全自動凱氏定氮儀測定食品中蛋白質(zhì)分析

趙艷萍+陳平+張蕾

摘 要：蛋白質(zhì)作為維持生命的重要物質(zhì)基礎(chǔ)之一，在人體內(nèi)可促進新生組織的構(gòu)成，制造體內(nèi)氧化還原反應(yīng)所需要的激素以及酶性物質(zhì)。食品安全研究視角下，食品當(dāng)中的蛋白質(zhì)成分含量與人體健康有密切關(guān)系，對食品當(dāng)中的蛋白質(zhì)構(gòu)成進行準(zhǔn)確、可靠的反應(yīng)有重要價值。文章為簡化當(dāng)前對食品中蛋白質(zhì)含量進行測定的步驟與方法，在檢測過程當(dāng)中應(yīng)用了全自動凱氏定氮儀，并通過實驗方式驗證全自動凱氏定氮儀對分析食品蛋白質(zhì)含量的重要價值，希望能夠引起業(yè)內(nèi)人士的廣泛關(guān)注與重視，促進本檢測方案的應(yīng)用與推廣。

關(guān)鍵詞：全自動定氮儀 食品 蛋白質(zhì) 檢測 分析

中圖分類號：TS212.2 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：1674-098X（2014）03（b）-0045-01

蛋白質(zhì)是食品當(dāng)中的主要營養(yǎng)成分之一，屬于分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜的含氮有機化合物。主要的構(gòu)成要素包括氨基酸以及肽鍵。在當(dāng)前的技術(shù)條件支持下，食品當(dāng)中蛋白質(zhì)含量的測定方法有以下幾種類型：其一為甲醛滴定法、其二為電流法、其三為紫外分光光度法、其四為雙縮脲法。但以上檢測方法在實際應(yīng)用中均存在不同程度上的缺陷，或操作步驟過于繁瑣，可行性不高，或相關(guān)設(shè)備儀器的投入資金過大，或操作反應(yīng)時間較長，或數(shù)據(jù)缺乏精確性優(yōu)勢。故而需要對食品中的蛋白質(zhì)分析方法進行合理的改進。文章即在對食品當(dāng)中蛋白質(zhì)成分進行檢測的過程當(dāng)中應(yīng)用全自動凱氏定氮儀。現(xiàn)針對相關(guān)操作方法進行如下概括。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

在應(yīng)用全自動凱氏定氮儀對食品中蛋白質(zhì)含量進行測量與分析的過程當(dāng)中，所涉及到的儀器設(shè)備包括以下幾個方面：1）全自動凱氏定氮儀；2）樣品消化器。同時，所涉及到的操作試劑包括以下幾個方面：1）鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。該試劑的制備方法為：0.10 mmol/L劑量鹽酸標(biāo)準(zhǔn)儲備液，混合100.0 ml劑量水分，定容形成1000.0 ml劑量實驗試劑；2）氫氧化鈉溶液。該試劑的制備方法為：4000.0 g劑量氫氧化鈉，混合10.0 L劑量水分，定容形成實驗試劑；3）濃硫酸分析純試劑；4）硼酸吸收溶液。該試劑的制備方法為：100.0 g劑量硼酸，混合10.0 L劑量水分，添加100.0 ml劑量0.1%甲基紅溶液以及70.0 ml劑量0.1%溴甲酚綠溶液制備形成；5）銅催化劑。

1.2 方法

在應(yīng)用全自動凱氏定氮儀對食品中蛋白質(zhì)成分進行分析的過程當(dāng)中，具體的操作方法為：1）準(zhǔn)備分析對象。本次使用全自動凱氏定氮儀對蛋白質(zhì)進行分析中，所對應(yīng)的分析對象包括：乳酸菌飲料、純牛奶、鮮豆?jié){、全脂奶粉。2）具體分析。精密稱取以上乳酸菌飲料、純牛奶、鮮豆?jié){、全脂奶粉樣品放入消化管當(dāng)中。加入兩片銅催化片。混合10.0 ml劑量濃硫酸試劑，充分搖動均勻，確保樣品處于完全濕潤狀態(tài)。消化管放置于消化器當(dāng)中（消化器預(yù)先經(jīng)過預(yù)熱處理，預(yù)熱溫度達到420.0 ℃），反應(yīng)時間持續(xù)0.5～1.0 h，待觀察反應(yīng)儀器當(dāng)中樣品消化呈藍(lán)綠色液體狀態(tài)后取出冷卻，冷卻時間控制為15.0～20.0 min。消化管放置入全自動凱氏定氮儀當(dāng)中，關(guān)閉安全門，由儀器自動進行蒸餾、滴定工作，完成反應(yīng)后對檢測結(jié)果進行輸出處理。

