微柱凝膠法在輸血患者不規則抗體的篩檢中應用

王忱　曹志剛　張艷

[摘 要] 目的：探討微柱凝膠法在臨床輸血患者不規則抗體篩檢中的應用價值。方法：采用微柱凝膠法和凝聚胺法對我院2010年1月至2014年3月申請輸血治療的4087例患者進行不規則抗體篩查，陽性結果用譜細胞進行抗體鑒定，分析比較兩種方法進行臨床輸血前不規則抗體篩查的優缺點。結果：4087例申請輸血患者中，發現不規則抗體陽性患者28例，不規則抗體陽性率為0.69%（28/4087），有既往輸血或妊娠史22例（構成比為78.57%），無輸血或妊娠史6例（構成比為21.43%）。微柱凝膠法檢出28例，凝聚胺法檢出22例，漏檢6例，漏檢率為0.15%。微柱凝膠法敏感性較高，但兩種方法檢出率比較，差異無統計學意義（χ2=0.724，P=0.295）。結論：采用微柱凝膠法輸血前對不規則抗體進行篩查具有較高的準確性，敏感性，且方便、快速、易于標準化。

[關鍵詞] 微柱凝膠法；輸血；凝聚胺法；不規則抗體；篩檢

中圖分類號：R446.1 文獻標識碼：A 文章編號：2095-5200（2014）06-071-02

不規則抗體即意外抗體，是指血清中抗-A、抗-B以外的其他血型抗體。人體含有的血清抗體主要有IgG及IgM兩大類，其中ABO血型內的抗-A、抗-B為IgM型，其余血型系統內的抗體則歸屬于IgG型。其他血型系統內的不規則抗體是輸血反應的重要誘因，一旦發病患者輕則出現發熱、寒戰，重則出現紅細胞不配合及壽命縮短，溶血性輸血反應，直接危及患者生命安全[1]。由于傳統鹽水血型鑒定及交叉配血實驗僅能檢測ABO血型系統內的不規則抗體，而對其他血型系統無效，因此尋求一種有效的不規則抗體篩檢技術成為臨床研究的重要內容[2]。微柱凝膠法是一種新型的血型鑒定技術，可應用于不規則抗體篩檢工作，但其實際篩查效果如何，臨床報道較少。因此，筆者選取我院2010年1月至2014年3月申請輸血治療的4087例患者采用微柱凝膠法篩檢，結果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究對象為我院2010年1月至2014年3月申請輸血治療的4087例患者，其中男性2457例，女性1630例，年齡18～75歲，平均年齡（41.3±18.4）歲。

1.2 實驗儀器與試劑

選用西班牙Diana公司提供的微柱凝膠孵育器、全自動配血系統儀器、微柱凝膠離心機以及微柱凝膠Coombs卡。篩選細胞l號、Ⅱ號和Ⅲ號及鑒定譜細胞由上海血液生物醫藥有限責任公司提供；凝聚胺試劑盒由珠海貝索生物技術有限公司提供。

1.3 實驗方法

微柱凝膠法先將篩選細胞l號、Ⅱ號和Ⅲ號按1：5比例稀釋為0.9濃度的備用細胞液，并置于試劑槽內。對微柱凝膠Coombs卡進行編號，置于儀器卡欄內。取患者5mL靜脈血，常規離心后編號，并置于標本槽內。選取不規則抗體篩查程序，啟動全自動配血系統儀器，儀器自動稀釋、溫育、離心，最終判讀結果。陽性結果標本根據譜細胞反應格局來判斷其不規則抗體特異性類型。凝聚胺法按試劑盒操作說明書進行。

1.4 統計方法

所有收集數據錄入Excel2003，在spss17.0中進行統計分析。計量資料以（x±s）表示，計量資料采用兩樣本獨立t檢驗，計數資料采用卡方檢驗，檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 不規則陽性抗體患者特異性抗體分布

4087例申請輸血患者中，發現不規則抗體陽性患者28例，不規則抗體陽性率為0.69%（28/4087），其中男性15例（構成比為53.57%），女性13例（構成比為46.43%）。有既往輸血或妊娠史22例（構成比為78.57%），無輸血或妊娠史6例（構成比為21.43%）。

2.2 兩種不規則抗體檢測方法檢查結果

微柱凝膠法檢出28例，采用譜細胞鑒定均為陽性，凝聚胺法檢出22例，采用譜細胞鑒定均為陽性，凝聚胺法漏檢6例，漏檢率為0.15%。兩種檢查方法的檢出結果比較差異不顯著（χ2=0.724，P=0.295）。

3 討論

輸血中受血者的不規則抗體如接受對應抗原血液制品，受血者可能出現嚴重免疫性溶血性輸血反應，這將危機患者生命[3]。不規則抗體生成在輸血人群中較為少見，本次研究中4087例申請輸血患者僅發現不規則抗體陽性患者28例，不規則抗體陽性率為0.69%。不規則抗體篩查意義主要有以下幾點[4]：（1）對獻血者的血清、血漿篩查可避免含不規則抗體血液輸入受血者體內，避免受血者發病免疫性溶血性輸血反應。（2）對受血者篩查有利于血液選擇，醫師可以根據檢測結果確定患者具體需求血液，避免患者因輸入血液相關抗原而出現溶血性輸血反應。（3）孕婦人群的不規則抗體篩查，可盡早明確孕婦是否伴有不規則抗體，可為孕期新生兒溶血病防治提供參考。

目前，臨床應用的血清抗體檢測有鹽水血型鑒定、交叉配血試驗等。其中鹽水血型鑒定原理是IgM型抗體可于鹽水介質內與對應抗原紅細胞凝結，但是IgG型抗體無法在鹽水環境內容出現凝結，僅可能于酶學實驗、抗人球蛋白實驗內才可能出現凝結[5]。交叉配血試驗是確定受血者能否行輸血操作的重要依據，但該種檢測技術易受待檢紅細胞懸液濃度、外部環境影響，其檢測敏感度較低[6]。微柱凝膠法檢測是一種基于經典抗人蛋白實驗的一種新型檢測技術，已在歐美地區得到廣泛的應用。該技術原理是通過微柱凝膠內微小孔隙的過濾能力及免疫化學抗原抗體的特異反應，再結合離心技術將出現凝結反應的紅細胞阻滯于微柱凝膠內，而未發生凝結反應的單體紅細胞可通過微柱凝膠孔隙運動至柱底，最終顯示篩檢結果[7]。具有高靈敏度，結果精確等優勢[8]。此外，微柱凝膠法檢測技術自動化水平極高，檢測操作難度低，操作流程一目了然，利于推廣[9]。凝聚胺試驗是在LIM下多聚季氨鹽促使紅細胞產生非特異性凝集反應[10]，具有靈敏度高、價廉、快速、操作簡便等優點，但凝聚胺法需手工操作，對操作者要求較高，必須正確振搖細胞，嚴格按照規定時間判定結果。對有些低濃度抗體易漏檢。本次研究中，微柱凝膠法檢出28例，凝聚胺法檢出22例，凝聚胺法敏感性較低。

綜上所述，采用微柱凝膠法輸血前對不規則抗體進行篩查準確度高，該技術發展成熟，具有較高自動化、標準化水平，檢測操作難度較低，檢測速度較快，檢測相關費用低，值得臨床推廣。

參 考 文 獻

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