蒺藜總皂苷對家兔動脈粥樣硬化模型血清IL-6、TGF影響的實驗研究

張 波，趙曉蓮，楊 宇，張明遠，梁衍鋒，王芳芳

（佳木斯大學基礎學院，黑龍江 佳木斯 154007）

近年來，隨著人民生活水平的不斷提高，心腦血管疾病的發病率呈現逐年上升，并且已經超過腫瘤的的趨勢，成為發病率和死亡率躍居我國第一位的疾病。而動脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）正是其重要的病理生理學基礎［1］。隨著基礎研究和臨床試驗不斷的深入，治療AS 趨向于毒性低、副作用小等方向。我國有著悠久的中醫藥傳統，豐富的藥用動植物資源是巨大的醫藥寶庫，從中藥中篩選出藥物不僅是可行的途徑，而且同西藥篩選相比較，具有篩選時間短、節省人力、物力、財力、毒性低、副作用小等優勢。蒺藜總皂苷為心腦疏通膠囊的主要成分［2］，是目前臨床上廣泛應用于治療心血管疾病的中成藥，并顯示出良好的應用價值，然而目前對其在抑制炎癥細胞浸潤、免疫性因子表達方面的研究卻很少，且其作用機制尚無定論。本文研究者復制了AS家兔模型，檢測GSTT 對家兔血清中炎癥因子、抗炎因子水平的影響，進而為心腦疏通膠囊在臨床上應用于AS治療的機制進行初步的探討。

1 材料與方法

1.1 實驗藥物

IL-6放射免疫試劑盒由北京北免東雅生物技術研究所提供；TGF酶聯免疫試劑盒購于上海逸晗生物有限公司。

1.2 實驗方法

50只健康雄性純種日本大耳白兔（購自佳木斯大學實驗動物中心），兔齡4～5個月，體重（1.8±0.2）kg，實驗前普通飼料喂養1周后，隨機分為5組：正常對照組繼續喂以正常普通飼料無任何添加；AS模型組給予高脂飼料喂養；小劑量治療組，給予高脂飼料同時添加6.3mg／kg·d GSTT；大劑量治療組，給予高脂飼料添加12.6mg／kg·d GSTT；陽性藥物對照組，給予高脂飼料添加2.35mg／kg·d辛伐他汀，定期稱體重、抽血。連續喂養6周后，禁食8h，腹腔注射20%烏拉坦20mL／kg，麻醉狀態下沿腹正中線切開皮膚、結締組織，活體剝離腹主動脈取血2mL。

1.3 實驗指標

腹主動脈取的全血，靜止幾分鐘后，分離上層血清，全自動生化分析儀測定血清總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）；血清IL-6水平由酶聯免疫吸附方法測定；TGF水平放射由免疫分析方法測定。

1.4 統計學方法

采用SPSS17.0軟件進行統計學分析，實驗所得數據以均數±標準差方式表示。多組樣本均數的比較采用AVON分析。

2 結果

2.1 TC、TG 水平的測定

與正常對照組相比較，模型組，大、小劑量GSTT 治療組，陽性藥物對照組，血清中TC 及TG 水平明顯升高（P＜0.05），說明AS 模型建立成功。與AS 模型組相比較，GSTT 大、小劑量治療組，陽性藥物對照組TC、TG 濃度水平顯著降低（P＜0.05）；大、小劑量治療組比較差異無顯著性（P＞0.05）。見表1。

表1 實驗第5周各實驗組TC、TG 水平（±s，mmol／L）

表1 實驗第5周各實驗組TC、TG 水平（±s，mmol／L）

＊與空白對照組比較P＜0.05，＃ 與模型組比較P＜0.05。

2.2 IL-6、TGF水平的測定

與AS模型組相比較，GSTT 大、小劑量治療組，陽性藥物對照組血漿IL-6濃度水平升高、同時TGF 濃度水平顯著降低（P＜0.05）；大、小劑量治療組比較差異無顯著性（P＞0.05）。見表2。