2 結(jié)果

2.1 儀器精密度測定結(jié)果

全自動凱氏定氮儀測定食品中蛋白質(zhì)期間的儀器精密度測定結(jié)果如下表所示（見表1）。檢測過程當(dāng)中針對每一樣品分別進行5次檢驗，平行檢測結(jié)果平均值所對應(yīng)相對標(biāo)準(zhǔn)片偏差均<2%標(biāo)準(zhǔn)，證實應(yīng)用全自動凱氏定氮儀進行食品中蛋白質(zhì)含量檢測精確度高。

2.2 儀器準(zhǔn)確度測定結(jié)果

全自動凱氏定氮儀測定食品中蛋白質(zhì)期間的儀器準(zhǔn)確度測定結(jié)果如下表所示（見表2）。檢測過程當(dāng)中，通過加標(biāo)硫酸亞鐵銨回收試驗的方式證實硫酸亞鐵銨所對應(yīng)回收率取值均>99%標(biāo)準(zhǔn)，證實應(yīng)用全自動凱氏定氮儀進行食品中蛋白質(zhì)含量檢測準(zhǔn)確度高。

2.3 對比測定結(jié)果

在應(yīng)用全自動凱氏定氮儀對樣品蛋白質(zhì)進行測定期間，同時使用經(jīng)典凱氏定氮法對樣品進行檢測，兩種方法下的測定結(jié)果如下表所示（見表3）。證實應(yīng)用全自動凱氏定氮儀檢測與常規(guī)操作方法檢測數(shù)據(jù)無明顯差異，數(shù)據(jù)真實可靠。

3 結(jié)語

研究顯示，在對食品中蛋白質(zhì)含量進行測定與分析的過程當(dāng)中，全自動定凱氏氮儀是在化學(xué)分析基礎(chǔ)之上的改進，測定原理與化學(xué)分析方法基本一致。相對于對玻璃儀器的整合，且兼顧對機電一體化控制技術(shù)的實現(xiàn)。通過對全自動凱氏定氮儀的應(yīng)用，能夠使整個測定流程更加的簡單、快速、高效。同時，由于整個檢測流程全自動，故而可以避免因人為誤差而對數(shù)據(jù)精確性產(chǎn)生不良的影響。本次檢測實驗中證實：應(yīng)用全自動凱氏定氮儀進行食品中蛋白質(zhì)含量檢測精確度高、準(zhǔn)確度高、與常規(guī)操作方法檢測數(shù)據(jù)無明顯差異，數(shù)據(jù)真實可靠。

參考文獻

[1] 王敏，張秀芹，楊振宇，等.HPLC-MS/MS檢測含蛋白質(zhì)輻照食品中的鄰酪氨酸[J].分析測試學(xué)報，2011，30（10）：1187-1190.

[2] 李紅艷，汪鳳云，劉肖，等.離子色譜法檢測含蛋白質(zhì)食品中三聚氰胺[J].福建分析測試，2009，18（4）：7-12.

[3] 王小燕，王錫昌，劉源，等.基于SVM算法的近紅外光譜技術(shù)在魚糜水分和蛋白質(zhì)檢測中的應(yīng)用[J].光譜學(xué)與光譜分析，2012，32（9）：2418-2421.

