益心通絡膠囊對大鼠實驗性血栓及血清血脂、IL-8、CRP、TXA2、6-keto-PGF1α的影響

張新元

益心通絡膠囊對大鼠實驗性血栓及血清血脂、IL-8、CRP、TXA2、6-keto-PGF1α的影響

張新元

目的 觀察益心通絡膠囊對大鼠血栓及血清總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、白細胞介素-8(IL-8)、C反應蛋白(CRP)、血栓素A2(TXA2)和6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的影響。方法 將Wistar大鼠隨機分為空白對照組、陽性對照組及益心通絡膠囊高、中、低劑量組，每組20只；空白對照組以生理鹽水灌胃，陽性對照組以復方丹參片灌胃，益心通絡膠囊高、中、低劑量組以益心通絡膠囊灌胃，劑量分別為6 g/kg、3 g/kg和0.6 g/kg，連續灌胃7 d；然后觀察每組大鼠實驗性血栓情況及血清TG、TC、IL-8、CRP、TXA2、6-keto-PGF1α的變化。結果 益心通絡高劑量組、陽性對照組大鼠血栓濕重、TC、IL-8、CRP、TXA2與空白對照組相比顯著降低(P<0.05或P<0.01)，6-keto-PGF1α較空白對照組升高(P<0.05)，益心通絡膠囊低劑量組大鼠血栓濕重與空白對照組相比顯著降低(P<0.05)， 益心通絡膠囊中劑量組大鼠血栓濕重、TXA2與空白對照組相比顯著降低(P<0.05)，6-keto-PGF1α較空白對照組升高(P<0.05)。結論 益心通絡膠囊對實驗性大鼠血栓形成具有良好的抑制作用，以中、高劑量為著。益心通絡膠囊高劑量可降低大鼠血脂中TC水平，中、低劑量無作用。 益心通絡膠囊高劑量可降低血清IL-8和CRP含量，以降低CRP為顯著。益心通絡膠囊中、高劑量對TXA2和6-keto-PGF1α具有調節作用，以高劑量為著。

實驗性血栓形成；益氣通絡膠囊；血脂；白細胞介素-8；C反應蛋白；血栓素A2

益心通絡膠囊是我院多年潛心研制的中成藥，以益氣活血化痰為組方大法，不僅能改善冠脈支架術后患者胸悶、胸痛等不適癥狀，有效提高患者生活質量，而且對防治支架內再狹窄(ISA)具有確切的療效。本研究擬觀察益心通絡膠囊對大鼠血栓及血清總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、白細胞介素-8(IL-8)、C反應蛋白(CRP)、血栓素A2(TXA2)和6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的影響，為臨床使用益心通絡膠囊治療ISR提供依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物 Wistar種大鼠，體重150 g～200 g，雄性，購自山東大學醫學院實驗動物中心，動物合格證號：SCXK(魯)20090001。

1.1.2 藥品、試劑和儀器 益心通絡膠囊和復方丹參片(陽性對照藥物)由泰安市中醫院提供。三酰甘油、膽固醇試劑盒購自北京北化康泰臨床試劑有限公司；前列環素(PGI2)檢測ELISA試劑盒為南京森貝伽生物科技有限公司產品；TXA2檢測ELISA試劑盒上海博耀生物科技有限公司；CRP檢測ELISA試劑盒為上海雅吉生物科技有限公司產品。美國Unico公司UN-2102C型紫外分光光度計，壓力傳感式全自動表觀粘度型快測儀為重慶大學維多生物工程研究所生成，型號FASCO，美國BIO-RAD公司，model 680型酶標儀。

1.2 方法

1.2.1 分組和干預 選取Wistar大鼠，隨機分為空白對照組、陽性對照組及益心通絡膠囊高、中、低劑量組，每組20只大鼠，空白對照組以生理鹽水灌胃，陽性對照組以復方丹參片灌胃，劑量為150 mg/kg，益心通絡膠囊高、中、低劑量組以益心通絡膠囊灌胃，劑量分別為6 g/kg、3 g/kg和0.6 g/kg，連續灌胃7 d。

1.2.2 對大鼠實驗性血栓形成的影響 每組隨機取大鼠10只進行實驗性血栓形成檢測。檢測步驟：戊巴比妥30 mg/kg腹腔注射麻醉。背位固定，同時分離左頸外靜脈和右頸總動脈，在內徑為2 mm的聚乙烯管中放一根長7 cm的4號手術線，以肝素生理鹽水50 U/mL充滿三段相連接的聚乙烯管中，然后將該管的一端插入左頸外靜脈，再經此管的另一端準確注入肝素50 U/kg抗凝，并將該管插入右頸總動脈中，立即放開動脈夾，準確記錄血流15 min，終止血流，取出絲線稱重，并按公式計算血栓生成抑制率。抑制率(%)=(對照組血栓濕重-給藥組血栓濕重)/對照組血栓濕重×100%。

1.2.3 大鼠血清TG、TC、IL-8、CRP、TXA2、PGI2檢測 各組隨機取大鼠6只，取血清-20 ℃保存備用。大鼠血脂TG、TC檢測：取血清，嚴格按照說明書檢測，紫外分光光度計檢測。ELISA方法檢測IL-8、CRP、TXA2、6-keto-PGF1α步驟：取血清，嚴格按照說明書進行，采用酶標儀檢測。

