血清 TNF-α、IFN-γ、IL-6 水平與慢性病貧血的關(guān)系

王恒石，胡喜梅，周水陽，柯 金

（上海市松江區(qū)中心醫(yī)院，上海 201600）

慢性病貧血（ACD）是臨床上常見的貧血類型，其發(fā)病率僅次于缺鐵性貧血，屬繼發(fā)性貧血［1］。ACD常繼發(fā)于慢性感染、慢性炎癥性疾病、惡性腫瘤等，目前其發(fā)病機制仍不完全清楚。有研究認(rèn)為，多種炎癥性細胞因子（如 TNF-α、IFN-γ、IL-6 等）在ACD的發(fā)生、發(fā)展過程中具有重要作用。2010～2012年，我們觀察了血清 TNF-α、IFN-γ、IL-6 水平對ACD患者血清鐵（SI）、鐵蛋白（SF）、血紅蛋白（Hb）、CD+8T細胞比例的影響。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇同期我院住院的ACD患者24例（ACD組）。診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］:①伴有慢性感染、炎癥或腫瘤等基礎(chǔ)性疾病;②正常細胞正常色素性貧血或小細胞低色素性貧血;③SI及總鐵結(jié)合力均低于正常，轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度正常或稍低，血清SF增高;④骨髓鐵染色顯示鐵粒幼細胞減少，幼紅細胞內(nèi)鐵顆粒減少，巨噬細胞內(nèi)鐵顆粒增多。排除基礎(chǔ)性疾病合并的癥狀性貧血，如失血性、營養(yǎng)性、溶血性貧血，肝腎功能衰竭所致的貧血，藥物引起的骨髓抑制，腫瘤浸潤骨髓所致的貧血以及稀釋性貧血等。其中，男9例、女15例，年齡20～87歲、中位年齡62歲;原發(fā)病:系統(tǒng)性紅斑狼瘡4例，胃癌、淋巴瘤、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎各3例，肺癌2例，肝癌、結(jié)腸癌、直腸癌、腎癌、膀胱癌、風(fēng)濕性多肌痛、腎結(jié)核、結(jié)核性胸膜炎、腎囊腫感染各1例。同期選擇缺鐵性貧血（IDA）患者 16例（IDA 組），均符合《血液病學(xué)》［3］（第2版）中關(guān)于IDA的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且無ACD基礎(chǔ)疾病史。其中，男7例、女9例，年齡24～89歲、中位年齡59歲。ACD組、IDA組均未行輸血及鐵劑治療。另選健康志愿者16例作為對照組，Hb均在正常范圍，且無ACD基礎(chǔ)疾病史。其中，男8例、女8例，年齡40～76歲、中位年齡53歲。三組性別、年齡具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 血清 TNF-α、IFN-γ、IL-6 檢測 所有研究對象清晨空腹抽取肘靜脈血4 mL，2 000 r/min離心10 min，分離上層血清置于-80℃冰箱待測。血清TNF-α、IFN-γ、IL-6采用雙抗體夾心ELISA法檢測，試劑盒購自上海依科賽生物制品有限公司。

1.2.2 血清SI、SF檢測 所有研究對象清晨空腹抽取肘靜脈血8 mL，置入促凝管，3 000 r/min離心10 min，分離獲得上層血清。抽取樣品約0.5 mL，應(yīng)用Siemens BNⅡ全自動蛋白分析儀檢測SF水平，試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品由Siemens公司提供;其余應(yīng)用Roche Modular P800全自動生化分析儀檢測SI水平，試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品由Roche公司提供。

1.2.3 Hb、CD+8T細胞比例檢測 所有研究對象清晨空腹抽取肘靜脈血8 mL，置入2個EDTA管中。一管直接應(yīng)用Sysmex xs-1000i血細胞分析儀檢測Hb水平，試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品由Sysmex公司提供;另一管應(yīng)用BD FACSCalibur流式細胞儀檢測CD+8T細胞比例，抗體和試劑由BD公司提供。

1.2.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS21.0統(tǒng)計軟件，計量資料以±s表示，結(jié)果比較采用方差分析;相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析。P≤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清 Hb、SI、SF、TNF-α、IFN-γ、IL-6 水平及CD+8T細胞比例比較 見表1。

表 1 各組血清 Hb、SI、SF、TNF-α、IFN-γ、IL-6 水平及 CD+8T 細胞比例比較（ ±s）

表 1 各組血清 Hb、SI、SF、TNF-α、IFN-γ、IL-6 水平及 CD+8T 細胞比例比較（ ±s）

注:與對照組比較，*P ＜0.05;與 IDA組比較，#P ＜0.05

組別 n Hb（g/L） SI（μmol/L） SF（μg/L） TNF-α（ng/L） IFN-γ（ng/L） IL-6（ng/L）CD+8T 細胞比例（%對照組 16 129.94 ±14.59 14.69 ±3.53 141.56 ± 36.69 7.1）1 ± 7.04 3.32 ±1.98 2.85 ± 2.76 29.56 ±11.35 IDA 組 16 86.56 ±20.49* 4.19 ±1.28* 12.75 ± 3.44* 7.27 ± 6.68 2.55 ±2.20 3.27 ± 3.19 27.05 ±10.54 ACD 組 24 83.75 ±16.63* 9.55 ±9.32 1 104.79 ±622.14*#37.21 ±27.13*# 8.61 ±8.28*# 76.37 ±69.26*#30.04 ±11.04

