紅細胞血型抗體指標表達對安全輸血的實驗研究

李擁軍等

不規則抗體是指不符合ABO血型系Landsteiner法則的血型抗體，包括ABO亞型抗體和非ABO血型系統的抗體，多數為免疫性抗體（IgG性質）。相關研究[1]顯示，不規則抗體在正常人群的檢出率為0.3%～2%，而正常情況下，不規則抗體不存在人的血液中，但輸血、妊娠等因素可使同種異體紅細胞受抗原刺激而在患者體內產生相應的不規則抗體[2]。對于存在不規則抗體的患者，臨床輸血過程中輸入相應的抗原紅細胞后，則很可能產生溶血反應。因此，輸血前應積極進行不規則抗體的篩查，以避免發生溶血性輸血反應，保證輸血安全。根據介質的不同，臨床主要有酶法、聚凝胺法、抗人球蛋白法及微柱凝膠抗人球蛋白法四種常用方法[3]，該研究分別采用這四種方法對該院2011年5月—2013年5月間5260例有過輸血史或妊娠史的標本分別采用進行不規則抗體檢測，統計并評價不同方法的檢出率等優缺點，以供臨床選用提供參考，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取在該院住院的5 260例有輸血史、妊娠史的患者血液標本，其中有輸血史者2 926例，妊娠史者1 931例，有妊娠史反復輸血者403例；5 260例患者中，男3 258例，女2 002例；年齡11～71歲，平均年齡36.5歲；該實驗方案經該院倫理委員會批準后實施，所有患者入選前均簽署知情同意書。標本為乙二胺四乙酸 （ EDTA ） 抗凝全血。

1.2 儀器與試劑

抗體特異性鑒定譜細胞（批號：20115702）、抗人球蛋白試劑（批號：20110105）、聚凝胺試劑盒（批號：20071018）、1%木瓜酶（批號：20080202）為上海血液生物醫藥有限公司生產，微柱凝膠試劑卡（批號：20100812）為長春博迅生物技術有限責任公司產品，FYQ型免疫微柱孵育器、TD-3B血型血清血多用離心機均為長春博研科學儀器有限責任公司產品。PN126可調式加樣器（5～50 μL）為上海科興生物科技有限公司產品。

1.3 方法

4種方法同時進行，試驗完成后，統計不同方法的操作時間、干擾因素，計算陽性檢出率，分析不規則抗體篩查結果。

1.3.1 標本處理 用離心機以3 000轉/min的速度將5 260份血液標本離心1 min，分離血漿和紅細胞。

1.3.2 微柱凝膠法 微柱凝膠試劑卡的孔中加入50 μL篩選紅細胞及50 μL受血者血漿，用離心機已900 r/min轉速離心2 min，然后再以1 500 r/min離心3 min，觀察結果。

1.3.3 凝聚胺法 在 3支試管中分別加入50 μL篩選紅細胞、100 μL受血者血漿，加入0.7 mL低離子介質，混勻，室溫靜置1 min，加入2滴凝聚胺溶液，混勻，室溫靜置15 s，用離心機3 000 r/min離心18 s，倒掉上清液，使管底剩余0.1 mL液體。輕搖試管，觀察到試管出現明顯凝集后，滴入2滴重懸液，輕搖試管，觀察結果。

1.3.4 抗人球蛋白法 在試管中分別加入受血者血漿100 μL，篩選紅細胞50 μL，混勻，室溫孵育1 min，以3 100 r/min離心15 s，混勻，置入37 ℃孵育箱中孵育30 min，以NS洗滌紅細胞3次，然后滴入100 μL抗球蛋白試劑，3 400 r/min離心15 s，觀察結果。 1.3.5 酶法 在 3支試管中分別加入受血者血漿100 μL，篩選紅細胞50 μL，混勻，室溫靜置1 min，加1%木瓜蛋白酶溶液100 μL，混合，37 ℃孵育30 min，3 400 r/min離心15 s，觀察結果。

