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梓樹根皮有效成分的初步研究

2014-10-24 10:16:36邵金華李軍艷
湖南科技學院學報 2014年10期
關鍵詞:實驗檢測

邵金華 李軍艷 劉 歡 鄧 佳

(湖南科技學院 生命科學與化學工程系,湖南 永州 425199)

梓樹是紫葳科梓屬植物,樹皮習稱梓白皮,果實稱梓實,均供藥用,具有清熱、解毒、殺蟲和利尿的功能[1]。梓樹是一種多功能綜合利用的樹種,具有廣泛的應用開發價值[2]。我市梓樹野生資源豐富,積極開展梓屬植物的科學研究與開發應用,具有重要的意義和廣泛的應用前景[3]。國內外對其在醫藥臨床方面的研究報告很多[4],而對其根皮部的研究未見報道,本文以梓樹根皮為實驗材料,對其有效成分進行了系統的定性分析實驗,為梓樹根皮的進一步開發和提取奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

梓樹根皮采自于湖南省永州市西山上,晾干,植物粉碎機粉碎,備用。

1.2 儀器

R201D-II-旋轉蒸發儀,鄭州長城科工貿有限公司;SHB-111-循環水式多用真空泵,鄭州長盛實驗設備有限公司;ZF-1-三用紫外分析儀,上海精科實業有限公司;DF-101S-集熱恒溫加熱磁力攪拌器,鄭州長盛實驗設備有限公司等。

1.3 試劑

乙醇、石油醚、明膠、氫氧化鉀、醋酸鉛、茚三酮、氯化鐵、α-萘酚、間二硝基苯、氯仿、濃硫酸、鎂粉、氫氧化鈉 、鹽酸、苦味酸、濃鹽酸、冰醋酸等均為分析試劑。

1.4 方法

1.4.1 梓樹根皮水提取液的制備

取梓樹跟皮粉末5g,加50ml蒸餾水,浸泡24h,濾取部分濾液,供試檢氨基酸、多肽、蛋白質。剩余濾渣在50~60℃的水溶液中水浴加熱10min-1小時后過濾。濾液供檢試單糖、多糖、苷類、皂苷、酚類、鞣質、有機酸、生物堿鹽等。

1.4.2 梓樹根皮95%乙醇提取液的制備

取梓樹根皮粉末10g,加95%乙醇100ml加熱回流1小時,冷卻,濾過,得濾液。取1/2濾液作黃酮體、蒽醌、酚類、香豆素、內酯、有機酸、鞣質、萜類、強心苷、甾體類等檢查。

1.4.3 梓樹根皮酸水提取液的制備

將95%乙醇提取液剩余1/2濾液置水浴上濃縮成膏狀(至無醇味),加入5%鹽酸溶液搖之溶解,濾過,取濾液即得酸水提取液,作生物堿檢查。

1.4.4 梓樹根皮乙醚提取液的制備

取梓樹根皮粉末1g,加入石油醚 10ml,60℃~90℃水浴加熱 2~3個小時,過濾,濾液放在表面皿上,讓石油醚揮發,殘留物加95%的乙醇后進行萜類、甾類、脂肪等項的檢查。

1.5 操作要點

操作要點實驗[5-6]

