原發(fā)性高血壓患者轉(zhuǎn)化生長因子β1在左房重構(gòu)及AF發(fā)生中的作用

林憲如，吳 娜，王守東，史 悅，任永強(qiáng)，鐘敬泉

(1青島市立醫(yī)院，山東青島266011;2山東大學(xué)齊魯醫(yī)院)

轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)是調(diào)節(jié)細(xì)胞生長、促進(jìn)組織纖維化的重要細(xì)胞因子。已有研究表明，TGF-β1不僅在心肌病、瓣膜性心臟病及心律失常患者中明顯升高［1，2］，而且對促進(jìn)風(fēng)濕性心瓣膜病患者心房顫動(AF)的發(fā)生也起了非常重要的作用［3］。然而，原發(fā)性高血壓(EH)患者AF發(fā)生是否與TGF-β1有關(guān)目前仍不十分清楚。本研究觀察EH合并AF患者TGF-β1的水平，并分析其與結(jié)締組織生長因子(CTGF)水平和左房大小的關(guān)系，旨在闡明TGF-β1在EH合并AF發(fā)病中的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2013年3～11月在青島市立醫(yī)院心內(nèi)科住院的EH合并AF患者75例，AF的診斷均經(jīng)心電圖或Holter證實(shí)。男47例、女28例，年齡(67.9±8.9)歲，高血壓持續(xù)時(shí)間(13.6 ±9.9)年，吸煙者24例、糖尿病16例;其中陣發(fā)性AF患者44例(EH+pAF組)、慢性AF患者31例(EH+cAF組，AF持續(xù)≥6個(gè)月)。選擇同期住院的EH合并竇性心律(SR)患者37例(EH+SR組)及來自本院查體中心的健康人群36例(NC組)作為對照。EH+SR組男23例、女14例，年齡(66.7 ±8.3)歲，高血壓持續(xù)時(shí)間(12.2 ±9.9)年，吸煙12例、糖尿病8例。EH+pAF組、EH+cAF組與EH+SR組性別、年齡、高血壓病持續(xù)時(shí)間、吸煙及糖尿病患者比例相匹配。排除繼發(fā)性高血壓、急性冠脈綜合征、陳舊性心肌梗死、瓣膜性心臟病、心肌病、肺心病、先心病及其他各種類型心律失常;80歲以上，3個(gè)月內(nèi)服用RAS抑制劑(ARB、ACEI類藥物)，腦卒中，腎臟受損，進(jìn)行過大手術(shù)，近期正在服用抗炎藥物或Ⅰ、Ⅲ類抗心律失常藥物者，2周內(nèi)有感染史，惡性腫瘤，肝臟與肺纖維化患者。

1.2 方法 EH患者均測量血壓，行心臟彩超檢測左房內(nèi)徑(LAD)、右室內(nèi)徑(LVD)、室間隔厚度(IVS)、左室后壁厚度(LVPW)、左心射血分?jǐn)?shù)(LVEF)。清晨采取空腹靜脈血3 mL，置于干凈的凝膠真空管內(nèi)，室溫下凝固30 min，以3 000 r/min離心10 min，取上清液立即分裝，置-80℃冰箱保存待檢。取一定量標(biāo)本測血糖、血脂。取一定量樣本行預(yù)實(shí)驗(yàn)確定待測因子的最佳稀釋比例，然后統(tǒng)一用 ELISA法檢測血清 TGF-β1和 CTGF含量。ELISA試劑盒購于上海逸晗生物科技有限公司(LOT:20121101A)，嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行操作，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，設(shè)立空白對照、陰性對照，控制板內(nèi)變異系數(shù)＜10%，板間變異系數(shù)＜5%。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以±s表示，多組比較使用方差分析，組間兩兩比較用LSD-t檢驗(yàn)，兩指標(biāo)間的數(shù)量關(guān)系采用Pearson直線相關(guān)分析。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組一般臨床資料比較 見表1。

