某院銅綠假單胞菌體外藥敏試驗檢測結果分析＊

雷明德，黃學忠，徐辛夷，陳曉飛，胡思釬，劉 芳（解放軍第一一八醫院，浙江溫州 325000）

銅綠假單胞菌廣泛分布于自然界，尤其是水和潮濕地帶，該菌對抗菌藥物有自然的抵抗力，因此是醫院內感染的主要病原菌之一［1］，也是本院細菌耐藥預警監測系統中的重點監測菌［2］。近年來，銅綠假單胞菌在本院的感染率逐年上升，陽性檢出率居高不下，各抗菌藥物敏感率參差不齊，給臨床治療帶來困難。為了解本院銅綠假單胞菌的分布及抗菌藥物耐藥特點，作者結合2010年1月至2012年12月臨床分離的263株銅綠假單胞菌進行耐藥性分析，為臨床合理使用抗菌藥物提供可靠的參考依據，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料來源 選擇本院2010年1月至2012年12月臨床送檢標本3 177 份為研究對象，分析銅綠假單胞菌標本來源、科室分布及對抗菌藥物敏感性分析。

1.2 方法 參照《全國臨床檢驗操作規程》三版的規定分離病原菌。以痰標本為例：采集標本前應用涼開水漱口，清潔口腔和牙齒。用力咳出呼吸道深部的痰，標本量適中。標本收集后立即通過本院物流人員送至檢驗科標本中心，簽收時看下性狀是否合格（疑似口水均退回臨床科室）。檢驗科內部傳遞至微生物實驗室，放入生物安全柜，打開酒精燈讓接種環過火三次消毒滅菌。挑取標本帶有黏液、膿液及避開血痰等性狀不好的區域。接種在血培養皿并劃四分區。放入37℃培養箱放置24h；24h后挑取單個可疑菌落進行下一步純分培養，再次放入37℃培養箱放置24h；24h后采用法國生物梅里埃公司的ATB Expression細菌鑒定系統，進行鑒定及藥敏測定。細菌鑒定試條及藥敏試條，均為法國生物梅里埃公司產品，培養箱為上海一恒科學儀器有限公司生產的隔水式培養箱。嚴格按照試劑說明書進行操作。

1.3 統計學處理 在Excel上進行數據分析及統計學處理，所有組間比較采用U檢驗。

2 結 果

2.1 銅綠假單胞菌標本來源 本院住院患者送檢標本3 177 份，共分離檢出各類致病菌1 339 株，其中銅綠假單胞菌263株，占總檢出菌19.64%，高出相關報道［4］。分離自痰液211株，占80.22%；分泌物25株，占9.51%；膿液10株，占3.80%；中段尿8株，占3.04%；留置針5株，占1.90%；血液4株，占1.52%?？剖曳植贾袃瓤?2株、外科37株、綜合科90株、骨科8株、燒傷科22株及康復科14株。

2.2 銅綠假單胞菌體外藥敏試驗檢測結果 銅綠假單胞菌對多黏菌素E、阿米卡星及妥布霉素敏感率分別為95.06%、94.30%及93.16%；美洛培南和亞胺培南敏感率均在50%以下。復方磺胺甲噁唑和復方氨芐西林僅有1例同時抗菌藥物敏感，其余均在70%～90%之間。見表1。

表1 對15種抗菌藥物的敏感率（n＝263）

2.3 不同性別患者來源菌株藥物敏感試驗檢測結果比較 復方磺胺甲噁唑和復方氨芐西林為同一男性標本。男性其他13種抗菌藥物敏感性均低于女性標本。男性抗菌藥物敏感率前3位與女性相同，為多黏菌素E、阿米卡星及妥布霉素。其中阿米卡星和妥布霉素男女之間敏感性比較，差異有統計學意義（U＝2.74，P＜0.01；U＝2.08，P＜0.05），而多黏菌素 E男女間比較，差異無統計學意義（U＝0.597，P＞0.05）。見表2。

2.4 不同疾病菌株藥物敏感試驗結果比較 腦出血等腦部疾病藥物敏感率前3位為阿米卡星（97.20%）、多黏菌素E（95.80%）及妥布霉素（95.10%），均高于其他外傷及感染的敏感率。同時敏感率高于其他外傷及感染的抗菌藥物還有慶大霉素及哌拉西林／他唑巴坦。阿米卡星、多黏菌素E（及妥布霉素三者間兩兩比較，差異均無統計學意義（U＝1.18，P＞0.05；U＝1.897，P＞0.05；U＝1.327，P＞0.05）。見表3。