2 結 果

2.1 大鼠一般情況 在藥物干預期間，各組大鼠飲食可，活動可，大小便可，沒有出現不良反應，未出現飲食減少，無皮膚紅腫，沒有出現死亡現象。

2.2 益心通絡膠囊對大鼠血栓形成的影響 益心通絡膠囊對實驗性血栓形成有很好的抑制作用，尤其是中、高劑量組，與空白對照組比較差異有統計學意義(P<0.01)，益心通絡膠囊低、中、高劑量組血栓抑制率分別為15.09%、25.51%、47.41%，陽性對照組也具有良好的抑制作用，抑制率與益心通絡膠囊中劑量組接近。詳見表1。

表1 益心通絡膠囊對大鼠血栓形成的影響

2.3 益心通絡膠囊對大鼠血清血脂的影響 陽性對照組和益心通絡膠囊高劑量組TC與空白對照組相比差異有統計學意義(P<0.05)，顯示益心通絡膠囊有一定的降血脂作用。詳見表2。

表2 益心通絡膠囊對大鼠血脂的影響(±s) mmol/L

2.4 益心通絡膠囊對大鼠血清IL-8、CRP含量的影響 干預后，益心通絡膠囊低、中劑量組血清IL-8和CRP含量與空白對照組比較差異無統計學意義，僅陽性對照組和益心通絡膠囊高劑量組與空白對照組比較差異有統計學意義(P<0.05或P<0.01)，詳見表3。

表3 益心通絡膠囊對大鼠血清IL-8、CRP含量的影響(x±s)

2.5 益心通絡膠囊對大鼠血清TXA2和6-keto-PGF1α含量的影響 益心通絡膠囊對TXA2和6-keto-PGF1α有很好的調節作用，尤其是高劑量組，與空白對照組比較差異有統計學意義(P<0.01)，但益心通絡膠囊低劑量組與空白對照組比較差異無統計學意義。詳見表4。

表4 益心通絡膠囊對大鼠血清TXA2和6-keto-PGF1α含量的影響(x±s)

3 討 論

冠心病是目前公認的全世界成人死亡的主要原因和致殘的重要原因。經皮腔內冠狀動脈支架植入術(PCI)作為冠心病的有效治療手段，日益得到廣泛應用。但是術后支架內再狹窄(in-stent restenosis，ISR)一直困擾著人們，據臨床統計其發生率高達10%～50%，嚴重影響了遠期療效。目前普遍認為支架內再狹窄是血管對抗損傷的一種異常修復反應，表現為血栓的形成、內皮增生、血管重塑。支架內再狹窄的發生與血栓及血清TC、IL-8、CRP、TXA2和6-keto-PGF1α等因素有關。

益心通絡膠囊由人參、丹參、瓜蔞、黃芪、川芎、半夏、茯苓、降香、枳殼、陳皮、薤白、麥冬組成，本方通補兼顧、辛散溫通、行氣血、通心脈、消痰瘀，補而不滯，通而不散，是益氣通脈化痰的良方。本實驗結果顯示，益氣通絡膠囊中、高劑量組對實驗性大鼠血栓形成具有良好的抑制作用；益氣通絡膠囊高劑量組能顯著降低實驗大鼠的血清IL-8和CRP含量，以降低CRP為顯著；益氣通絡膠囊中、高劑量組對實驗大鼠的TXA2和6-keto-PGF1α具有有效的調節作用。

現代藥理研究認為，人參中的皂甙能擴張血管，使微循環得到改善，防止血液凝固，促進纖維蛋白溶解，對紅細胞的聚集性有抑制性，改善血液的流動性；對心血管系統的作用：具有調節心臟機能，擴張血管，調整血壓以及抗休克作用。現代醫學發現丹參可阻止動脈粥樣硬化形成過程中纖溶活性的降低，延緩和阻止動脈粥樣硬化的形成。相關實驗表明，適當劑量的瓜蔞能使豚鼠離體心臟收縮力有所加強，瓜蔞皮擴張冠脈的作用與其所含類生物堿有關，而其總氨基酸可能有祛痰作用而不是擴張冠脈作用[1]。黃芪不但有擴張冠狀動脈、改善心肌血供、心肌代謝及縮小梗死面積的作用，還具有增強心肌收縮力和改善左心功能，影響血壓、降低血液黏稠度及改善血液流變學指標的作用。現代藥理學研究證實川芎具有抑制血管平滑肌細胞增殖，降低血小板黏附、聚集，防止血栓形成，保護血管內皮細胞等作用；還具有防治冠脈支架介入術后再狹窄的作用[2]。川芎水提液及其生物堿能擴張冠狀動脈和血管，增加冠脈血流量，改善心肌缺氧狀況。茯苓對心血管系統的作用主要表現在增強心肌收縮力，茯苓水浸膏還具有降血壓作用。半夏有較明顯的抗心律失常作用，其煎劑對犬室性心動過速及室性早搏有拮抗作用，另外，半夏還具有抑制心率和短暫的降壓作用[3]。

本實驗結果表明在抑制支架內狹窄形成過程中，益氣通絡膠囊不僅能抑制血栓形成，并且在一定程度上干預了內皮增生、血管重塑的過程。

[1] 上海市化工“七·二一”工人大學有機系中草藥組.栝樓的研究Ⅳ，栝樓藥理作用的初步研究[J].醫藥工業，1975(7)：17

[2] 楊雪梅．川芎嗪藥理作用研究進展[J].中國生化藥物，2010，31(3) ：215-216.

[3] 陳凌云，楊國祥.半夏藥理研究概況[J].云南中醫學院學報， 1997，20(4)：17-19.

(本文編輯 郭懷印)

山東省泰安市中醫醫院(山東泰安 271000)，E-mail：luzxy629@163.com

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10．3969/j．issn．1672-1349．2015．14．009

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