2.2 四組血清TGF-β1和CTGF比較 見表2。

2.3 相關(guān)性分析 Pearson直線相關(guān)分析顯示，在EH合并AF患者中，血TGF-β1與CTGF和LAD均呈正相關(guān)關(guān)系(r分別為 0.249、0.319，P ＜0.05 或＜0.01)。

表1 三組一般臨床資料比較(±s)

表1 三組一般臨床資料比較(±s)

注:與 EH+SR 組相比，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01;與 EH+pAF組相比，#P ＜0.05

組別 n SBP(mmHg)DBP(mmHg)TG(mmol/L)Tch(mmol/L)LDL-c(mmol/L)HDL-c(mmol/L)FPG(mmol/L)LAD(mm)LVD(mm)IVS(mm)LVPW(mm)LVEF(%)EH+SR 組 37 160.5 ±20.2 90.2 ±12.2 1.52 ±0.89 4.91 ±1.15 2.77 ±0.80 1.37 ±0.33 6.22 ±1.78 35.0 ±3.2 46.1±3.8 11.1 ±1.6 9.3 ±1.1 61.3 ±10.9 EH+pAF 組 44 159.4 ±18.4 89.7 ± 9.9 1.40 ±0.86 4.40 ±1.07 2.63 ±0.68 1.33 ±0.37 6.06 ±2.07 37.4 ±5.0 46.7 ±4.2 11.1 ±1.8 9.4 ±1.7 62.3 ± 5.4 EH+cAF 組 31 157.9 ±14.6 91.4 ±12.3 1.36 ±0.96 4.85 ±0.90 2.67 ±0.69 1.44 ±0.41 5.72 ±1.51 44.3 ±6.9＊＊#49.0 ±6.4*11.4 ±1.6 9.6 ±1.0 60.9 ± 8.9

表2 四組血清TGF-β1和CTGF比較(ng/mL，±s)

表2 四組血清TGF-β1和CTGF比較(ng/mL，±s)

注:與 EH+SR 組和 NC 組相比，*P ＜0.05，＊＊P＜0.01

組別 n TGF-β1CTGF EH+cAF 組 31 49.6 ±29.5＊＊ 8.16 ±0.21＊＊EH+pAF 組 44 39.5 ±31.1* 7.87 ±1.30＊＊EH+SR 組 37 28.3 ± 8.6 1.14 ±0.38 NC組36 25.2 ±13.0 0.26 ±0.09

3 討論

AF 是最常見的心律失常之一，盡管許多疾病和危險(xiǎn)因素如年齡、心臟瓣膜病、冠心病、心肌梗死、心肌病、心力衰竭等均可促進(jìn)AF發(fā)生;但流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，EH是AF發(fā)病的最重要和獨(dú)立危險(xiǎn)因素［4，5］。Framingham 心臟研究中，EH 患者發(fā)生 AF的風(fēng)險(xiǎn)是血壓正常者的1.9倍［5］。AF的發(fā)生與心房尤其是左房纖維化有關(guān)，導(dǎo)致心房纖維化的危險(xiǎn)因素不僅與左房擴(kuò)大和炎癥密切相關(guān)，某些細(xì)胞因子的持續(xù)性刺激作用在AF的發(fā)病中也起了非常重要的作用。TGF-β1是重要的促纖維化細(xì)胞因子，可調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)如膠原、纖維結(jié)合蛋白及蛋白多糖的合成，許多心臟疾患如瓣膜性心臟病、心肌梗死及各種不同類型的心肌病患者均可檢測到TGF-β1的升高［1，2］。新近有研究表明，TGF-β1對心律失常尤其是 AF的形成具有明顯的影響［6］。Verheule等［7］在轉(zhuǎn)基因大鼠實(shí)驗(yàn)中曾證實(shí)，TGF-β1的過度表達(dá)可導(dǎo)致心房纖維化，并使AF易感性增強(qiáng)，但這些大鼠的心室并不出現(xiàn)纖維化改變，表明TGF-β1具有選擇性促心房纖維化作用。Xiao等［3］發(fā)現(xiàn)，風(fēng)心病合并AF患者左心房TGF-β1的表達(dá)明顯增強(qiáng)，且與左房纖維化程度及AF類型呈明顯相關(guān)關(guān)系。On等［8］還對風(fēng)心病術(shù)后患者AF的影響因素進(jìn)行多元回歸分析，發(fā)現(xiàn)血清TGF-β1水平是術(shù)后1年隨訪時(shí)AF是否復(fù)發(fā)的獨(dú)立預(yù)測因素。先前一些研究觀察到EH尤其是合并靶器官損害患者血清TGF-β1水平增高，但EH患者TGF-β1與AF的關(guān)系研究較少。本研究發(fā)現(xiàn)，EH合并不同類型的 AF患者血清TGF-β1水平均明顯高于單純EH及健康對照者，表明TGF-β1與 EH患者的 AF發(fā)生及維持有關(guān)。Wang等［9］報(bào)道 EH 患者 codon 25 位點(diǎn) TGF-β1915的GC多態(tài)性與TGF-β1水平及其AF的發(fā)生有關(guān)，此可能是EH患者進(jìn)展為AF的高危因素之一。然而，與以往研究不同的是，我們在研究中并未發(fā)現(xiàn)單純EH患者血清TGF-β1水平明顯升高，可能與本研究入選對象中排除了有明顯靶器官損害者有關(guān)。

