不同培養基類型對薄荷組織培養的影響
2014-12-23 11:05:11張倩管遠清李青
山東農業科學 2014年11期
張倩+管遠清+李青
摘 要：以薄荷莖段為外植體，研究了4種不同類型培養基（MS、1/2MS、B5、N6）對愈傷組織誘導、芽分化以及根誘導的影響。結果表明：1/2MS培養基愈傷組織誘導率最高，為100%，N6培養基愈傷組織的生長量最高；B5培養基芽的誘導率最高，為40%，但1/2MS培養基芽的長勢較好；1/2MS培養基最適合根的誘導，誘導率為82.5%。綜合分析確定薄荷愈傷組織和根系誘導的最適宜培養基為1/2MS培養基，芽分化的最適宜培養基為B5培養基。
關鍵詞：薄荷；組織培養；培養基；誘導率
中圖分類號：S567.23+5.035.3 文獻標識號：A 文章編號：1001-4942（2014）11-0030-03
薄荷（Mentha canadensis L.）是唇形科多年生宿根性草本植物，味甘辛，性涼，歸肺、肝經，具有清利頭目、透疹、殺菌消炎等功效[1]，在我國自古就有藥食兼用的傳統。目前，薄荷已被廣泛應用于醫學、食品、化妝品等工業，具有很高的經濟價值。薄荷繁殖方式以扦插、種子和秧苗繁殖為主，存在品種更新緩慢、易感染病毒等缺點。應用組織培養技術可克服薄荷傳統繁殖方式的缺點，已有諸多專家進行了相關研究[2～6]。本試驗以薄荷的莖段為外植體，研究不同類型培養基（MS、1/2MS、B5、N6）對薄荷愈傷組織誘導、芽分化以及根誘導的影響，以利于薄荷組織培養中不同誘導目的適宜培養基的篩選。
1 材料與方法
1.1 試驗材料
供試品種為葡萄柚薄荷（Mentha suaveolens× piperita），選取無病且生長健壯的葡萄柚薄荷莖段作為外植體，剪去莖段外層大葉片，用洗衣粉水和清水洗凈，濾紙吸干其表面水分備用。
1.2 試驗處理
試驗于2013年4月至2013年11月進行，選取較常用的4種培養基：MS、1/2MS、B5、N6，培養基加瓊脂8 g/L，蔗糖30 g/L。薄荷愈傷組織誘導的試驗處理見表1，薄荷芽和根誘導的試驗處理見表2。
1.3 接種外植體
將薄荷莖段置于干凈燒杯中，先用75%酒精浸泡15 s，無菌水沖洗1～2次，再用 0.1% HgCl2浸泡60 s，無菌水沖洗多次。待濾紙吸干其表面水分后，切取0.5 cm長的莖段，接種到培養基上。
4月19日將薄荷外植體接種于1、2、3、4號培養基內，每個處理接種6瓶，每瓶接種5個，共30個外植體。7月9日、10月11日分別將薄荷外植體接種于5、6、7、8號培養基內，每個處理接種8瓶，每瓶接種5個，共40個外植體。
1.4 培養條件及觀察
保持干球溫度14.8℃，濕球溫度（25±2）℃；光照強度為1 500～2 000 lx，12 h光暗交替處理。每天觀測外植體分化情況，統計外植體開始萌動的時間，記錄愈傷組織、芽、根的誘導及生長情況，并進行比較分析。
2 結果與分析
2.1 不同培養基對薄荷愈傷組織誘導率和生長量的影響
由表3可以看出，4種培養基對薄荷愈傷組織的誘導率均在90%以上。其中，以1/2MS培養基誘導率最高，為100.0%，其次是MS培養基，誘導率為96.7%，N6和B5培養基稍差，誘導率分別為93.3%和90.0%，但1/2MS和MS培養基愈傷組織生長量明顯低于B5和N6培養基。
2.2 不同培養基對薄荷芽誘導率和生長量的影響
由表4可以看出，4種培養基對薄荷芽誘導率的影響差異較大，其中以MS和1/2MS培養基較好，芽誘導率分別為25.0%和27.5%，平均芽重均高于N6和B5培養基。B5培養基芽誘導率雖高于MS和1/2MS培養基，但芽平均重量低于二者。N6培養基芽誘導效果最差。
2.3 不同培養基對薄荷根誘導率的影響
由表5可以看出，4種不同類型培養基中，以1/2MS培養基對根的誘導率最高，為82.5%，其次是MS培養基，根誘導率為60.0%，而N6和B5培養基均未誘導出根。
3 結論與討論
綜合分析本試驗結果，4種不同類型培養基以1/2MS培養基對薄荷莖段的誘導效果最好，愈傷組織和根的誘導率最高，分別為100%和82.5%，對芽的誘導率也達27.5%，其次是MS培養基。B5培養基對薄荷芽的誘導率雖高達40%，但未誘導出根，其它指標也低于1/2MS和MS培養基。N6培養基的誘導效果最差。
試驗看出，不同類型培養基對薄荷莖段的誘導效果有較大差異，1/2MS和MS培養基誘導的各項指標比較均衡，而B5培養基對薄荷愈傷組織和芽的誘導率較多，雖未誘導出根，但可作為薄荷芽誘導的專用培養基。本試驗是在基本條件一致的情況下，研究了薄荷愈傷組織誘導、芽分化及根誘導的最佳培養基類型，在此基礎上，提高其誘導率的培養基配方，如生長調節劑的種類及濃度有待于進一步研究。
參 考 文 獻：
[1] 李辰飛，劉帥. 薄荷的妙用[J].中老年保健，2011（6）：5.
