臨床分離大腸埃希菌體外藥敏試驗檢測結(jié)果分析＊

雷明德，黃學(xué)忠，陳曉飛，胡思釬，劉 芳（解放軍第一一八醫(yī)院檢驗科，浙江溫州 325000）

近年來，隨著廣譜和超廣譜抗菌藥物的臨床應(yīng)用日益廣泛，細菌的耐藥性也正在不斷增加，新的耐藥酶也在不斷出現(xiàn)，不同種類的酶對抗菌藥物的作用模式也有所不相同。體外抗菌藥物敏感試驗（簡稱藥敏試驗）是測定抗菌藥物或其他微生物制劑在體外抑制細菌生長的能力最常用方法。抗菌藥物的迅速發(fā)展和廣泛應(yīng)用，使微生物感染性疾病得以有效治療，不僅挽救了患者的生命，但也使耐藥菌株越來越多。為了解本院臨床分離大腸埃希菌的感染特征和藥物敏感性，現(xiàn)對本院2009～2012年臨床分離大腸埃希菌體外藥敏試驗檢測結(jié)果進行總結(jié)，旨在為臨床合理用藥提供參考，結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2009～2012年，從本院收治的住院患者送檢的中段尿、痰、血液等標本中分離的所有菌株共1 538株，其中大腸埃希菌136株［1］。

1.2 方法 參照《全國臨床檢驗操作規(guī)程（第3版）》的規(guī)定分離病原菌。以中段尿標本為例：清潔患者尿道口或外陰的周圍，患者自然排尿，尿流不間斷，截取中間一段尿液置無菌試管中，留取標本量不少于1mL；標本留取后立即通過本院物流中心送至檢驗科，檢驗科收到標本后，立即進行處理；上下顛倒混勻尿標本數(shù)次，在超凈工作臺上以酒精燈火焰炙烤試管蓋后打開蓋子，用帶有無菌槍頭的加樣槍吸取10μL標本加在血平板上，常規(guī)劃線接種；將上述定量接種后的標本置37℃溫箱中孵育18～24h，計數(shù)生長菌落數(shù)，以菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算每毫升尿標本生長的菌落數(shù)；觀察孵育培養(yǎng)后的平板上的菌落形態(tài)及菌落是否濕潤、邊緣是否整齊等，初步判斷菌屬，純化分離接種后再次孵育以排除雜菌；采用法國生物梅里埃公司的ATB Expression微生物鑒定系統(tǒng)進行病原菌鑒定及藥敏試驗檢測。微生物鑒定試條及藥敏試驗試條均為法國生物梅里埃公司產(chǎn)品，嚴格按照儀器及試劑說明書進行操作。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用Microsoft Excel 2003軟件進行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計學(xué)分析。計數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用U檢驗；P＜0.05為比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 大腸埃希菌標本來源 136株大腸埃希菌中，分離自尿液64株，占47.06%；傷口分泌物27株，占19.85%；膿液22株，占16.18%；痰液13株，占9.56%；血液8株，占5.88%；留置針2株，占1.47%。

2.2 大腸埃希菌體外藥敏試驗檢測結(jié)果 136株大腸埃希菌對20種抗菌藥物的敏感率見表1。大腸埃希菌對亞胺培南、美羅培南、哌拉西林／他唑巴坦的敏感率分別為97.79%、97.06%和88.24%，對阿莫西林／克拉維酸和阿米卡星的敏感率為70.59%和75.74%，對替卡西林／克拉維酸、頭孢西丁和奈替米星的敏感率為50.00%～60.00%，對其他抗菌藥物的敏感率均小于50.00%。

表1 大腸埃希菌對20種抗菌藥物的敏感率（n＝136）

續(xù)表1 大腸埃希菌對20種抗菌藥物的敏感率（n＝136）

2.3 不同標本來源菌株藥敏試驗檢測結(jié)果比較 不同標本來源菌株藥敏試驗檢測結(jié)果見表2。分離自尿液的大腸埃希菌對頭孢西丁、頭孢噻肟、頭孢他啶、亞胺培南、妥布霉素、阿米卡星、慶大霉素、哌拉西林／他唑巴坦、頭孢吡肟、美羅培南的敏感率高于非尿液標本。其中分離自尿液標本的菌株敏感率居前3位的抗菌藥物分別為亞胺培南（98.44%）、美羅培南（98.44%）及哌拉西林／他唑巴坦（90.63%），均高于分離自非尿液標本的菌株（P＜0.05）。分離自尿液標本的菌株對阿米卡星的敏感率為89.06%，而分離自非尿液標本的菌株對其敏感率僅為63.89%，前者的敏感率高于后者（P＜0.05）。