1.5.1 明膠試驗

取檢測液,加1%明膠溶液2~3滴,如變渾濁或有沉淀為鞣質的正反應。

1.5.2 堿性試驗

取檢測液,加 10% KOH液1~2滴,呈深紅色為蒽醌類正反應。

1.5.3 堿性苦味酸反應

取檢測液,加堿性苦味酸試劑1~3滴,觀察現象。

1.5.4 開環閉環試驗

取檢測液,加1% NaOH 1ml,于沸水浴上加熱10min后加10%鹽酸后,如溶液變渾濁,再加20%NaOH溶液堿化,則又轉為澄明,為內酯、香豆素類的正反應。

1.5.5 硅鎢酸試驗

取檢測液,加入硅鎢酸試劑,如有淡黃色或灰白色沉淀,則表明含有生物堿。

1.5.6 間二硝基苯試驗

取檢測液,加間二硝基苯試劑,出現黃褐色或紫色為甾體類正反應。

1.5.7 氯仿-濃硫酸反應

取氯仿液于干燥小試管內,沿管壁小心加濃硫酸,如氯仿層呈紅色,濃硫酸層有綠色熒光,為植物甾醇的正反應。

1.5.8 茚三酮試驗

取檢測液,滴于濾紙上,噴灑0.2%茚三酮后于110℃加熱后,觀察現象,如出現藍紫色或黃色斑點為氨基酸、多肽的正反應。

1.5.9 加熱沉淀試驗

取檢測液,,加熱至沸,如出現渾濁或沉淀時,表明有蛋白質。

1.5.10 α-萘酚試驗(Molish 反應)

取檢測液,,加10%α-萘酚乙醇溶液2~3滴,搖勻,沿試管壁緩緩加入1ml濃硫酸,界面出現紫色環,為糖、多糖、及苷類的正反應。

1.5.11 堿性酒石酸銅試驗(Fehling反應)

取檢測液,,加新配制的堿性酒石酸銅試劑,在沸水浴上加熱10min。如產生磚紅色沉淀為還原糖的正反應。

1.5.12 三氯化鐵試驗

取檢測液,,加1%三氯化鐵溶液1~2滴,呈藍色或綠色為酚類的正反應。

1.5.13 泡沫試驗

取檢測液,在試管中,用力振搖2min,如產生的泡沫持續10min以上不消失,為皂苷的正反應。

1.5.14 pH試紙檢測

取檢測液,滴于濾紙上,用0.05%溴酚藍乙醇溶液噴霧,在藍色背景上有黃色帶為有機酸的正反應。

1.5.15 紫外燈下照射

取檢測液,滴于濾紙上,在紫外燈下觀察,發有天藍色、藍綠色或黃綠色熒光帶為香豆素類的正反應。

1.5.16 雙縮脲實驗

取檢測液,加10%氫氧化鈉溶液兩滴,搖勻,再滴加0.5%硫酸銅溶液兩滴,搖勻,如呈紫色、紅色為蛋白質或多肽的正反應。

1.5.17 堿式醋酸鉛反應

取檢測液,加飽和堿式醋酸鉛試劑,如有黃色沉淀,為黃酮類正反應。

2 結果與分析

2.1 水提取液成分定性檢測實驗的結果

表1 水提取液定性檢測實驗結果Table 1 Results of qualitative determination about water extract

2.2 95%乙醇、5%鹽酸提取液成分定性檢測的實驗結果

表2 95%乙醇、5%鹽酸提取液定性檢測實驗結果Table 2 Results of qualitative determination about ethanol extract

注:“++”表示反應顯著,“+”表示有此反應,“-”表示無此反應

2.3 石油醚提取液成分定性檢測的實驗結果

表3 石油醚提取液定性檢測實驗結果Table3 Results of qualitative determination about Petroleum ether extract

結 論

通過對梓樹皮化學成分的初步研究,梓樹根皮中可能含有蛋白質、氨基酸、多肽、皂苷、糖苷類、黃酮、有機酸類、生物堿、蒽醌類、內酯、香豆素類等化學成分。

本文首次對梓樹根皮進行化學成分預實驗,初步確定了其可能含有多種有效成分,為進一步對該植物的生物活性成分的確定、提取、分離、純化研究提供了試驗基礎。

[1]趙永昕,帕提古麗﹒馬合木提.新疆天山花楸不同部位總黃酮的提取及其含量測定[J].食品科學,2005,26 (9):414-415.

[2]王奇志,梁敬鈺.梓實化學成分研究[J].中草藥,2005,36(1): 15-17.

[3]李朝虹,古代梓.楸考異[J].北京林業大學學報,2007, 6(4): 20-24.

[4]王奇志,梁敬鈺.梓屬植物化學成分研究進展[J].中草藥, 2003, 34(7):2-4.

[5]王潤梅,岳志勁,張永芳.北芪菇化學成分的初步研究[J].山西大同大學學報:自然科學版,2012,28( 4): 32-34.

[6]任杰,劉洪位,郭莉,等.紫莖澤蘭化學成分初步研究[J].廣州化工,2011,39(15):123 -124.

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