[2] 丁琤，徐衛紅. 薄荷脫毒苗的離體培養及快速繁殖[J].上饒師范學院學報：自然科學版，2004，24（6）：69-72.
[3] 李延紅. 薄荷莖段誘導愈傷組織的研究[J].北方園藝，2008（10）：163-165.
[4] 錢森和，厲榮玉，王洲，等. 薄荷離體培養及植株再生的研究[J].作物雜志，2008（6）：41-44.
[5] 李格，呂國華，賈曉鷹，等. 6-BA、NAA及其組合對誘導薄荷莖段分化與增殖的影響[J].石河子大學學報：自然科學版，2004，22（4）：305-308.
[6] 張澤宏，王兵麗，陳巧玲. 薄荷組織和細胞培養的研究進展[J]. 漳州師范學院學報：自然科學版，2013，26（3）：93-95. 山 東 農 業 科 學 2014，46（11）：39～42
摘 要：以薄荷莖段為外植體，研究了4種不同類型培養基（MS、1/2MS、B5、N6）對愈傷組織誘導、芽分化以及根誘導的影響。結果表明：1/2MS培養基愈傷組織誘導率最高，為100%，N6培養基愈傷組織的生長量最高；B5培養基芽的誘導率最高，為40%，但1/2MS培養基芽的長勢較好；1/2MS培養基最適合根的誘導，誘導率為82.5%。綜合分析確定薄荷愈傷組織和根系誘導的最適宜培養基為1/2MS培養基，芽分化的最適宜培養基為B5培養基。
關鍵詞：薄荷；組織培養；培養基；誘導率
中圖分類號：S567.23+5.035.3 文獻標識號：A 文章編號：1001-4942（2014）11-0030-03
薄荷（Mentha canadensis L.）是唇形科多年生宿根性草本植物，味甘辛，性涼，歸肺、肝經，具有清利頭目、透疹、殺菌消炎等功效[1]，在我國自古就有藥食兼用的傳統。目前，薄荷已被廣泛應用于醫學、食品、化妝品等工業，具有很高的經濟價值。薄荷繁殖方式以扦插、種子和秧苗繁殖為主，存在品種更新緩慢、易感染病毒等缺點。應用組織培養技術可克服薄荷傳統繁殖方式的缺點，已有諸多專家進行了相關研究[2～6]。本試驗以薄荷的莖段為外植體，研究不同類型培養基（MS、1/2MS、B5、N6）對薄荷愈傷組織誘導、芽分化以及根誘導的影響，以利于薄荷組織培養中不同誘導目的適宜培養基的篩選。
1 材料與方法
1.1 試驗材料
供試品種為葡萄柚薄荷（Mentha suaveolens× piperita），選取無病且生長健壯的葡萄柚薄荷莖段作為外植體，剪去莖段外層大葉片，用洗衣粉水和清水洗凈，濾紙吸干其表面水分備用。
1.2 試驗處理
試驗于2013年4月至2013年11月進行，選取較常用的4種培養基：MS、1/2MS、B5、N6，培養基加瓊脂8 g/L，蔗糖30 g/L。薄荷愈傷組織誘導的試驗處理見表1，薄荷芽和根誘導的試驗處理見表2。
1.3 接種外植體
將薄荷莖段置于干凈燒杯中，先用75%酒精浸泡15 s，無菌水沖洗1～2次，再用 0.1% HgCl2浸泡60 s，無菌水沖洗多次。待濾紙吸干其表面水分后，切取0.5 cm長的莖段，接種到培養基上。
4月19日將薄荷外植體接種于1、2、3、4號培養基內，每個處理接種6瓶，每瓶接種5個，共30個外植體。7月9日、10月11日分別將薄荷外植體接種于5、6、7、8號培養基內，每個處理接種8瓶，每瓶接種5個，共40個外植體。
1.4 培養條件及觀察
保持干球溫度14.8℃，濕球溫度（25±2）℃；光照強度為1 500～2 000 lx，12 h光暗交替處理。每天觀測外植體分化情況，統計外植體開始萌動的時間，記錄愈傷組織、芽、根的誘導及生長情況，并進行比較分析。
2 結果與分析
2.1 不同培養基對薄荷愈傷組織誘導率和生長量的影響
由表3可以看出，4種培養基對薄荷愈傷組織的誘導率均在90%以上。其中，以1/2MS培養基誘導率最高，為100.0%，其次是MS培養基，誘導率為96.7%，N6和B5培養基稍差，誘導率分別為93.3%和90.0%，但1/2MS和MS培養基愈傷組織生長量明顯低于B5和N6培養基。