1.4 判斷標準

肉眼觀察紅細胞出現凝集即判斷為陽性，若紅細胞凝集消失，懸浮在溶液中即可判斷為陰性。對陽性結果進行不規則抗體鑒定，鑒定結果比對譜細胞的抗原格局圖。

1.5 統計方法

該實驗數據采用SPSS17.0軟件對數據進行分析處理，計數資料采用χ2檢驗。

2 結果

2.1 4種方法不規則抗體檢出率對比

該組研究中，微柱凝膠法與抗人球蛋白法不規則抗體檢出率最高為0.68%；凝聚胺法檢出率率為0.63%，酶法檢出率最低為0.29%，見表1。微柱凝膠法檢測結果中，2926例有反復輸血史者陽性18例，檢出率為0.62%，1931例妊娠史者中陽性14例，檢出率為0.73%，403例有妊娠史反復輸血者陽性4例，檢出率為1.00%，3組陽性率差異有統計學意義（P<0.05）。

3 討論

臨床上將ABO血型系統以外的抗體稱之為不規則抗體，其中大部分不具有研究意義，但其中有一小部分不規則抗體會引起溶血性輸血反應、新生兒溶血病等輸血不良反應，嚴重時可危機患者生命。因此，臨床輸血前進行不規則抗體篩查具有重要意義。

目前，臨床常用檢測技術有酶法、抗人球蛋白法、凝聚胺法及微柱凝膠抗人球蛋白法，四種方法各有優勢和缺點。酶法適合于檢測有重大臨床意義的Rh系統抗體，但不能檢出抗-M、N、S、s、Fya、Fyb等抗體，這是由于酶可以破壞紅細胞膜上的MNSs、Duffy系統抗原，會造成這類抗體漏檢。如該研究中，其他三種方法檢測到抗體M、N，而酶法檢測不到。另外，酶試劑本身活性易失效，難以保存，因此酶法不適于常規不規則抗體的篩查。抗人球蛋白試驗是最可靠、最經典的血型不規則抗體檢測方法，但試驗過程復雜，操作繁瑣，需要較長的等待時間，不適合于臨床緊急輸血或大量標本檢測，因此很少應用于臨床工作，而只作為對少數標本的確定檢驗。凝聚胺法是一種操作簡單、靈敏度高的不規則抗體檢測方法，其成本低廉，操作快捷，對血型抗體敏感性（除抗-K外）均超過抗人球蛋白法、酶法，是多數基層醫院常用方法，但此法需手工操作，易受到人為因素干擾，影響試驗結果的判讀。尤其在溫度低時，其靈敏度也會收到影響，如該組試驗中凝聚胺法造成2例抗抗-JKa不規則抗體漏檢，結果提示，此法可能對對抗-JKa敏感性低，這與馬曙軒[5]等的報道相符。另外，肝素抗凝樣本對試驗結果造成干擾，這是由于肝素所攜帶的高價負離子與凝聚胺所攜帶的正電荷中和，減弱了紅細胞之間的特異性反應。凝聚胺不能檢出抗-K抗體，這是因為凝聚胺和Kell系統抗原都帶正電荷[6]。該研究中，凝聚胺法漏檢的3例為抗-E、抗-JKa，考慮可能是人為操作因素影響和結果判斷誤差，建議在凝聚胺試驗中使用顯微鏡判讀結果，以避免弱陽性標本。微柱凝膠抗人球蛋白法是近年來新興的一種免疫學檢測技術，結合了凝膠過濾技術和抗原抗體反應技術，利用凝膠顆粒的分子篩作用，實現對抗原抗體反應后的紅細胞的篩查，無IgG結合的紅細胞穿過凝膠到達底部，與IgG結合的紅細胞則會被凝膠中的抗IgG拉住，紅細胞被阻止在凝膠柱上層或中間[7]。微柱凝膠法的試劑成本較高，但與酶法、抗人球蛋白法及凝聚胺法相比，具有靈敏度更高，且操作簡便易行，人為干擾因素少，試驗結果易判度、易保存等優點，已成為臨床首選方法。