2.2 ACD 組 TNF-α、IFN-γ、IL-6 水平與 SI、SF、Hb、CD+8T細胞比例的關(guān)系 Pearson相關(guān)分析顯示，ACD組血清TNF-α與SI、Hb呈負(fù)相關(guān)（r分別為-0.41、-0.44，P均 ＜0.05），與 SF 呈正相關(guān)（r=0.69，P＜0.01）;血清 IFN-γ 與 SF 呈正相關(guān)（r=0.50，P＜ 0.01），與 SI、Hb 無相關(guān)性（r分別為-0.28、-0.37，P均 ＞ 0.05）;血清 IL-6 與 SI、Hb呈負(fù)相關(guān)（r分別為 -0.46、-0.76，P＜0.05 或 ＜0.01），與 SF 呈正相關(guān)（r=0.74，P＜0.01）;血清TNF-α、IFN-γ、IL-6 與 CD+8T 細胞比例均無相關(guān)性（r分別為0.33、0.19、0.21，P均 ＞0.05）。

3 討論

ACD又稱為炎癥性貧血，指在慢性感染、慢性炎癥、惡性腫瘤或最近有重癥創(chuàng)傷、外科手術(shù)等出現(xiàn)的貧血［4］。目前，ACD的發(fā)病機制仍不完全清楚，一般認(rèn)為其發(fā)病主要與紅細胞壽命縮短、細胞因子干擾、鐵釋放及利用障礙有關(guān)［2］。近年研究表明，炎癥性細胞因子（如 TNF-α、IFN-γ、IL-6 等）在 ACD的發(fā)生、發(fā)展過程中具有重要作用，并通過以下途徑導(dǎo)致鐵代謝異常后發(fā)生作用:①TNF-α可通過抑制網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)釋放鐵［5］、抑制二價金屬離子轉(zhuǎn)運體的表達以及腸道上皮細胞對鐵的吸收［6］影響鐵代謝;②IFN-γ通過誘導(dǎo)鐵蛋白轉(zhuǎn)錄及翻譯從而激活鐵調(diào)節(jié)蛋白使得單核巨噬細胞內(nèi)鐵儲存增加［7］，并可誘導(dǎo)自由基生成損傷紅細胞膜導(dǎo)致其被巨噬細胞吞噬加劇細胞內(nèi)鐵積聚和低鐵血癥發(fā)生［8，9］;③IL-6可誘導(dǎo)ACD患者體內(nèi)鐵調(diào)素大量分泌從而抑制腸道鐵吸收和單核巨噬細胞鐵釋放導(dǎo)致低鐵血癥［10］。同時，單核巨噬細胞在通過上述途徑參與導(dǎo)致鐵代謝異常的過程中自身亦可產(chǎn)生鐵調(diào)素引起鐵代謝異常進一步加重［11］。

本研究結(jié)果顯示，ACD 組血清 TNF-α、IFN-γ、IL-6水平明顯高于對照組和IDA組，而對照組和IDA組間比較無明顯統(tǒng)計學(xué)差異;ACD組血清SI、Hb水平隨TNF-α、IL-6水平增高而遞減，SF水平隨TNF-α、IFN-γ、IL-6 水平增高而遞增。高水平的TNF-α、IL-6促使貧血持續(xù)進展加重，并導(dǎo)致 SI、Hb明顯下降、SF明顯升高。故ACD患者體內(nèi)高水平的 TNF-α、IFN-γ、IL-6 是導(dǎo)致機體鐵代謝發(fā)生異常的重要原因之一。血清IFN-γ水平在ACD組與對照組、IDA組雖存在差異，但本研究未能觀察到IFN-γ水平的升高對SI、Hb產(chǎn)生影響。而王文等［12］研究發(fā)現(xiàn)，癌性貧血患者血清IFN-γ水平與Hb呈負(fù)相關(guān)。筆者將進一步研究觀察。

有研究表明，高水平的 TNF-α、IFN-γ、IL-6 可造成ACD 患者體內(nèi) CD+8T細胞比例升高［7，13］。體內(nèi)高水平的 TNF-α、IFN-γ、IL-6使體內(nèi)鐵代謝持續(xù)異常從而導(dǎo)致長期的低鐵血癥，而低鐵血癥會產(chǎn)生大量CD+8T細胞，這些CD+8T細胞可分泌更多的IL-6從而使得淋巴細胞表面更多的T細胞表面標(biāo)志被激活及產(chǎn)生更多的IFN-γ，而IFN-γ可對Th細胞產(chǎn)生影響［14］。本研究未發(fā)現(xiàn)ACD患者體內(nèi)高水平TNF-α、IFN-γ、IL-6 與 CD+8T 細胞比例存在相關(guān)性，可能與以下因素有關(guān):①TNF-α主要由活化的巨噬細胞、T淋巴細胞、自然殺傷細胞（NK細胞）分泌，IL-6主要由Th2細胞、血管內(nèi)皮細胞、成纖維細胞分泌，IFN-γ主要由Th1、Tc1及NK細胞分泌。雖然炎癥狀態(tài)下活化的T淋巴細胞是分泌TNF-α、IFN-γ、IL-6等細胞因子的主要來源［15］，但NK細胞、巨噬細胞、血管內(nèi)皮細胞、成纖維細胞等亦參與其中。故CD+8T細胞的比例未能表現(xiàn)出與 TNF-α、IFN-γ、IL-6水平變化相關(guān)的特異性改變，可能是由于各種相關(guān)因素綜合影響所致。②本研究觀察病例數(shù)相對較少，且病例中包含腫瘤、慢性炎癥、慢性感染等不同疾病，是否在各個單一病種中存在相關(guān)性還有待擴大樣本進一步觀察。

綜上所述，血清 TNF-α、IFN-γ、IL-6 在 ACD 的發(fā)生和發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用，聯(lián)合檢測血清TNF-α、IFN-γ、IL-6 水平并對其進行調(diào)控，對 ACD 的診療具有積極的臨床意義。

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