益腎更寧合劑對圍絕經期大鼠血清E2、LH 及FSH水平的影響*

王新斌，馬睿玲

(甘肅中醫學院，甘肅 蘭州730000)

圍絕經期綜合征指婦女絕經前后由于性腺生殖軸功能衰退所致的一系列以自主神經系統功能紊亂為主，伴有神經心理癥狀的一組癥候群。在中醫古籍中，無本病的單獨記載，有醫家結合臨床實踐，稱之為“絕經前后諸證”。中醫臨證分為腎陰虛和腎陰陽兩虛，其病機除腎虛為主外，可兼心陰不足、肝陰虧虛、肝氣郁結等，見癥復雜，其中多臟同病為本病證主要特點。筆者以祖國醫學理論為依托，汲先賢近人之精華，衷中參西，擬定以補腎清心平肝為治法的方藥益腎更寧合劑治療圍絕經期綜合征，臨床療效較好。為了進一步探討益腎更寧合劑的作用機制，筆者觀察了其對圍絕經期大鼠血清雌二醇(E2)、黃體生成素(LH)及卵泡刺激素(FSH)水平的影響。

1 材料與方法

1．1 動 物

15～18 月齡SD 雌性大鼠60 只，體質量(250±20)g;4～6 月齡SD 雌性大鼠10 只，體質量(200 ±20)g。均為SPF 級，購自甘肅中醫學院中心實驗室，合格證號SCXK(甘)2004－0006。分籠飼養，空氣清新，通風良好，自由攝食、飲水，飼養溫度(20 ±2)℃，每日光照12 h，飼料、水、墊料由專人每日及時加換。

1．2 藥品、試劑與儀器

益腎更寧合劑藥物組成:酒熟地黃12 g，山茱萸10 g，炙淫羊藿18 g，珍珠母30 g，生白芍12 g，麥冬10 g，川黃連6 g，軟紫草(后下)12 g 等。藥劑由甘肅中醫學院制劑室提供，水煎并按4∶1 比例濃縮，2 ℃冰箱中儲存備用。尼爾雌醇片，北京四環制藥有限公司產品，生產批號2071101。血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、促黃體生成素(LH)放射免疫分析盒，購自北京科美東雅生物技術有限公司，批號依次為20070605，20060601，20060412。80－1 型電動離心機，金壇市恒豐儀器廠產品;GC－911型γ－放射免疫計數器，中國科技大學實業總公司產品。

1．3 模型的建立、動物分組與給藥

選取60 只15～18 月齡大鼠，進行陰道脫落細胞涂片及光學顯微鏡觀察，連續10 d。選取32 只符合圍絕經期大鼠模型標準者［1］，采用隨機數字法分為模型對照組、尼爾雌醇組和益腎更寧合劑高、低劑量組4 組，每組8 只。另選青年(4～6 月齡)大鼠8 只作為青年對照組。參照文獻［2］方法，按人與動物表面積等效量1∶0．018 給藥。模型對照組、青年對照組以蒸餾水10 μL/g 灌胃，1 d 1 次;尼爾雌醇組用蒸餾水配成混懸液0．24 μg/g 灌胃，每2 周1 次;益腎更寧合劑高、低組依次設定生藥量26．56，6．64 g/kg 灌胃，1 d 1 次。各組均以10 μL/g 體質量灌胃，連續4 周。

1．4 檢測指標

末次給藥后，禁食、禁水24 h，稱體質量，于腹主動脈采集血標本，置普通生化管，離心(3 000 r/min)分離血清，－20 ℃保存備用。采用放免法測定E2、LH、FSH 含量，操作嚴格按試劑盒說明書進行。

1．5 統計學方法

采用SPSS 13．0 統計分析軟件處理。數據以均數()±標準差(s)表示，組間比較采用單因素方差分析(One－Way ANOVA)。以P＜0．05 為差別有統計學意義。

2 結 果

與青年對照組對比，模型對照組大鼠血清E2降低，LH、FSH 升高，差別有統計學意義(P＜0．01)。與模型對照組對比，益腎更寧合劑高劑量組和尼爾雌醇組E2升高，FSH、LH 降低，差別有統計學意義(P＜0．01 或P＜0．05)。結果表明:益腎更寧合劑可提高圍絕經期大鼠血清E2含量，降低LH、FSH 水平，并存在一定量效關系。見表1。