對以上4種方法的優缺點進行分析可知：酶法漏檢率高、結果難以保存，抗人球蛋白法操作繁瑣、等待時間長。因此，這兩種方法基本不用于不規則抗體的臨床檢測。微柱凝膠抗人球蛋白法和凝聚胺法作為臨床常用方法，在靈敏度上沒有顯著差異，都能滿足臨床應用要求，但微柱凝膠抗人球蛋白法干擾因素少，易于標準化，結果易判斷又能較長時間保存，能提高輸血安全性，宜選為常規配血方法[8]，凝聚胺法操作快速、簡便，適合急診配血。因此，對于硬件條件好的醫院可優先選用微柱凝膠抗人球蛋白法進行不規則抗體的檢測，而對于基層醫院或急診患者時可選用快速準確、成本低廉的凝聚胺法。

[參考文獻]

[1] 何子毅，劉赴平，李偉其，等.受血者血型鑒定準確率及不規則抗體陽性率調查研究[J].實用醫學雜志，2011，27（5）：877-879.

[2] 曲翠娥，鄭洪澤.微柱凝集和聚凝胺法檢測不規則抗體的對照分析[J].中國實用醫刊，2013，40（14）：24-25.

[3] 許大巍.左江濤.輸血前不規則抗體篩查方法的比較[J].中國藥物與臨床，2013，13（5）：677-678.

[4] 中華人民共和國衛生部醫政司. 全國臨床檢驗操作規程[M].3版.南京：東南大學出版社，2006：59-63.

[5] 馬曙軒，白麗霞，劉景漢，等.4種檢測IgG紅細胞抗體方法的比較[J].第三軍醫大學學報，2005，27（7）：660-662.

[6] 張志哲.血型不規則抗體檢測方法及臨床應用[J].內科，2011，6（3）：266-269.

[7] 龍華泉，陳世豪，張偉堅.凝聚胺法與微柱凝聚法檢測不規則抗體的對比分析[J].檢驗醫學與臨床，2013，10（1）：39-40.

[8] 閆有敏.凝聚胺法和微柱凝膠抗人球蛋白法在配血中的應用比較[J].實用醫技雜志，2013，20（4）：418-418.

（收稿日期：2014-04-23）endprint

不規則抗體是指不符合ABO血型系Landsteiner法則的血型抗體，包括ABO亞型抗體和非ABO血型系統的抗體，多數為免疫性抗體（IgG性質）。相關研究[1]顯示，不規則抗體在正常人群的檢出率為0.3%～2%，而正常情況下，不規則抗體不存在人的血液中，但輸血、妊娠等因素可使同種異體紅細胞受抗原刺激而在患者體內產生相應的不規則抗體[2]。對于存在不規則抗體的患者，臨床輸血過程中輸入相應的抗原紅細胞后，則很可能產生溶血反應。因此，輸血前應積極進行不規則抗體的篩查，以避免發生溶血性輸血反應，保證輸血安全。根據介質的不同，臨床主要有酶法、聚凝胺法、抗人球蛋白法及微柱凝膠抗人球蛋白法四種常用方法[3]，該研究分別采用這四種方法對該院2011年5月—2013年5月間5260例有過輸血史或妊娠史的標本分別采用進行不規則抗體檢測，統計并評價不同方法的檢出率等優缺點，以供臨床選用提供參考，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取在該院住院的5 260例有輸血史、妊娠史的患者血液標本，其中有輸血史者2 926例，妊娠史者1 931例，有妊娠史反復輸血者403例；5 260例患者中，男3 258例，女2 002例；年齡11～71歲，平均年齡36.5歲；該實驗方案經該院倫理委員會批準后實施，所有患者入選前均簽署知情同意書。標本為乙二胺四乙酸 （ EDTA ） 抗凝全血。

1.2 儀器與試劑

抗體特異性鑒定譜細胞（批號：20115702）、抗人球蛋白試劑（批號：20110105）、聚凝胺試劑盒（批號：20071018）、1%木瓜酶（批號：20080202）為上海血液生物醫藥有限公司生產，微柱凝膠試劑卡（批號：20100812）為長春博迅生物技術有限責任公司產品，FYQ型免疫微柱孵育器、TD-3B血型血清血多用離心機均為長春博研科學儀器有限責任公司產品。PN126可調式加樣器（5～50 μL）為上海科興生物科技有限公司產品。

