體外過(guò)敏原定量檢測(cè)在哮喘診斷中的應(yīng)用

西電集團(tuán)醫(yī)院（西安710077） 吳艷梅 張莉莉

哮喘是常見(jiàn)的呼吸道慢性疾病，大量研究表明過(guò)敏性因素是誘發(fā)哮喘的重要原因［1］。Allergy Screen（敏篩）過(guò)敏原定量檢測(cè)系統(tǒng)是由德國(guó) Mediwiss Analytic GmbH生產(chǎn)，通過(guò)生物素親和素放大系統(tǒng)，定量檢測(cè)人血清過(guò)敏原特異性IgE，是國(guó)際上變態(tài)反應(yīng)及相關(guān)疾病檢測(cè)廣泛采用的技術(shù)。我院于2013年11月至2014年4月對(duì)30例哮喘患者 及30例正常人進(jìn)行體外過(guò)敏原定量檢測(cè)，分析其在哮喘診斷中的臨床意義，現(xiàn)報(bào)告如下。

資料和方法

1 一般資料 選擇我科診治的哮喘30例及正常人群30例，分成哮喘組及正常對(duì)照組兩組。哮喘組30例，男16例，女14例，年齡25～76歲，平均（56．2±1．4）歲；正常對(duì)照組30例，男17例，女13例，年齡23～78歲，平均（58．3±1．2）歲。兩組性別構(gòu)成、年齡等有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：① 反復(fù)發(fā)作喘息、氣急、胸悶或咳嗽，多與接觸變應(yīng)原、冷空氣、物理、化學(xué)性刺激以及病毒性上呼吸道感染、運(yùn)動(dòng)等有關(guān)。②發(fā)作時(shí)在雙肺可聞及散在或彌漫性，以呼氣相為主哮鳴音，呼氣相延長(zhǎng)。③上述癥狀和體征可經(jīng)治療或自行緩解。④ 除外其他疾病引起的喘息、氣急、胸悶和咳嗽。⑤臨床表現(xiàn)不典型者（如無(wú)明顯喘息或體征），應(yīng)至少具備以下1項(xiàng)試驗(yàn)陽(yáng)性：支氣管激發(fā)或運(yùn)動(dòng)激發(fā)試驗(yàn)陽(yáng)性；支氣管舒張?jiān)囼?yàn)陽(yáng)性FEV1增加≥12%，且FEV1增加絕對(duì)值≥200ml；呼氣流量峰值（PEF）日內(nèi)（或2周）變異率≥20%。符合①～④條或④、⑤條者，可以診斷為哮喘。

2 方 法 采靜脈血2～3ml分離血清。操作步驟如下：在檢測(cè)板上加入血清標(biāo)本250μl，孵育45min；沖洗，加入抗體250μl，孵育45min；沖洗，加入鏈霉親和素標(biāo)記物250μl，孵育20min；沖洗，加入底物250μl，孵育20min；沖洗，終止底物酶反應(yīng)，閱讀儀讀數(shù)。儀器應(yīng)用德國(guó)Mediwiss醫(yī)療診斷科技有限公司生產(chǎn)的Allrey Screen過(guò)敏原檢測(cè)儀。

試劑材料選用德國(guó) Mediwiss Analytic Gm變應(yīng)原體外檢測(cè)試盒，包括塵螨、粉塵、蟑螂、動(dòng)物皮屑、樹(shù)花粉、草花粉、霉菌、牛奶、雞蛋、魚(yú)蝦、肉類、水果、干果堅(jiān)果、豆類、藥物。

3 結(jié)果判斷 對(duì)于每種過(guò)敏原，試劑條上顏色深淺同患者血清中的特異性抗體含量成正比。通過(guò)計(jì)算機(jī)進(jìn)行量化分析，分成0～6級(jí)；代表濃度分別為：未檢出、低水平、中等、明顯高、甚高、極高。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 15．0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)數(shù)資料組間比較用χ2檢驗(yàn)，P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義．

