，并可從重疊譜帶中獲得隱含信息，從而使數據分析和處理變得容易。紅外光譜分析操作簡便、快速，所需樣品量較少。通過比較一維紅外光譜中657 cm-1處的特征吸收峰，以及二階導數光譜1 800～500 cm-1區域的譜峰，可以準確、快速地鑒別廣佛手配方顆粒，為中藥配方顆粒在不具備飲片形態情況下的真偽鑒別提供了示范性研究。

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（本文編輯 楊 瑛）

Identification of Fructus Citri Sarcodactylis Formula Granule by FT-IR

LUO Wenhui1,BI Xiaoli1,LI Yangxue1,PENG Lishi2,DONG Yujuan2
(1.Guangdong Province Engineering Technology Research Institute of Traditional Chinese Medicine,Guangzhou,Gangdong 510095,China;2.Guangzhou University of Chinese Medicine,Guangzhou,Guangdong 510405,China)

ObjectiveTo establish a new identification and analysis method of Fructus Citri sarcodactylis formula granule(FCSFG).MethodsThe FCSFG was scanned by FT-IR spectra.The peak place and the strength of FCSFG were analyzed and compared.ResultsThe FT-IR spectra of the same batch FCSFG had no obvious difference,they exhibited same absorption characteristies.ConclusionsFT-IR spectra can identify Citrisarcodactylisfructusformula granule intuitively,quickly and accurately.

fructus Citri sarcodactylis formula granule;FT-IR spectra;identification

R284.1；O657.33

A

10.3969/j.issn.1674－070X.2014.08.007.024.05

2013－10－16

廣東省自然科學基金項目（S2011010005926）；廣東省科學技術廳課題（2012A03010017）；廣東省教育部科技部產學研結合項目（2012B091100183）。

羅文匯，男，碩士，副主任中藥師，主要從事中藥質量評價研究工作。