1.3 方法

4種方法同時進行，試驗完成后，統計不同方法的操作時間、干擾因素，計算陽性檢出率，分析不規則抗體篩查結果。

1.3.1 標本處理 用離心機以3 000轉/min的速度將5 260份血液標本離心1 min，分離血漿和紅細胞。

1.3.2 微柱凝膠法 微柱凝膠試劑卡的孔中加入50 μL篩選紅細胞及50 μL受血者血漿，用離心機已900 r/min轉速離心2 min，然后再以1 500 r/min離心3 min，觀察結果。

1.3.3 凝聚胺法 在 3支試管中分別加入50 μL篩選紅細胞、100 μL受血者血漿，加入0.7 mL低離子介質，混勻，室溫靜置1 min，加入2滴凝聚胺溶液，混勻，室溫靜置15 s，用離心機3 000 r/min離心18 s，倒掉上清液，使管底剩余0.1 mL液體。輕搖試管，觀察到試管出現明顯凝集后，滴入2滴重懸液，輕搖試管，觀察結果。

1.3.4 抗人球蛋白法 在試管中分別加入受血者血漿100 μL，篩選紅細胞50 μL，混勻，室溫孵育1 min，以3 100 r/min離心15 s，混勻，置入37 ℃孵育箱中孵育30 min，以NS洗滌紅細胞3次，然后滴入100 μL抗球蛋白試劑，3 400 r/min離心15 s，觀察結果。 1.3.5 酶法 在 3支試管中分別加入受血者血漿100 μL，篩選紅細胞50 μL，混勻，室溫靜置1 min，加1%木瓜蛋白酶溶液100 μL，混合，37 ℃孵育30 min，3 400 r/min離心15 s，觀察結果。

1.4 判斷標準

肉眼觀察紅細胞出現凝集即判斷為陽性，若紅細胞凝集消失，懸浮在溶液中即可判斷為陰性。對陽性結果進行不規則抗體鑒定，鑒定結果比對譜細胞的抗原格局圖。

1.5 統計方法

該實驗數據采用SPSS17.0軟件對數據進行分析處理，計數資料采用χ2檢驗。

2 結果

2.1 4種方法不規則抗體檢出率對比

該組研究中，微柱凝膠法與抗人球蛋白法不規則抗體檢出率最高為0.68%；凝聚胺法檢出率率為0.63%，酶法檢出率最低為0.29%，見表1。微柱凝膠法檢測結果中，2926例有反復輸血史者陽性18例，檢出率為0.62%，1931例妊娠史者中陽性14例，檢出率為0.73%，403例有妊娠史反復輸血者陽性4例，檢出率為1.00%，3組陽性率差異有統計學意義（P<0.05）。

3 討論

臨床上將ABO血型系統以外的抗體稱之為不規則抗體，其中大部分不具有研究意義，但其中有一小部分不規則抗體會引起溶血性輸血反應、新生兒溶血病等輸血不良反應，嚴重時可危機患者生命。因此，臨床輸血前進行不規則抗體篩查具有重要意義。