[4] 牛巍，侯彩云，祝曉芳，等.三氯乙酸沉淀法與硫酸銅沉淀法在液態(tài)奶蛋白質(zhì)檢測中適用性研究[J].中國乳品工業(yè)，2008，36（9）：59-61.endprint

摘 要：蛋白質(zhì)作為維持生命的重要物質(zhì)基礎(chǔ)之一，在人體內(nèi)可促進新生組織的構(gòu)成，制造體內(nèi)氧化還原反應(yīng)所需要的激素以及酶性物質(zhì)。食品安全研究視角下，食品當(dāng)中的蛋白質(zhì)成分含量與人體健康有密切關(guān)系，對食品當(dāng)中的蛋白質(zhì)構(gòu)成進行準(zhǔn)確、可靠的反應(yīng)有重要價值。文章為簡化當(dāng)前對食品中蛋白質(zhì)含量進行測定的步驟與方法，在檢測過程當(dāng)中應(yīng)用了全自動凱氏定氮儀，并通過實驗方式驗證全自動凱氏定氮儀對分析食品蛋白質(zhì)含量的重要價值，希望能夠引起業(yè)內(nèi)人士的廣泛關(guān)注與重視，促進本檢測方案的應(yīng)用與推廣。

關(guān)鍵詞：全自動定氮儀 食品 蛋白質(zhì) 檢測 分析

中圖分類號：TS212.2 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：1674-098X（2014）03（b）-0045-01

蛋白質(zhì)是食品當(dāng)中的主要營養(yǎng)成分之一，屬于分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜的含氮有機化合物。主要的構(gòu)成要素包括氨基酸以及肽鍵。在當(dāng)前的技術(shù)條件支持下，食品當(dāng)中蛋白質(zhì)含量的測定方法有以下幾種類型：其一為甲醛滴定法、其二為電流法、其三為紫外分光光度法、其四為雙縮脲法。但以上檢測方法在實際應(yīng)用中均存在不同程度上的缺陷，或操作步驟過于繁瑣，可行性不高，或相關(guān)設(shè)備儀器的投入資金過大，或操作反應(yīng)時間較長，或數(shù)據(jù)缺乏精確性優(yōu)勢。故而需要對食品中的蛋白質(zhì)分析方法進行合理的改進。文章即在對食品當(dāng)中蛋白質(zhì)成分進行檢測的過程當(dāng)中應(yīng)用全自動凱氏定氮儀。現(xiàn)針對相關(guān)操作方法進行如下概括。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

在應(yīng)用全自動凱氏定氮儀對食品中蛋白質(zhì)含量進行測量與分析的過程當(dāng)中，所涉及到的儀器設(shè)備包括以下幾個方面：1）全自動凱氏定氮儀；2）樣品消化器。同時，所涉及到的操作試劑包括以下幾個方面：1）鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。該試劑的制備方法為：0.10 mmol/L劑量鹽酸標(biāo)準(zhǔn)儲備液，混合100.0 ml劑量水分，定容形成1000.0 ml劑量實驗試劑；2）氫氧化鈉溶液。該試劑的制備方法為：4000.0 g劑量氫氧化鈉，混合10.0 L劑量水分，定容形成實驗試劑；3）濃硫酸分析純試劑；4）硼酸吸收溶液。該試劑的制備方法為：100.0 g劑量硼酸，混合10.0 L劑量水分，添加100.0 ml劑量0.1%甲基紅溶液以及70.0 ml劑量0.1%溴甲酚綠溶液制備形成；5）銅催化劑。

1.2 方法

在應(yīng)用全自動凱氏定氮儀對食品中蛋白質(zhì)成分進行分析的過程當(dāng)中，具體的操作方法為：1）準(zhǔn)備分析對象。本次使用全自動凱氏定氮儀對蛋白質(zhì)進行分析中，所對應(yīng)的分析對象包括：乳酸菌飲料、純牛奶、鮮豆?jié){、全脂奶粉。2）具體分析。精密稱取以上乳酸菌飲料、純牛奶、鮮豆?jié){、全脂奶粉樣品放入消化管當(dāng)中。加入兩片銅催化片。混合10.0 ml劑量濃硫酸試劑，充分搖動均勻，確保樣品處于完全濕潤狀態(tài)。消化管放置于消化器當(dāng)中（消化器預(yù)先經(jīng)過預(yù)熱處理，預(yù)熱溫度達到420.0 ℃），反應(yīng)時間持續(xù)0.5～1.0 h，待觀察反應(yīng)儀器當(dāng)中樣品消化呈藍(lán)綠色液體狀態(tài)后取出冷卻，冷卻時間控制為15.0～20.0 min。消化管放置入全自動凱氏定氮儀當(dāng)中，關(guān)閉安全門，由儀器自動進行蒸餾、滴定工作，完成反應(yīng)后對檢測結(jié)果進行輸出處理。