TGF-β1如何促進(jìn)EH患者AF的發(fā)生目前尚未完全清楚。CTGF是一種促成纖維細(xì)胞分裂和膠原沉積的細(xì)胞因子。生理狀態(tài)下CTGF表達(dá)水平很低，但在一些纖維化疾病如肺纖維化、肝硬化等病變區(qū)都能檢測到CTGF基因和蛋白的異常表達(dá)增加。目前認(rèn)為，AF的發(fā)生與心房纖維化有關(guān)。已有研究表明，慢性AF患者血 CTGF維持在較高水平［10，11］，且CTGF的動態(tài)變化與 AF進(jìn)展有關(guān)［10］。TGF-β1作為上游刺激物可誘導(dǎo)CTGF的表達(dá)上調(diào)，從而介導(dǎo)細(xì)胞外基質(zhì)成分的合成與分泌增加、促進(jìn)器官及組織纖維化的發(fā)生、發(fā)展［12］。Li等［11］發(fā)現(xiàn)，與 SR者相比，慢性AF患者TGF-β1的mRNA水平及CTGF明顯升高，且TGF-β1的表達(dá)與CTGF呈正相關(guān)關(guān)系。然而，有些研究認(rèn)為CTGF只是作為TGF-β1的輔因子而產(chǎn)生微弱的促纖維化效應(yīng)，其作用僅僅是構(gòu)建有利于致纖維化刺激發(fā)揮效能的環(huán)境［13］。我們在研究中發(fā)現(xiàn)，EH合并AF患者TGF-β1與CTGF水平均明顯高于單純EH及健康對照者，且兩者呈正相關(guān)關(guān)系，與Li等［11］研究結(jié)果類似。此外，本研究還觀察到，TGF-β1水平與LAD呈明顯正相關(guān)，表明TGF-β1在左房重構(gòu)中具有重要作用，這一點(diǎn)也是其促發(fā)AF的重要因素。一些回顧性研究曾發(fā)現(xiàn)，RAS抑制劑治療具有減少AF的發(fā)病作用，LIFE研究中證實(shí)，對于合并左室肥厚的EH患者而言，以氯沙坦為基礎(chǔ)的降壓治療方案與以阿替洛爾為基礎(chǔ)的治療方案相比可明顯減少新發(fā)AF的出現(xiàn)［5］，此可能與沙坦類藥物具有抑制TGF-β1/Smad信號通路并減輕心肌纖維化有關(guān)［14］。吡非尼酮作為一種抑制TGF-β1表達(dá)的藥物，已證實(shí)具有明顯降低心房纖維化的作用，可減少心房的傳導(dǎo)異常及抑制AF的發(fā)生［15］。隨著研究的不斷深入，TGF-β1抑制劑有望對AF的控制產(chǎn)生積極的預(yù)防作用。

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