結(jié) 果

過(guò)敏原敏篩試驗(yàn)：哮喘組陽(yáng)性率為76．67%，正常對(duì)照組陽(yáng)性率為13．33%。哮喘組與正常對(duì)照組陽(yáng)性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．01），見(jiàn)表1。

表1 哮喘組與對(duì)照組過(guò)敏原檢測(cè)呈陽(yáng)性反應(yīng)例數(shù)及陽(yáng)性率

過(guò)敏原敏篩試驗(yàn)從陽(yáng)性例數(shù)分析，塵螨是最常見(jiàn)吸入性致病原，占83．3%，與文獻(xiàn)報(bào)道相似［2］；其次是粉塵，占70．0%；魚(yú)蝦是最常見(jiàn)食入性致病原，占46．7%，見(jiàn)表2。

表2 哮喘組患者不同過(guò)敏原呈陽(yáng)性反應(yīng)例數(shù)及陽(yáng)性率

討 論

過(guò)敏原敏篩試驗(yàn)是近年國(guó)際推行的一種變態(tài)反應(yīng)檢測(cè)項(xiàng)目，變應(yīng)原反應(yīng)包含有空氣中90%常見(jiàn)吸入性和食入性過(guò)敏原，如果陽(yáng)性提示對(duì)吸入物、食入物過(guò)敏，如果陰性，初步提示患者對(duì)吸入物、食入物不過(guò)敏。其敏感性和特異性可達(dá)90%以上。用于檢測(cè)人體受變應(yīng)原攻擊后血清特異性IgE抗體存在，檢測(cè)不受藥物治療等外部條件影響，無(wú)危險(xiǎn)性，方便了臨床篩查。目前用來(lái)代替血清總IgE作為檢測(cè)呼吸道變態(tài)反應(yīng)篩選試驗(yàn)［3、4］。哮喘由多種細(xì)胞（如嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞及氣道上皮細(xì)胞等）和細(xì)胞組分參與的氣道慢性炎癥性疾患。相關(guān)研究表明本病的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)［5］。有學(xué)者認(rèn)為哮喘發(fā)病率上升原因，可能跟環(huán)境因素有關(guān)。臨床上分為外源性哮喘和內(nèi)源性哮喘，外源性哮喘是由變應(yīng)原引起的。本文中哮喘組過(guò)敏原敏篩實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性率為76．67%，與正常對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明哮喘患者行過(guò)敏原體外敏篩試驗(yàn)，可早期診斷并進(jìn)行干預(yù)治療。過(guò)敏原檢測(cè)是一種篩查和尋找過(guò)敏原重要體外檢測(cè)手段。找出引起疾病發(fā)作變應(yīng)原有助于哮喘病因診斷，也是對(duì)哮喘進(jìn)行預(yù)防與特異性抗原免疫治療的關(guān)鍵。

［1］ Brozek JL，Bousquet J，Baena-Cagnani CE，etal，Allergic Rhinitis and its Impact on Asthma（ARIA）guidelines：2010revision［J］．J Allergy Clin Immunol，2010，126：466-467．

［2］ 鐘韓榮，余聲華，余曉娟，等．CAP過(guò)敏原檢測(cè)系統(tǒng)在高危哮喘兒中的應(yīng)用［J］．中華兒科雜志，2002，40（10）：605-607．

［3］ 楊錫強(qiáng)．兒童哮喘的免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制和治療對(duì)策［J］．中國(guó)當(dāng)代兒科雜志，2001，3（4）：487．

［4］ 王 濤，黃 寒，李 云，等．變應(yīng)原皮試和吸入變應(yīng)原過(guò)篩試驗(yàn)對(duì)兒童哮喘的診斷價(jià)值［J］．醫(yī)學(xué)臨床研究，2005，22（1）：66-67．

［5］ 中華醫(yī)學(xué)會(huì)中華兒科雜志編輯委員會(huì)．2003年全國(guó)兒童哮喘專題研討會(huì)會(huì)議紀(jì)要［J］．中華兒科雜志，2004，42（2）：89-99．