表1 各組大鼠血清E2、LH 及FSH 水平對比 ±s

表1 各組大鼠血清E2、LH 及FSH 水平對比 ±s

注:與青年對照組對比，* P ＜0．05，＊＊P ＜0．01;與模型對照組對比，# P ＜0．05，## P ＜0．01。

組 別 動物數 E2/(ng·L －1) FSH/(IU·L －1) LH/(IU·L －1)模型對照組 8 7．547 1 ±0．806 7＊＊ 5．688 0 ±0．364 9＊＊ 6．830 0 ±0．829 8＊＊青年對照組 8 14．340 0 ±0．627 5 2．334 7 ±0．405 7 4．351 3 ±0．861 8尼爾雌醇組 8 11．137 1 ±0．932 6## 3．940 3 ±0．127 6## 4．388 7 ±0．552 1##益腎更寧合劑高劑量組 8 9．213 1 ±0．782 1## 4．900 1 ±0．141 4## 5．493 7 ±0．830 2#益腎更寧合劑低劑量組 8 8．953 3 ±0．821 7##5．084 2 ±0．754 5 6．067 5 ±0．779 8

3 討 論

圍絕經期是婦女從性成熟期向老年期過渡的特殊時期，是必經的生理過程。婦女在絕經前后，卵巢功能開始衰退、出現內分泌系統失衡狀況，導致下丘腦—垂體—卵巢—子宮性腺軸(HPOA)的改變，使LH、FSH 水平升高，平衡反饋失調，從而影響植物神經中樞及其支配下的各臟器功能，引起一系列軀體和精神癥狀。中醫癥狀表現為潮熱面赤，進而出現汗出、精神倦怠、煩躁易怒、頭暈目眩、耳鳴心悸、失眠健忘、腰膝酸軟、手足心熱，或伴有月經紊亂癥狀。早在《素問·上古天真論》就認識到“女子七七，任脈虛，太沖脈衰少，天癸竭，地道不通，故形壞而無子?！薄鹅`樞·海論》曰:“髓海有余，則輕勁多力，自過其度;髓海不足，則腦轉耳鳴，脛酸眩冒，目無所見，懈怠安臥?！边@些都明確指出了腎與月經、生殖、衰老的密切關系。婦女七七之年左右(五十歲左右)，腎氣漸衰，體內天癸這種隨腎氣充盛而泌至物質趨于衰竭，月經也漸次斷絕，且生育能力缺失。腎氣虛衰為本病的發病根本。有學者［3］認為:圍絕經期雌激素水平下降，出現潮熱、汗出等“陰虛”癥狀，雌激素的這些作用類似“陰”的作用，而婦女的血虛癥狀與雌激素成負相關系，血屬陰，與本病腎陰虛為主要病因病機相符合。

婦女以血為基本，以血為用，血屬陰。天癸是一種重要的陰精，對人體的生長、發育與生殖起促進作用。任脈為陰脈之海。沖脈為血海，陰精衰少，從而導致月經斷絕。方中酒熟地黃、山茱萸、生白芍、麥冬等藥物著重滋補腎陰，補其不足以治本;煅珍珠母、川黃連、軟紫草兼以清心平肝，瀉其有余以治其標。根據中醫學“陽生陰長”之理論，在大量的滋陰藥中少佐助陽之品淫羊藿，是取《景岳全書》“善補陰者，必于陽中求陰，陰得陽升泉源不竭”之意。淫羊藿配伍甘咸寒之珍珠母可鎮攝浮陽，此因圍絕經期婦女出現烘熱汗出、潮熱面紅、情志異常等植物神經功能紊亂的癥狀是陰陽平衡失約、陰不斂陽以致的虛陽上浮的表現，而珍珠母也可抑制淫羊藿溫熱升浮之氣。此外，淫羊藿補腎溫陽，主要成分為黃酮類化合物，現代研究表明，淫羊藿黃酮可增強HPOA促性腺功能，且具有雌激素樣活性［4］。圍絕經期婦女體內的性激素水平下降，使用補腎藥物起到調整生殖內分泌的作用，復方在臨床治療圍絕經期綜合征已取得良好的療效。

本實驗結果顯示:益腎更寧合劑高劑量組能夠升高模型大鼠血清E2(P＜0．01)，降低LH、FSH 含量(P＜0．01 或P＜0．05)，且存在著一定的量效關系。此為益腎更寧合劑治療圍絕經期綜合征提供了實驗依據，即通過其微弱的雌激素樣作用，提高更年期模型大鼠體內E2水平，改善垂體－性腺軸功能，使內環境趨于穩定。這可能是該方用于治療圍絕經期綜合征的作用機制之一。

［1］程化奇，熊舜華，殷新尤，等．大鼠更年期實驗模型研究［J］．實驗動物與比較醫學，1993，13(4):1921．

［2］黃繼汗，黃曉暉，陳志揚，等．藥理實驗動物間和動物與人體間的等效劑量換算［J］．中國臨床藥理學與治療，2004，9(9):1069－1071．

［3］楊敏，李燦東，李紅，等．圍絕經期綜合征中醫證素與性激素水平的相關研究［J］．中華中醫藥雜志，2012，27(2):368．

［4］張磊，王嵐，吳霞，等．淫羊藿總黃酮對不同性別大鼠性器官及相關激素的影響［J］．中藥藥理與臨床，2009，25(1):33．