甲氨蝶呤聯合環磷酰胺治療對強直性脊柱炎患者血清MMP-3的影響

， ，，，，，(南華大學附屬第二醫院脊柱外科，湖南 衡陽 421001)

甲氨蝶呤聯合環磷酰胺治療對強直性脊柱炎患者血清MMP-3的影響

陳小明，曹奇，楊鐵軍，陳亮元，唐國軍，顏學亮，唐曉軍
(南華大學附屬第二醫院脊柱外科，湖南 衡陽 421001)

目的通過檢測強直性脊柱炎患者甲氨蝶呤和環磷酰胺聯合治療前后血清基質金屬蛋白酶-3(MMP-3)的改變，了解甲氨蝶呤和環磷酰胺聯合治療強直性脊柱炎的效果及機制。方法36例強直性脊柱炎患者(甲氨蝶呤組、環磷酰胺組、甲氨喋呤聯合環磷酰胺用藥組，每組12例)分別在治療前、治療后24周時留取血清標本，采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測其MMP-3的濃度；分析比較胃腸道損害、肝損害和血象變化等不良事件的發生率。結果甲氨蝶呤聯合環磷酰胺組MMP-3水平顯著下降，與甲氨蝶呤組和環磷酰胺組比較，差異均有統計學意義(P<0.05)，且甲氨蝶呤聯合環磷酰胺組出現胃腸道損害、肝損害和血象變化等不良比單一用藥少，差異有統計學意義(P<0.05)。結論甲氨蝶呤聯合環磷酰胺的治療效果優于單一用藥，降低患者血清MMP-3濃度效果更佳，且不良反應發生少,這可能是其發揮臨床療效的機制。

強直性； 脊柱炎； 基質金屬蛋白酶-3； 甲氨喋呤； 環磷酰胺

強直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一種慢性全身性自身免疫性疾病，其發病原因不明的[1]。患者除可累及關節及系統外，還可使骨密度(bonemineral density,BMD)下降，甚至發生骨質疏松癥(osteoporosis,OP)，有些早期即可出現骨密度下降[2]，但針對強直性脊柱炎繼發骨密度下降的機制及骨代謝情況的機制目前尚不清楚[3]。強直性脊柱炎基質金屬蛋白酶(matrix metalloproteins)MMPs表達異常與骨代謝紊亂及OP等疾病的發生密切相關[4]。本研究擬通過甲氨蝶呤、環磷酰胺及兩者聯合治療前后強直性脊柱炎患者血清細胞因子MMP-3的變化，探討甲氨蝶呤聯合環磷酰胺發揮作用的可能機制。為強直性脊柱炎的防治選擇提供理論基礎，以改善強直性脊柱炎患者的預后。

1 資料與方法

1.1 主要試劑與儀器

MMP-3 ELISA試劑盒為上海西唐生物科技有限公司產品。主要儀器有：全自動定量酶標儀(芬蘭DENLEDRAGON Wellscan MK3)，離心機(上海安亭科學儀器廠TGL-168)，洗板機(芬蘭Wellw強直性脊柱炎h 4 MK2)，漩渦混合器(上海青浦滬西儀器廠 XW-80A)，烘箱(上海精宏實驗設備有限公司DHG-9023A)等。

1.2 病人資料

選擇本院2011年12月～2014至5月接受治療的36例強直性脊柱炎患者病例資料，男性，30例，年齡19歲～52歲，平均年齡34.53±8.26歲；病程3 m～360 m，平均病程79.52±91.06個月。無既往病史、體檢及常規化驗檢查無異常。按目的要求把病例資料分為三組：甲氨蝶呤組12例、環磷酰胺組12例、甲氨喋呤聯合環磷酰胺用藥組(聯合治療組)12例。

1.3 治療方法

甲氨蝶呤組：甲氨蝶呤10～15 mg/周；環磷酰胺組：環磷酰胺200～400 mg/2～3周；甲氨蝶呤和環磷酰胺聯合組：甲氨蝶呤10～15 mg/周；環磷酰胺200～400 mg/2～3周。

1.4 檢測方法

采靜脈血3 mL分離血清后ELISA法檢測血清中的MMP-3濃度。

1.5 統計學方法

使用SPSS13.0軟件進行統計分析，組間比較采用單因素方差分析，P<0.05，認為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 各組強直性脊柱炎患者治療前后血清MMP-3水平的變化

治療后三組患者血清MMP-3水平均有下降趨勢。甲氨蝶呤和環磷酰胺聯合組治療后血清MMP-3水平下降水平與單一用藥比較，差異有統計學意義(P<0.05)。

表1各組患者治療前后血清MMP-3(ng/mL)的變化(n=12)

治療前治療后(24周)P值甲氨蝶呤組19．569．870．091環磷酰胺組16．529．650．091聯合治療組15．984．830．028

2.1 不良反應

各組患者在治療期間均出現于藥物相關的不良反應，共有11例患者(30%)、19例次發生不良反應，甲氨蝶呤組有5例患者(14%)7例次、環磷酰胺組4例患者(12%)10例次、甲氨蝶呤和環磷酰胺聯合組2例患者(6%)2例次。經統計學比較分析，單一用藥組之間無統計學差異，而甲氨蝶呤和環磷酰胺聯合組與單一用藥組差異有統計學意義(P<0.05)。甲氨蝶呤和環磷酰胺聯合組出現不良比單一用藥不良反應少，見表2。停藥后所有反應消失。

表2與藥物直接相關的不良事件發生情況(n=12,例)

總的不良反應例次胃腸道癥狀肝酶異常白細胞減低其它甲氨蝶呤組72221環磷酰胺組103331聯合治療組20110

3 討 論

強直性脊柱炎患者出現的脊柱活動功能障礙與關節和骨的破壞和侵蝕關系密切，其主要原因是軟骨基質的被降解是關節和骨破壞[5]。這與各種蛋白酶的作用使細胞外基質成分大量降解有關，而對這種降解破壞作用具有決定意義的是基質金屬蛋白酶[6]。MMP-3能降解大量的細胞外基質成分，且國內外大量研究表明MMP-3在強直性脊柱炎脊柱是評價疾病活動性的有效指標[7]。

有研究發現，關節液中MMP-3的濃度在OP、反應性關節炎和強直性脊柱炎的炎性疾病中顯著高于非炎性骨關節疾病[8]。且血清中MMP-3的水平與其它的炎性標志物如IL-6、TNF-α、CRP和ESR之間具有顯著相關性。還有專家檢測到RA等炎性關節液中前MMP-3的濃度比骨關節炎等非炎性關節液高9倍[9]，提示MMP-3可能是一個反映關節局部炎癥狀況的標志物。

血清MMP-3濃度與強直性脊柱炎病情相關性的相關研究報道不多，都大致認為與強直性脊柱炎病情活動性相關，是其骨和軟骨破壞的重要原因。相比之下，結果顯示治療后三組患者血清MMP-3水平均有下降趨勢。甲氨蝶呤和環磷酰胺聯合組治療后血清MMP-3水平下降水平與單一用藥比較，差異有統計學意義(P<0.05)，且不良反少。說明甲氨蝶呤聯合環磷酰胺較單用藥組更能降低患者血清MMP-3水平，且能在治療過程中減少不良事件的發生。這可能是其發揮臨床療效的機制。

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2095-1116(2014)05-0477-02

2014-05-14

陳小明，男，醫學碩士，主治醫師，研究方向：脊柱外科臨床及相關基礎研究，E-mail:chenxiaoming82@sina.com.

R593.23

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(此文編輯：秦旭平)