2 結(jié)果

2.1 儀器精密度測定結(jié)果

全自動凱氏定氮儀測定食品中蛋白質(zhì)期間的儀器精密度測定結(jié)果如下表所示（見表1）。檢測過程當(dāng)中針對每一樣品分別進行5次檢驗，平行檢測結(jié)果平均值所對應(yīng)相對標(biāo)準(zhǔn)片偏差均<2%標(biāo)準(zhǔn)，證實應(yīng)用全自動凱氏定氮儀進行食品中蛋白質(zhì)含量檢測精確度高。

2.2 儀器準(zhǔn)確度測定結(jié)果

全自動凱氏定氮儀測定食品中蛋白質(zhì)期間的儀器準(zhǔn)確度測定結(jié)果如下表所示（見表2）。檢測過程當(dāng)中，通過加標(biāo)硫酸亞鐵銨回收試驗的方式證實硫酸亞鐵銨所對應(yīng)回收率取值均>99%標(biāo)準(zhǔn)，證實應(yīng)用全自動凱氏定氮儀進行食品中蛋白質(zhì)含量檢測準(zhǔn)確度高。

2.3 對比測定結(jié)果

在應(yīng)用全自動凱氏定氮儀對樣品蛋白質(zhì)進行測定期間，同時使用經(jīng)典凱氏定氮法對樣品進行檢測，兩種方法下的測定結(jié)果如下表所示（見表3）。證實應(yīng)用全自動凱氏定氮儀檢測與常規(guī)操作方法檢測數(shù)據(jù)無明顯差異，數(shù)據(jù)真實可靠。

3 結(jié)語

研究顯示，在對食品中蛋白質(zhì)含量進行測定與分析的過程當(dāng)中，全自動定凱氏氮儀是在化學(xué)分析基礎(chǔ)之上的改進，測定原理與化學(xué)分析方法基本一致。相對于對玻璃儀器的整合，且兼顧對機電一體化控制技術(shù)的實現(xiàn)。通過對全自動凱氏定氮儀的應(yīng)用，能夠使整個測定流程更加的簡單、快速、高效。同時，由于整個檢測流程全自動，故而可以避免因人為誤差而對數(shù)據(jù)精確性產(chǎn)生不良的影響。本次檢測實驗中證實：應(yīng)用全自動凱氏定氮儀進行食品中蛋白質(zhì)含量檢測精確度高、準(zhǔn)確度高、與常規(guī)操作方法檢測數(shù)據(jù)無明顯差異，數(shù)據(jù)真實可靠。

參考文獻

[1] 王敏，張秀芹，楊振宇，等.HPLC-MS/MS檢測含蛋白質(zhì)輻照食品中的鄰酪氨酸[J].分析測試學(xué)報，2011，30（10）：1187-1190.

[2] 李紅艷，汪鳳云，劉肖，等.離子色譜法檢測含蛋白質(zhì)食品中三聚氰胺[J].福建分析測試，2009，18（4）：7-12.

[3] 王小燕，王錫昌，劉源，等.基于SVM算法的近紅外光譜技術(shù)在魚糜水分和蛋白質(zhì)檢測中的應(yīng)用[J].光譜學(xué)與光譜分析，2012，32（9）：2418-2421.