表2 不同類型標本來源菌株藥物敏感率分析

2.4 不同性別患者來源菌株藥敏試驗檢測結(jié)果比較 不同性別患者來源菌株藥敏試驗檢測結(jié)果見表3。分離自男性患者的菌株對阿米卡星和慶大霉素的敏感性高于分離自女性患者的菌株，對其他抗菌藥物的敏感性低于分離自女性患者的菌株。其中，分離自女性患者菌株敏感率居前3位的抗菌藥物分別為亞胺培南（100.00%）、美羅培南（98.44%）及哌拉西林／他唑巴坦（93.75%），高于分離自男性患者菌株的敏感率，但比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

表3 不同性別患者來源菌株藥物敏感率分析

3 討 論

大腸埃希菌是較為常見的條件致病菌，也是引起院內(nèi)感染最重要的腸桿菌科細菌之一。本院已將大腸埃希菌納入了醫(yī)院感染監(jiān)控體系之中［2］。泌尿系統(tǒng)感染則是大腸埃希菌導(dǎo)致的最為主要的感染類型。藥敏試驗檢測結(jié)果顯示，大腸埃希菌對亞胺培南、美羅培南、哌拉西林／他唑巴坦的敏感率分別為97.79%、97.06%和88.24%，對阿莫西林／克拉維酸和阿米卡星的敏感率為70.59%和75.74%，對替卡西林／克拉維酸、頭孢西丁和奈替米星的敏感率為50.00%～60.00%，對其他抗菌藥物的敏感率均不超過50.00%。由此可見，大腸埃希菌對各種抗菌藥物具有不同程度的耐藥性，其中對亞胺培南最為敏感，此結(jié)果與類似研究報道結(jié)論相符［3－5］。大腸埃希菌對臨床常用抗菌藥物的敏感率較低，應(yīng)引起臨床的高度重視。

人體內(nèi)的大腸埃希菌主要存在于腸道系統(tǒng)，但幾乎在人體的其他任何部位標本中均可檢出，尤其在傷口（創(chuàng)面）分泌物標本中，大腸埃希菌檢出率亦較高。本研究中，分離自傷口分泌物標本的大腸埃希菌所占比例為19.85%，僅次于分離自尿液標本的菌株。因此，臨床醫(yī)生和護士應(yīng)高度重視傷口（創(chuàng)面）的治療和護理，避免傷口被大腸埃希菌所感染［6－10］。

本研究結(jié)果顯示，分離自尿液標本和非尿液標本的菌株對常用抗菌藥物的敏感率較為接近。其中，分離自尿液標本的菌株敏感率居前3位的抗菌藥物分別為亞胺培南、美羅培南、哌拉西林／他唑巴坦，且分離自尿液標本的菌株對這3種抗菌藥的敏感率均略高于分離自非尿液標本的菌株。分離自尿液標本的菌株對阿米卡星也相對較為敏感，敏感率為89.06%，排在第4位。然而，分離自非尿液標本的菌株對阿米卡星的敏感率則較低，僅為63.89%。分離自尿液和非尿液標本的菌株對阿米卡星的敏感率存在較大的差異（P＜0.05），可能與非尿液標本的標本類型較多而導(dǎo)致藥敏試驗檢測結(jié)果出現(xiàn)偏差有關(guān)。因此，在進行臨床標本致病菌分離、藥敏試驗檢測和感染性疾病的治療時，應(yīng)有所區(qū)別地處理。此外，本研究也發(fā)現(xiàn)，隨著耐藥菌株的增多，具有多重耐藥性的菌株檢出數(shù)量也有所增加。

本研究結(jié)果顯示，男性和女性患者來源菌株所占比例及其對各種抗菌藥物的敏感性較為接近。其中，男性患者來源菌株敏感率居前3位的抗菌藥物分別為亞胺培南、美羅培南、哌拉西林／他唑巴坦，且對上述3種抗菌藥物的敏感率均略低于女性患者來源菌株。男性患者來源菌株對阿米卡星的敏感率高于阿莫西林／克拉維酸，而女性患者來源菌株正好相反，這可能與臨床醫(yī)生對于不同性別患者可能具有不同的習(xí)慣性用藥有關(guān)。女性患者來源菌株中未檢出亞胺培南耐藥菌株，即：女性患者來源菌株對亞胺培南的敏感率為100.00%。對于女性大腸埃希菌感染患者治療用藥的選擇應(yīng)較為謹慎，因為亞胺培南抗菌譜極廣，抗菌效果極強，很容易造成誘導(dǎo)性耐藥菌株的出現(xiàn)，嚴重時甚至有可能導(dǎo)致繼發(fā)性真菌感染的發(fā)生。

綜上所述，細菌耐藥性增強及多重耐藥菌株的出現(xiàn)與抗菌藥物長時間、大劑量、隨意性使用有關(guān)。本院已建立細菌耐藥預(yù)警監(jiān)測系統(tǒng)，并受到南京軍區(qū)基金項目的資助。通過應(yīng)用該預(yù)警系統(tǒng)，能夠定期將實驗室病原菌體外藥敏試驗檢測結(jié)果反饋至臨床，從而為臨床合理選擇治療藥物提供科學(xué)依據(jù)。

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