目前，臨床常用檢測技術有酶法、抗人球蛋白法、凝聚胺法及微柱凝膠抗人球蛋白法，四種方法各有優勢和缺點。酶法適合于檢測有重大臨床意義的Rh系統抗體，但不能檢出抗-M、N、S、s、Fya、Fyb等抗體，這是由于酶可以破壞紅細胞膜上的MNSs、Duffy系統抗原，會造成這類抗體漏檢。如該研究中，其他三種方法檢測到抗體M、N，而酶法檢測不到。另外，酶試劑本身活性易失效，難以保存，因此酶法不適于常規不規則抗體的篩查。抗人球蛋白試驗是最可靠、最經典的血型不規則抗體檢測方法，但試驗過程復雜，操作繁瑣，需要較長的等待時間，不適合于臨床緊急輸血或大量標本檢測，因此很少應用于臨床工作，而只作為對少數標本的確定檢驗。凝聚胺法是一種操作簡單、靈敏度高的不規則抗體檢測方法，其成本低廉，操作快捷，對血型抗體敏感性（除抗-K外）均超過抗人球蛋白法、酶法，是多數基層醫院常用方法，但此法需手工操作，易受到人為因素干擾，影響試驗結果的判讀。尤其在溫度低時，其靈敏度也會收到影響，如該組試驗中凝聚胺法造成2例抗抗-JKa不規則抗體漏檢，結果提示，此法可能對對抗-JKa敏感性低，這與馬曙軒[5]等的報道相符。另外，肝素抗凝樣本對試驗結果造成干擾，這是由于肝素所攜帶的高價負離子與凝聚胺所攜帶的正電荷中和，減弱了紅細胞之間的特異性反應。凝聚胺不能檢出抗-K抗體，這是因為凝聚胺和Kell系統抗原都帶正電荷[6]。該研究中，凝聚胺法漏檢的3例為抗-E、抗-JKa，考慮可能是人為操作因素影響和結果判斷誤差，建議在凝聚胺試驗中使用顯微鏡判讀結果，以避免弱陽性標本。微柱凝膠抗人球蛋白法是近年來新興的一種免疫學檢測技術，結合了凝膠過濾技術和抗原抗體反應技術，利用凝膠顆粒的分子篩作用，實現對抗原抗體反應后的紅細胞的篩查，無IgG結合的紅細胞穿過凝膠到達底部，與IgG結合的紅細胞則會被凝膠中的抗IgG拉住，紅細胞被阻止在凝膠柱上層或中間[7]。微柱凝膠法的試劑成本較高，但與酶法、抗人球蛋白法及凝聚胺法相比，具有靈敏度更高，且操作簡便易行，人為干擾因素少，試驗結果易判度、易保存等優點，已成為臨床首選方法。

對以上4種方法的優缺點進行分析可知：酶法漏檢率高、結果難以保存，抗人球蛋白法操作繁瑣、等待時間長。因此，這兩種方法基本不用于不規則抗體的臨床檢測。微柱凝膠抗人球蛋白法和凝聚胺法作為臨床常用方法，在靈敏度上沒有顯著差異，都能滿足臨床應用要求，但微柱凝膠抗人球蛋白法干擾因素少，易于標準化，結果易判斷又能較長時間保存，能提高輸血安全性，宜選為常規配血方法[8]，凝聚胺法操作快速、簡便，適合急診配血。因此，對于硬件條件好的醫院可優先選用微柱凝膠抗人球蛋白法進行不規則抗體的檢測，而對于基層醫院或急診患者時可選用快速準確、成本低廉的凝聚胺法。

[參考文獻]

[1] 何子毅，劉赴平，李偉其，等.受血者血型鑒定準確率及不規則抗體陽性率調查研究[J].實用醫學雜志，2011，27（5）：877-879.

[2] 曲翠娥，鄭洪澤.微柱凝集和聚凝胺法檢測不規則抗體的對照分析[J].中國實用醫刊，2013，40（14）：24-25.

[3] 許大巍.左江濤.輸血前不規則抗體篩查方法的比較[J].中國藥物與臨床，2013，13（5）：677-678.

[4] 中華人民共和國衛生部醫政司. 全國臨床檢驗操作規程[M].3版.南京：東南大學出版社，2006：59-63.

[5] 馬曙軒，白麗霞，劉景漢，等.4種檢測IgG紅細胞抗體方法的比較[J].第三軍醫大學學報，2005，27（7）：660-662.

[6] 張志哲.血型不規則抗體檢測方法及臨床應用[J].內科，2011，6（3）：266-269.

[7] 龍華泉，陳世豪，張偉堅.凝聚胺法與微柱凝聚法檢測不規則抗體的對比分析[J].檢驗醫學與臨床，2013，10（1）：39-40.

[8] 閆有敏.凝聚胺法和微柱凝膠抗人球蛋白法在配血中的應用比較[J].實用醫技雜志，2013，20（4）：418-418.