表2 實驗第5周各實驗組IL-6、TGF水平（±s，mmol／L）

表2 實驗第5周各實驗組IL-6、TGF水平（±s，mmol／L）

＃與模型組比較P＜0.05。

3 討論

動脈粥樣硬化的發生過程是一個相當緩慢的過程，而且是一個變化的動態過程［3］?，F國際上已公認，高脂血癥是導致AS的最重要原因，其中TC、LDL-C 被視為致AS的危害因子。高血脂誘發家兔動脈粥樣硬化，是經典的研究動脈粥樣硬化病理機制和治療方法的動物實驗模型。本實驗中TG、TC 水平明顯增高，說明高脂血癥實驗動物模型成功建立。二級干預試驗表明：降低血TC、TG 水平能顯著減緩肢體和冠狀粥樣斑塊的形成。在本次實驗研究中，蒺藜總皂苷能夠顯著降低實驗性AS 家兔血清中TC和TC 的含量水平，說明其能延緩動脈粥樣硬化血脂的形成。

隨著研究逐步深入，一些化學因子和細胞因子不斷被檢出，近年來又重新提出了AS是炎癥的觀點，AS的表現符合炎癥表現的普遍規律［4～6］，而越來越多的證據表明，炎癥過程在動脈粥樣硬化及其并發癥的發生與發展過程中起著重要作用［7］，近年來對其發病機制的研究過程中發現炎癥啟動動脈粥樣硬化的發生并影響其進程［8］，其實質上是對AS發病機理研究的概括和啟示。

從AS是一種炎癥的觀點出發，其治療只有針對炎癥發生發展的基本環節，才能真正達到防治的目的。炎癥的表現既有損傷一面，也有抗損傷一面，不能一概而論。血管炎癥標記物的血漿水平有助于區分高危心血管病患者。這些標記物包括P選擇素（P-selectin）、白介素-6（IL-6）、白介素-1（IL-1）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、腫瘤轉化因子（TGF）、可溶性細胞內黏附因子和C反應蛋白（CRP）。免疫反應在AS中的作用是由微環境中致炎因子／抗炎因子平衡決定［9］。

本實驗對蒺藜總皂苷拮抗動脈粥樣硬化炎癥反應的作用機制進行了實驗研究，可能通過：①降低血漿TG和LDL-C水平，延緩動脈粥樣斑塊的形成；②IL-6含量降低、TGF的含量升高，說明蒺藜總皂苷具有明顯抑制炎癥因子的形成以及促進抗炎因子生成的作用。減輕血管壁炎癥反應，進而產生抗AS的作用。為心腦疏通膠囊應用于動脈粥樣硬化的抗炎治療給予我們一些新的啟示，展現出一種新的研究方向和途徑，為其臨床應用提供了堅實的理論基礎。

［1］管高峰，華先平，王琳，等.丹紅注射液對動脈粥樣硬化家兔血管壁炎癥的影響［J］.中西醫結合心腦血管病雜志，2006，10（4）：884-886

［2］胡文蘭.高密度脂蛋白抗動脈粥樣硬化的研究進展［J］.國外醫學內科學分冊，2003，30（6）：235-323

［3］陳賀中，朱曉峰，趙麗娜.動脈粥樣硬化病因的現代概念［J］.黑龍江醫藥科學，1999，22（3）：40

［4］Ross R.Atherosclerosis-an inflamrnatory disease［J］.N Engl J Med，1999，340：115-126

［5］Leinnoen M，Soiklsu P.Infectious and atherosclerosis［J］.Scand Cardiovas J，2000，34（1）：12-20

［6］Kiechl S，Egger G，MayM，et al.Chronic infectious and risk of carotid atherosclerosis prospective results from a large population study［J］.Circulation，2001，103（8）：1064-1070

［7］Li JJ.Silent myocardial ischemia may be related to inflammatory response［J］.Med Hypotheses，2004，62：252-256

［8］王賀田，李娟.急性冠狀動脈綜合征與炎癥的關系［J］.黑龍江醫藥科學，2007，30（6）：88-89

［9］Ficht lscherer S，Brener S，Heeschen C，et al.Interleukin-10serum levels and syst emic endothelial vasoreact ivit y in patients withcoronary artery disease［J］.J Am Coll Cardiol，2004，44（1）：44-49