L1CAM在胃癌組織中的表達及其與患者臨床病理特征的關(guān)系

董建華，王學(xué)松，韓文學(xué)，陳曉紅，王鈞芹，李 利，王元宇

（1莒縣人民醫(yī)院，山東 莒縣 276500;2浙江省人民醫(yī)院）

L1細胞黏附分子（L1CAM）是免疫球蛋白超家族中的Ⅰ型跨膜糖蛋白。L1CAM在多種腫瘤組織中表達，在腫瘤浸潤的邊緣和轉(zhuǎn)移灶中高表達，其在腫瘤組織中的表達能促進腫瘤細胞的侵襲和遷移［1，2］。但目前關(guān)于L1CAM在胃癌方面的研究很少，僅有Kodera等［3］應(yīng)用免疫組織化學(xué)檢測胃癌組織中L1CAM的表達情況。為此，我們回顧了436例胃癌患者資料，并分析L1CAM與患者臨床病理特征的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇1998年1月～2004年12月莒縣人民醫(yī)院手術(shù)切除的胃癌組織436份，均經(jīng)術(shù)后病理證實，且患者術(shù)前未行放化療。其中患者男311例、女125例，年齡17～91歲、中位年齡60歲;按WHO 2002年胃癌分類標準分為乳頭狀腺癌16例、管狀腺癌326例、黏液腺癌29例、印戒細胞癌65例;高分化腺癌13例、中分化腺癌128例，低分化腺癌293例、未分化癌2例;TNM分期:Ⅰ期90例、Ⅱ期104例、Ⅲ期173例、Ⅳ期69例;胃癌淋巴分期:PN0期166例、PN1期136例、PN2期99例、PN3期35例;有遠處轉(zhuǎn)移61例，無遠處轉(zhuǎn)移375例。另取癌旁正常胃黏膜組織92份作為對照。隨訪起止時間為1998年1月～2008年12月，并隨訪5年以上。

1.2 方法

1.2.1 L1CAM組織芯片制備和免疫組織化學(xué)染色參照文獻［4，5］制備 L1CAM 組織芯片及免疫組織化學(xué)染色。鼠抗人L1CAM抗體購于Abcam公司，廣譜二抗試劑盒及DAB顯色試劑盒均購于北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

1.2.2 結(jié)果判定 以細胞質(zhì)和細胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒為L1CAM陽性。根據(jù)染色程度和染色細胞百分率進行評定和分析［6，7］:基本不著色者為0分，著色淡者為1分，著色適中者為2分，著色深者為3分;著色細胞占計數(shù)細胞的百分率≤5%記0分，6%～25%記1分，26% ～50%記2分;≥51%記3分。將每張切片的染色程度與染色細胞百分率得分相乘為最后得分。0～1分為陰性（-），2～3分為弱陽性（+），4～6分為中等陽性（++），＞6分為強陽性（+++）。在統(tǒng)計分析中，將表達（-、+）劃為低表達組，（++、+++）劃為高表達組。

1.2.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，計量資料以±s表示，比較采用配對t檢驗;計數(shù)資料比較采用χ2或Fisher精確概率檢驗。生存數(shù)據(jù)采用Kaplan-Meier分析，并繪制生存曲線，應(yīng)用Logrank檢驗差異性，用Cox風險模型進行獨立預(yù)后因素分析。P≤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 L1CAM在正常胃黏膜和胃癌組織中的表達在92份正常胃黏膜中，L1CAM蛋白陰性表達70份（76.1%），弱陽性表達 22 份（23.9%）。在 436 份胃癌組織中，L1CAM蛋白高表達118份（27.1%），低表達318份（72.9%），主要在細胞質(zhì)中表達。