（收稿日期：2014-04-23）endprint

不規則抗體是指不符合ABO血型系Landsteiner法則的血型抗體，包括ABO亞型抗體和非ABO血型系統的抗體，多數為免疫性抗體（IgG性質）。相關研究[1]顯示，不規則抗體在正常人群的檢出率為0.3%～2%，而正常情況下，不規則抗體不存在人的血液中，但輸血、妊娠等因素可使同種異體紅細胞受抗原刺激而在患者體內產生相應的不規則抗體[2]。對于存在不規則抗體的患者，臨床輸血過程中輸入相應的抗原紅細胞后，則很可能產生溶血反應。因此，輸血前應積極進行不規則抗體的篩查，以避免發生溶血性輸血反應，保證輸血安全。根據介質的不同，臨床主要有酶法、聚凝胺法、抗人球蛋白法及微柱凝膠抗人球蛋白法四種常用方法[3]，該研究分別采用這四種方法對該院2011年5月—2013年5月間5260例有過輸血史或妊娠史的標本分別采用進行不規則抗體檢測，統計并評價不同方法的檢出率等優缺點，以供臨床選用提供參考，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取在該院住院的5 260例有輸血史、妊娠史的患者血液標本，其中有輸血史者2 926例，妊娠史者1 931例，有妊娠史反復輸血者403例；5 260例患者中，男3 258例，女2 002例；年齡11～71歲，平均年齡36.5歲；該實驗方案經該院倫理委員會批準后實施，所有患者入選前均簽署知情同意書。標本為乙二胺四乙酸 （ EDTA ） 抗凝全血。

1.2 儀器與試劑

抗體特異性鑒定譜細胞（批號：20115702）、抗人球蛋白試劑（批號：20110105）、聚凝胺試劑盒（批號：20071018）、1%木瓜酶（批號：20080202）為上海血液生物醫藥有限公司生產，微柱凝膠試劑卡（批號：20100812）為長春博迅生物技術有限責任公司產品，FYQ型免疫微柱孵育器、TD-3B血型血清血多用離心機均為長春博研科學儀器有限責任公司產品。PN126可調式加樣器（5～50 μL）為上海科興生物科技有限公司產品。

1.3 方法

4種方法同時進行，試驗完成后，統計不同方法的操作時間、干擾因素，計算陽性檢出率，分析不規則抗體篩查結果。

1.3.1 標本處理 用離心機以3 000轉/min的速度將5 260份血液標本離心1 min，分離血漿和紅細胞。

1.3.2 微柱凝膠法 微柱凝膠試劑卡的孔中加入50 μL篩選紅細胞及50 μL受血者血漿，用離心機已900 r/min轉速離心2 min，然后再以1 500 r/min離心3 min，觀察結果。

1.3.3 凝聚胺法 在 3支試管中分別加入50 μL篩選紅細胞、100 μL受血者血漿，加入0.7 mL低離子介質，混勻，室溫靜置1 min，加入2滴凝聚胺溶液，混勻，室溫靜置15 s，用離心機3 000 r/min離心18 s，倒掉上清液，使管底剩余0.1 mL液體。輕搖試管，觀察到試管出現明顯凝集后，滴入2滴重懸液，輕搖試管，觀察結果。

1.3.4 抗人球蛋白法 在試管中分別加入受血者血漿100 μL，篩選紅細胞50 μL，混勻，室溫孵育1 min，以3 100 r/min離心15 s，混勻，置入37 ℃孵育箱中孵育30 min，以NS洗滌紅細胞3次，然后滴入100 μL抗球蛋白試劑，3 400 r/min離心15 s，觀察結果。 1.3.5 酶法 在 3支試管中分別加入受血者血漿100 μL，篩選紅細胞50 μL，混勻，室溫靜置1 min，加1%木瓜蛋白酶溶液100 μL，混合，37 ℃孵育30 min，3 400 r/min離心15 s，觀察結果。

1.4 判斷標準

肉眼觀察紅細胞出現凝集即判斷為陽性，若紅細胞凝集消失，懸浮在溶液中即可判斷為陰性。對陽性結果進行不規則抗體鑒定，鑒定結果比對譜細胞的抗原格局圖。

1.5 統計方法

該實驗數據采用SPSS17.0軟件對數據進行分析處理，計數資料采用χ2檢驗。

2 結果

2.1 4種方法不規則抗體檢出率對比

該組研究中，微柱凝膠法與抗人球蛋白法不規則抗體檢出率最高為0.68%；凝聚胺法檢出率率為0.63%，酶法檢出率最低為0.29%，見表1。微柱凝膠法檢測結果中，2926例有反復輸血史者陽性18例，檢出率為0.62%，1931例妊娠史者中陽性14例，檢出率為0.73%，403例有妊娠史反復輸血者陽性4例，檢出率為1.00%，3組陽性率差異有統計學意義（P<0.05）。