2.2 不同培養基對薄荷芽誘導率和生長量的影響
由表4可以看出，4種培養基對薄荷芽誘導率的影響差異較大，其中以MS和1/2MS培養基較好，芽誘導率分別為25.0%和27.5%，平均芽重均高于N6和B5培養基。B5培養基芽誘導率雖高于MS和1/2MS培養基，但芽平均重量低于二者。N6培養基芽誘導效果最差。
2.3 不同培養基對薄荷根誘導率的影響
由表5可以看出，4種不同類型培養基中，以1/2MS培養基對根的誘導率最高，為82.5%，其次是MS培養基，根誘導率為60.0%，而N6和B5培養基均未誘導出根。
3 結論與討論
綜合分析本試驗結果，4種不同類型培養基以1/2MS培養基對薄荷莖段的誘導效果最好，愈傷組織和根的誘導率最高，分別為100%和82.5%，對芽的誘導率也達27.5%，其次是MS培養基。B5培養基對薄荷芽的誘導率雖高達40%，但未誘導出根，其它指標也低于1/2MS和MS培養基。N6培養基的誘導效果最差。
試驗看出，不同類型培養基對薄荷莖段的誘導效果有較大差異，1/2MS和MS培養基誘導的各項指標比較均衡，而B5培養基對薄荷愈傷組織和芽的誘導率較多，雖未誘導出根，但可作為薄荷芽誘導的專用培養基。本試驗是在基本條件一致的情況下，研究了薄荷愈傷組織誘導、芽分化及根誘導的最佳培養基類型，在此基礎上，提高其誘導率的培養基配方，如生長調節劑的種類及濃度有待于進一步研究。
參 考 文 獻：
[1] 李辰飛，劉帥. 薄荷的妙用[J].中老年保健，2011（6）：5.
[2] 丁琤，徐衛紅. 薄荷脫毒苗的離體培養及快速繁殖[J].上饒師范學院學報：自然科學版，2004，24（6）：69-72.
[3] 李延紅. 薄荷莖段誘導愈傷組織的研究[J].北方園藝，2008（10）：163-165.
[4] 錢森和，厲榮玉，王洲，等. 薄荷離體培養及植株再生的研究[J].作物雜志，2008（6）：41-44.
[5] 李格，呂國華，賈曉鷹，等. 6-BA、NAA及其組合對誘導薄荷莖段分化與增殖的影響[J].石河子大學學報：自然科學版，2004，22（4）：305-308.
[6] 張澤宏，王兵麗，陳巧玲. 薄荷組織和細胞培養的研究進展[J]. 漳州師范學院學報：自然科學版，2013，26（3）：93-95. 山 東 農 業 科 學 2014，46（11）：39～42
摘 要：以薄荷莖段為外植體，研究了4種不同類型培養基（MS、1/2MS、B5、N6）對愈傷組織誘導、芽分化以及根誘導的影響。結果表明：1/2MS培養基愈傷組織誘導率最高，為100%，N6培養基愈傷組織的生長量最高；B5培養基芽的誘導率最高，為40%，但1/2MS培養基芽的長勢較好；1/2MS培養基最適合根的誘導，誘導率為82.5%。綜合分析確定薄荷愈傷組織和根系誘導的最適宜培養基為1/2MS培養基，芽分化的最適宜培養基為B5培養基。
關鍵詞：薄荷；組織培養；培養基；誘導率
中圖分類號：S567.23+5.035.3 文獻標識號：A 文章編號：1001-4942（2014）11-0030-03
薄荷（Mentha canadensis L.）是唇形科多年生宿根性草本植物，味甘辛，性涼，歸肺、肝經，具有清利頭目、透疹、殺菌消炎等功效[1]，在我國自古就有藥食兼用的傳統。目前，薄荷已被廣泛應用于醫學、食品、化妝品等工業，具有很高的經濟價值。薄荷繁殖方式以扦插、種子和秧苗繁殖為主，存在品種更新緩慢、易感染病毒等缺點。應用組織培養技術可克服薄荷傳統繁殖方式的缺點，已有諸多專家進行了相關研究[2～6]。本試驗以薄荷的莖段為外植體，研究不同類型培養基（MS、1/2MS、B5、N6）對薄荷愈傷組織誘導、芽分化以及根誘導的影響，以利于薄荷組織培養中不同誘導目的適宜培養基的篩選。
1 材料與方法
1.1 試驗材料
供試品種為葡萄柚薄荷（Mentha suaveolens× piperita），選取無病且生長健壯的葡萄柚薄荷莖段作為外植體，剪去莖段外層大葉片，用洗衣粉水和清水洗凈，濾紙吸干其表面水分備用。