[4] 牛巍，侯彩云，祝曉芳，等.三氯乙酸沉淀法與硫酸銅沉淀法在液態(tài)奶蛋白質(zhì)檢測中適用性研究[J].中國乳品工業(yè)，2008，36（9）：59-61.endprint

摘 要：蛋白質(zhì)作為維持生命的重要物質(zhì)基礎(chǔ)之一，在人體內(nèi)可促進新生組織的構(gòu)成，制造體內(nèi)氧化還原反應(yīng)所需要的激素以及酶性物質(zhì)。食品安全研究視角下，食品當(dāng)中的蛋白質(zhì)成分含量與人體健康有密切關(guān)系，對食品當(dāng)中的蛋白質(zhì)構(gòu)成進行準(zhǔn)確、可靠的反應(yīng)有重要價值。文章為簡化當(dāng)前對食品中蛋白質(zhì)含量進行測定的步驟與方法，在檢測過程當(dāng)中應(yīng)用了全自動凱氏定氮儀，并通過實驗方式驗證全自動凱氏定氮儀對分析食品蛋白質(zhì)含量的重要價值，希望能夠引起業(yè)內(nèi)人士的廣泛關(guān)注與重視，促進本檢測方案的應(yīng)用與推廣。

關(guān)鍵詞：全自動定氮儀 食品 蛋白質(zhì) 檢測 分析

中圖分類號：TS212.2 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：1674-098X（2014）03（b）-0045-01

蛋白質(zhì)是食品當(dāng)中的主要營養(yǎng)成分之一，屬于分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜的含氮有機化合物。主要的構(gòu)成要素包括氨基酸以及肽鍵。在當(dāng)前的技術(shù)條件支持下，食品當(dāng)中蛋白質(zhì)含量的測定方法有以下幾種類型：其一為甲醛滴定法、其二為電流法、其三為紫外分光光度法、其四為雙縮脲法。但以上檢測方法在實際應(yīng)用中均存在不同程度上的缺陷，或操作步驟過于繁瑣，可行性不高，或相關(guān)設(shè)備儀器的投入資金過大，或操作反應(yīng)時間較長，或數(shù)據(jù)缺乏精確性優(yōu)勢。故而需要對食品中的蛋白質(zhì)分析方法進行合理的改進。文章即在對食品當(dāng)中蛋白質(zhì)成分進行檢測的過程當(dāng)中應(yīng)用全自動凱氏定氮儀。現(xiàn)針對相關(guān)操作方法進行如下概括。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

在應(yīng)用全自動凱氏定氮儀對食品中蛋白質(zhì)含量進行測量與分析的過程當(dāng)中，所涉及到的儀器設(shè)備包括以下幾個方面：1）全自動凱氏定氮儀；2）樣品消化器。同時，所涉及到的操作試劑包括以下幾個方面：1）鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。該試劑的制備方法為：0.10 mmol/L劑量鹽酸標(biāo)準(zhǔn)儲備液，混合100.0 ml劑量水分，定容形成1000.0 ml劑量實驗試劑；2）氫氧化鈉溶液。該試劑的制備方法為：4000.0 g劑量氫氧化鈉，混合10.0 L劑量水分，定容形成實驗試劑；3）濃硫酸分析純試劑；4）硼酸吸收溶液。該試劑的制備方法為：100.0 g劑量硼酸，混合10.0 L劑量水分，添加100.0 ml劑量0.1%甲基紅溶液以及70.0 ml劑量0.1%溴甲酚綠溶液制備形成；5）銅催化劑。

1.2 方法

在應(yīng)用全自動凱氏定氮儀對食品中蛋白質(zhì)成分進行分析的過程當(dāng)中，具體的操作方法為：1）準(zhǔn)備分析對象。本次使用全自動凱氏定氮儀對蛋白質(zhì)進行分析中，所對應(yīng)的分析對象包括：乳酸菌飲料、純牛奶、鮮豆?jié){、全脂奶粉。2）具體分析。精密稱取以上乳酸菌飲料、純牛奶、鮮豆?jié){、全脂奶粉樣品放入消化管當(dāng)中。加入兩片銅催化片。混合10.0 ml劑量濃硫酸試劑，充分搖動均勻，確保樣品處于完全濕潤狀態(tài)。消化管放置于消化器當(dāng)中（消化器預(yù)先經(jīng)過預(yù)熱處理，預(yù)熱溫度達到420.0 ℃），反應(yīng)時間持續(xù)0.5～1.0 h，待觀察反應(yīng)儀器當(dāng)中樣品消化呈藍(lán)綠色液體狀態(tài)后取出冷卻，冷卻時間控制為15.0～20.0 min。消化管放置入全自動凱氏定氮儀當(dāng)中，關(guān)閉安全門，由儀器自動進行蒸餾、滴定工作，完成反應(yīng)后對檢測結(jié)果進行輸出處理。