3 討論

臨床上將ABO血型系統以外的抗體稱之為不規則抗體，其中大部分不具有研究意義，但其中有一小部分不規則抗體會引起溶血性輸血反應、新生兒溶血病等輸血不良反應，嚴重時可危機患者生命。因此，臨床輸血前進行不規則抗體篩查具有重要意義。

目前，臨床常用檢測技術有酶法、抗人球蛋白法、凝聚胺法及微柱凝膠抗人球蛋白法，四種方法各有優勢和缺點。酶法適合于檢測有重大臨床意義的Rh系統抗體，但不能檢出抗-M、N、S、s、Fya、Fyb等抗體，這是由于酶可以破壞紅細胞膜上的MNSs、Duffy系統抗原，會造成這類抗體漏檢。如該研究中，其他三種方法檢測到抗體M、N，而酶法檢測不到。另外，酶試劑本身活性易失效，難以保存，因此酶法不適于常規不規則抗體的篩查。抗人球蛋白試驗是最可靠、最經典的血型不規則抗體檢測方法，但試驗過程復雜，操作繁瑣，需要較長的等待時間，不適合于臨床緊急輸血或大量標本檢測，因此很少應用于臨床工作，而只作為對少數標本的確定檢驗。凝聚胺法是一種操作簡單、靈敏度高的不規則抗體檢測方法，其成本低廉，操作快捷，對血型抗體敏感性（除抗-K外）均超過抗人球蛋白法、酶法，是多數基層醫院常用方法，但此法需手工操作，易受到人為因素干擾，影響試驗結果的判讀。尤其在溫度低時，其靈敏度也會收到影響，如該組試驗中凝聚胺法造成2例抗抗-JKa不規則抗體漏檢，結果提示，此法可能對對抗-JKa敏感性低，這與馬曙軒[5]等的報道相符。另外，肝素抗凝樣本對試驗結果造成干擾，這是由于肝素所攜帶的高價負離子與凝聚胺所攜帶的正電荷中和，減弱了紅細胞之間的特異性反應。凝聚胺不能檢出抗-K抗體，這是因為凝聚胺和Kell系統抗原都帶正電荷[6]。該研究中，凝聚胺法漏檢的3例為抗-E、抗-JKa，考慮可能是人為操作因素影響和結果判斷誤差，建議在凝聚胺試驗中使用顯微鏡判讀結果，以避免弱陽性標本。微柱凝膠抗人球蛋白法是近年來新興的一種免疫學檢測技術，結合了凝膠過濾技術和抗原抗體反應技術，利用凝膠顆粒的分子篩作用，實現對抗原抗體反應后的紅細胞的篩查，無IgG結合的紅細胞穿過凝膠到達底部，與IgG結合的紅細胞則會被凝膠中的抗IgG拉住，紅細胞被阻止在凝膠柱上層或中間[7]。微柱凝膠法的試劑成本較高，但與酶法、抗人球蛋白法及凝聚胺法相比，具有靈敏度更高，且操作簡便易行，人為干擾因素少，試驗結果易判度、易保存等優點，已成為臨床首選方法。

對以上4種方法的優缺點進行分析可知：酶法漏檢率高、結果難以保存，抗人球蛋白法操作繁瑣、等待時間長。因此，這兩種方法基本不用于不規則抗體的臨床檢測。微柱凝膠抗人球蛋白法和凝聚胺法作為臨床常用方法，在靈敏度上沒有顯著差異，都能滿足臨床應用要求，但微柱凝膠抗人球蛋白法干擾因素少，易于標準化，結果易判斷又能較長時間保存，能提高輸血安全性，宜選為常規配血方法[8]，凝聚胺法操作快速、簡便，適合急診配血。因此，對于硬件條件好的醫院可優先選用微柱凝膠抗人球蛋白法進行不規則抗體的檢測，而對于基層醫院或急診患者時可選用快速準確、成本低廉的凝聚胺法。

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（收稿日期：2014-04-23）endprint