1.2 試驗處理
試驗于2013年4月至2013年11月進行，選取較常用的4種培養基：MS、1/2MS、B5、N6，培養基加瓊脂8 g/L，蔗糖30 g/L。薄荷愈傷組織誘導的試驗處理見表1，薄荷芽和根誘導的試驗處理見表2。
1.3 接種外植體
將薄荷莖段置于干凈燒杯中，先用75%酒精浸泡15 s，無菌水沖洗1～2次，再用 0.1% HgCl2浸泡60 s，無菌水沖洗多次。待濾紙吸干其表面水分后，切取0.5 cm長的莖段，接種到培養基上。
4月19日將薄荷外植體接種于1、2、3、4號培養基內，每個處理接種6瓶，每瓶接種5個，共30個外植體。7月9日、10月11日分別將薄荷外植體接種于5、6、7、8號培養基內，每個處理接種8瓶，每瓶接種5個，共40個外植體。
1.4 培養條件及觀察
保持干球溫度14.8℃，濕球溫度（25±2）℃；光照強度為1 500～2 000 lx，12 h光暗交替處理。每天觀測外植體分化情況，統計外植體開始萌動的時間，記錄愈傷組織、芽、根的誘導及生長情況，并進行比較分析。
2 結果與分析
2.1 不同培養基對薄荷愈傷組織誘導率和生長量的影響
由表3可以看出，4種培養基對薄荷愈傷組織的誘導率均在90%以上。其中，以1/2MS培養基誘導率最高，為100.0%，其次是MS培養基，誘導率為96.7%，N6和B5培養基稍差，誘導率分別為93.3%和90.0%，但1/2MS和MS培養基愈傷組織生長量明顯低于B5和N6培養基。
2.2 不同培養基對薄荷芽誘導率和生長量的影響
由表4可以看出，4種培養基對薄荷芽誘導率的影響差異較大，其中以MS和1/2MS培養基較好，芽誘導率分別為25.0%和27.5%，平均芽重均高于N6和B5培養基。B5培養基芽誘導率雖高于MS和1/2MS培養基，但芽平均重量低于二者。N6培養基芽誘導效果最差。
2.3 不同培養基對薄荷根誘導率的影響
由表5可以看出，4種不同類型培養基中，以1/2MS培養基對根的誘導率最高，為82.5%，其次是MS培養基，根誘導率為60.0%，而N6和B5培養基均未誘導出根。
3 結論與討論
綜合分析本試驗結果，4種不同類型培養基以1/2MS培養基對薄荷莖段的誘導效果最好，愈傷組織和根的誘導率最高，分別為100%和82.5%，對芽的誘導率也達27.5%，其次是MS培養基。B5培養基對薄荷芽的誘導率雖高達40%，但未誘導出根，其它指標也低于1/2MS和MS培養基。N6培養基的誘導效果最差。
試驗看出，不同類型培養基對薄荷莖段的誘導效果有較大差異，1/2MS和MS培養基誘導的各項指標比較均衡，而B5培養基對薄荷愈傷組織和芽的誘導率較多，雖未誘導出根，但可作為薄荷芽誘導的專用培養基。本試驗是在基本條件一致的情況下，研究了薄荷愈傷組織誘導、芽分化及根誘導的最佳培養基類型，在此基礎上，提高其誘導率的培養基配方，如生長調節劑的種類及濃度有待于進一步研究。
參 考 文 獻：
[1] 李辰飛，劉帥. 薄荷的妙用[J].中老年保健，2011（6）：5.
[2] 丁琤，徐衛紅. 薄荷脫毒苗的離體培養及快速繁殖[J].上饒師范學院學報：自然科學版，2004，24（6）：69-72.
[3] 李延紅. 薄荷莖段誘導愈傷組織的研究[J].北方園藝，2008（10）：163-165.
[4] 錢森和，厲榮玉，王洲，等. 薄荷離體培養及植株再生的研究[J].作物雜志，2008（6）：41-44.
[5] 李格，呂國華，賈曉鷹，等. 6-BA、NAA及其組合對誘導薄荷莖段分化與增殖的影響[J].石河子大學學報：自然科學版，2004，22（4）：305-308.
[6] 張澤宏，王兵麗，陳巧玲. 薄荷組織和細胞培養的研究進展[J]. 漳州師范學院學報：自然科學版，2013，26（3）：93-95. 山 東 農 業 科 學 2014，46（11）：39～42