2 結(jié)果

2.1 儀器精密度測定結(jié)果

全自動凱氏定氮儀測定食品中蛋白質(zhì)期間的儀器精密度測定結(jié)果如下表所示（見表1）。檢測過程當(dāng)中針對每一樣品分別進行5次檢驗，平行檢測結(jié)果平均值所對應(yīng)相對標(biāo)準(zhǔn)片偏差均<2%標(biāo)準(zhǔn)，證實應(yīng)用全自動凱氏定氮儀進行食品中蛋白質(zhì)含量檢測精確度高。

2.2 儀器準(zhǔn)確度測定結(jié)果

全自動凱氏定氮儀測定食品中蛋白質(zhì)期間的儀器準(zhǔn)確度測定結(jié)果如下表所示（見表2）。檢測過程當(dāng)中，通過加標(biāo)硫酸亞鐵銨回收試驗的方式證實硫酸亞鐵銨所對應(yīng)回收率取值均>99%標(biāo)準(zhǔn)，證實應(yīng)用全自動凱氏定氮儀進行食品中蛋白質(zhì)含量檢測準(zhǔn)確度高。

2.3 對比測定結(jié)果

在應(yīng)用全自動凱氏定氮儀對樣品蛋白質(zhì)進行測定期間，同時使用經(jīng)典凱氏定氮法對樣品進行檢測，兩種方法下的測定結(jié)果如下表所示（見表3）。證實應(yīng)用全自動凱氏定氮儀檢測與常規(guī)操作方法檢測數(shù)據(jù)無明顯差異，數(shù)據(jù)真實可靠。

3 結(jié)語

研究顯示，在對食品中蛋白質(zhì)含量進行測定與分析的過程當(dāng)中，全自動定凱氏氮儀是在化學(xué)分析基礎(chǔ)之上的改進，測定原理與化學(xué)分析方法基本一致。相對于對玻璃儀器的整合，且兼顧對機電一體化控制技術(shù)的實現(xiàn)。通過對全自動凱氏定氮儀的應(yīng)用，能夠使整個測定流程更加的簡單、快速、高效。同時，由于整個檢測流程全自動，故而可以避免因人為誤差而對數(shù)據(jù)精確性產(chǎn)生不良的影響。本次檢測實驗中證實：應(yīng)用全自動凱氏定氮儀進行食品中蛋白質(zhì)含量檢測精確度高、準(zhǔn)確度高、與常規(guī)操作方法檢測數(shù)據(jù)無明顯差異，數(shù)據(jù)真實可靠。

參考文獻

[1] 王敏，張秀芹，楊振宇，等.HPLC-MS/MS檢測含蛋白質(zhì)輻照食品中的鄰酪氨酸[J].分析測試學(xué)報，2011，30（10）：1187-1190.

[2] 李紅艷，汪鳳云，劉肖，等.離子色譜法檢測含蛋白質(zhì)食品中三聚氰胺[J].福建分析測試，2009，18（4）：7-12.

[3] 王小燕，王錫昌，劉源，等.基于SVM算法的近紅外光譜技術(shù)在魚糜水分和蛋白質(zhì)檢測中的應(yīng)用[J].光譜學(xué)與光譜分析，2012，32（9）：2418-2421.

[4] 牛巍，侯彩云，祝曉芳，等.三氯乙酸沉淀法與硫酸銅沉淀法在液態(tài)奶蛋白質(zhì)檢測中適用性研究[J].中國乳品工業(yè)，2008，36（9）：59-61.endprint