2.2 L1CAM蛋白表達與胃癌臨床病理特征的關(guān)系L1CAM 低表達組年齡（58.13 ±12.03）歲，明顯低于高表達組［（61.15 ±12.0）歲;t=-2.632，P=0.009］。其余見表1。

表1 L1CAM在胃癌組織中的表達與患者臨床病理特征的關(guān)系［例（%）］

2.3 L1CAM蛋白表達與患者預(yù)后的關(guān)系 見圖1。Kaplan-Meier分析顯示，L1CAM低表達患者的5年生存率（50.0%）明顯高于L1CAM高表達患者（16.1%，P＜0.05）。在 TNMⅠ期中，L1CAM 高表達患者的5年生存率（60.0%）明顯低于L1CAM低表達患者（87.1%，P＜0.05）;在Ⅱ期中，L1CAM 高表達患者的5年生存率（36.4%）明顯低于L1CAM低表達患者（65.6%，P＜0.05）;在Ⅲ期中，L1CAM高表達患者的 5年生存率（16.9%）明顯低于L1CAM低表達患者（30.4%，P＜0.05）;在Ⅳ期中，L1CAM高表達患者的5年生存率（0）與L1CAM低表達患者無顯著差異（5.3%，P＞0.05）。用Cox風險模型進行獨立預(yù)后因素分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)L1CAM表達、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移和TNM分期是胃癌的獨立預(yù)后因素（P均＜0.05）。

圖1 不同TNM分期L1CAM高表達和低表達患者的生存曲線

3 討論

L1CAM屬免疫球蛋白超家族中的Ⅰ型跨膜糖蛋白，分子量為200～220 kD，首先在神經(jīng)系統(tǒng)中被發(fā)現(xiàn)，之后發(fā)現(xiàn)在結(jié)直腸癌、胰腺癌、食管癌、肝內(nèi)膽管癌、胃腸道間質(zhì)瘤和胃癌組織均有表達，在腫瘤組織浸潤的邊緣表達顯著增強［8～12］。Kodera 等［3］應(yīng)用免疫組織化學(xué)檢測了L1CAM在72份pT3期胃癌組織中的表達情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)L1CAM在15份胃癌組織中表達，以腸型胃癌為主。本研究中，76.1%的非腫瘤胃黏膜組織中L1CAM蛋白為陰性表達，23.9%呈弱陽性表達。在27.1%的胃癌組織中L1CAM蛋白高表達，且主要在細胞質(zhì)中表達。與Kodera等［3］研究一致。

L1CAM在結(jié)直腸癌、胰腺癌、食管癌和膽管癌等組織中表達，且其在腫瘤組織的表達與臨床病理特征和預(yù)后相關(guān)。L1CAM的表達與結(jié)直腸癌的分期、遠處轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)相關(guān)［13］。L1CAM在胰腺癌組織高表達，其表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血管侵犯、周圍神經(jīng)浸潤和疼痛程度有關(guān)［14］。L1CAM在膽囊癌組織的表達與膽囊癌組織學(xué)分級、浸潤深度、臨床分期、血管和淋巴侵犯相關(guān)［15］。本研究發(fā)現(xiàn)，L1CAM蛋白的表達強度與腫瘤部位、腫瘤大小、Lauren分型、浸潤深度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)分期有關(guān)，提示L1CAM可能參與胃癌的發(fā)生、發(fā)展。

臨床研究發(fā)現(xiàn)，L1CAM在結(jié)直腸癌、胰腺癌、膽囊癌和肝外膽管細胞癌中高表達，并與患者的預(yù)后密切相關(guān)［13～16］。本研究發(fā)現(xiàn)，L1CAM 蛋白的表達強度與預(yù)后有關(guān)。為排除腫瘤分期對預(yù)后的影響，我們對不同 TNM分期患者進一步分析發(fā)現(xiàn)，在TNMⅠ、Ⅱ、Ⅲ期中，L1CAM高表達患者的5年生存率均低于 L1CAM低表達患者;在 TNMⅣ期中，L1CAM高表達患者的5年生存率與L1CAM低表達患者無統(tǒng)計學(xué)差異。表明L1CAM在胃癌組織的表達與患者預(yù)后有關(guān)，并且是獨立預(yù)后因素之一。

綜上所述，L1CAM在胃癌組織中高表達，其表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、TNM分期和預(yù)后顯著相關(guān)。

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