表2 不同性別患者來源菌株藥物敏感率分析

3 討 論

近年來，隨著抗菌藥物的使用，銅綠假單胞菌感染得到有效的控制，但同時各種抗菌藥物的耐藥率也居高不下［3］。本文中復方磺胺甲噁唑和復方氨芐西林的耐藥率已連續3年保持在97.6%以上，與有關報道一致［4－5］。在本文中出現1例敏感患者，77歲男性，兩次均以肺部感染入院。通過回顧性分析，發現兩次入院的藥敏結果由敏感轉變耐藥的有妥布霉素、阿米卡星、慶大霉素、頭孢吡肟、哌拉西林－他唑巴坦、替卡西林－克拉維酸及哌拉西林等7種，說明該患者在第一次住院期間大量使用這7種抗菌藥物。而復方磺胺甲噁唑和復方氨芐西林由耐藥轉為敏感卻值得進一步探討。從本文中可以看出，當前復方磺胺甲噁唑和復方氨芐西林已不適合本院銅綠假單胞菌感染的抗菌治療。

本研究結果顯示，亞胺培南和美洛培南在不同疾病及男女間比較，差異均無統計學意義（U＝1.53，P＞0.05；U＝1.76，P＞0.05。U＝0.30，P＞0.05；U＝0.17，P＞0.05）。說明近年來這兩種抗菌藥物的敏感率不斷下降，耐藥變得更加嚴峻［6］。本研究結果還顯示，阿米卡星在男性中敏感率為92.75%，而在女性中為100.00%，兩者比較，差異具有統計學意義（U＝2.74，P＜0.01）。說明不同感染菌及不同性別中的抗菌藥物應根據藥敏結果對癥下藥，切勿盲目用藥及經驗用藥［7］，這也再次驗證本科建立細菌耐藥預警系統的重要性和必要性。本研究中內科和綜合科占有全院69.20%的銅綠假單胞菌，多為腦出血等腦部疾病的老年患者，高齡、合并其他疾病、免疫功能下降、長期使用抗菌藥物等各種原因，導致這類患者感染機會增加［8－10］。

綜上所述，本院銅綠假單胞菌的耐藥性已十分嚴重，應引起臨床醫生高度關注。結合本院細菌耐藥預警監測系統，并根據藥敏結果合理使用抗菌藥物，避免濫用抗菌藥物，對于臨床治療和減少耐藥菌株的發生具有重要意義。

［1］葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程［M］.3版.南京：東南大學出版社，2006.

［2］黃學忠，金彬彬，林佩佩，等.細菌耐藥監測預警系統的設計與應用［J］.東南國防醫藥，2012，14（4）：301－304.

［3］黃學忠，劉瑾，林初希.利用Excel操作平臺創建檢驗危急值報告檢索系統［J］.國際檢驗醫學雜志，2011，32（19）：2288－2290.

［4］張鴻，申建維，孫秀琴，等.醫院感染銅綠假單胞菌的耐藥性變遷分析［J］.中華醫院感染學雜志，2013，23（2）：449－451.

［5］左虹.銅綠假單胞菌醫院感染現狀及耐藥性分析［J］.檢驗醫學與臨床，2013，10（2）：159－160.

［6］黃學忠，林佩佩，陳曉飛.痰標本銅綠假單胞菌224株5年耐藥變遷［J］.檢驗醫學與臨床，2013，10（5）：560－561.

［7］雷明德，黃學忠，陳曉飛，等.臨床分離大腸埃希菌體外藥敏試驗檢測結果分析［J］.檢驗醫學與臨床，2014，11（3）：350－352.

［8］劉永芳，張浩，周云，等.外排泵抑制劑對銅綠假單胞菌碳青霉烯類抗菌藥物敏感性的影響［J］.中華醫院感染學雜志，2011，21（5）：841－843.

［9］韋英海，吳振宏，張幫獻，等.住院腦出血患者肺部感染的病原菌分布及危險因素分析［J］.中華醫院感染學雜志，2012，22（13）：2819－2821.

［10］胡錫浩，許小敏，馮偉云，等.燒傷科銅綠假單胞菌20種β－內酰胺酶基因與膜孔蛋白oprD＿2基因研究［J］.中華醫院感染學雜志，2011，21（21）：4419－4422.