紫薇花的抗氧化活性研究

孔祥密，崔雪靖，常美芳，康文藝

河南大學中藥研究所，開封 475004

紫薇(Lagerstroemia indica L.)為千屈菜科紫薇屬落葉灌木或小喬木，廣泛分布于我國華南、華中、華東、華北和西南諸?。?］。紫薇的葉、花、根、果實、枝和皮均有藥用價值［2］。其根、皮、葉可入藥，具有清熱解毒、活血止血的功效［3］。紫薇屬化學成分主要有鞣質類、鞣花酸類、萜類、生物堿類、黃酮類、木脂素類、香豆素及蒽醌等［4］。目前，對紫薇的研究多集中于栽培管理、生理、藥用方面［5，6］，陳林等［7］采用DPPH 和FRAP 方法對大葉紫薇葉的提取物進行了抗氧化性能的研究，發現大葉紫薇葉甲醇提取物在豬肉中具有明顯的抗脂質氧化和防腐保鮮的作用。

為了進一步豐富紫薇的抗氧化活性研究，筆者采用清除二苯代苦味酰基(DPPH)自由基和［2，2＇-連氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨鹽］(ABTS)自由基方法及鐵離子還原/抗氧化力測定(FRAP)法對同月份采摘的紅花紫薇和銀薇的抗氧化活性進行了綜合考察，為進一步開發和利用紫薇提供了理論基礎。

1 儀器、材料和試劑

1.1 主要儀器

Multiskan MK3 酶標儀(美國Thermo Electron 公司);UV-2000 型紫外可見分光光度計(上海尤尼可儀器有限公司);旋轉蒸發儀(日本東京理化公司);電子天平(美國Mettler-Toledo 儀器有限公司);CS -H1 型混合器(北京博勵陽科技公司)。

1.2 材料

銀薇和紅花紫薇于2012 年7 月采自河南大學藥用植物園，經河南大學中藥研究所生藥教研室李昌勤教授鑒定為千屈菜科紫薇屬植物紫薇(Lagerstroemia indica L.)和銀薇(Lagerstroemia indica Linn.f.alba(Nichols.)Rehd)，標本存于河南大學中藥研究所。

1.3 試劑

DPPH(日本東京化成工業株式會社);［2，2＇-連氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨鹽］(ABTS，美國Fluka 公司);Fe3+-三吡啶三啞嗪(tripyridyl-triazine，TPTZ;比利時Acrosorganics 公司);6-羥基-2，5，7，8-四甲基苯并二氫吡喃-2-羧酸(Trolox，美國Aldrich 公司);二丁基羥基甲苯(BHT，比利時Acros organics 公司);其他試劑均為分析純。

2 實驗方法

2.1 活性成分的提取

自然干燥的紫薇花粉碎，70%乙醇浸泡，加熱回流2 次，每次1 h，合并、過濾、濃縮得紫薇花70%乙醇總浸膏，提取物分散于水中，依次用石油醚，乙酸乙酯，正丁醇進行萃取得各部位浸膏。

2.2 抗氧化活性的篩選

2.2.1 DPPH 方法

按照文獻［8］，在515 nm 處測定樣品及陽性對照的吸光度。每份樣品平行操作3 次，取平均值。計算清除率及半數抑制率IC50值。

上式中，Acontrol為DPPH 本身在測定波長的吸收度，Asample為樣品對DPPH 作用后的吸收度數值(除去樣品自身吸收)。

2.2.2 ABTS 方法

按照文獻［9］，在734 nm 處測定樣品及陽性對照的吸光度。每份樣品平行操作3 次，取平均值。計算清除率及半數抑制率IC50值。按照以下公式計算清除率:

式中Acontrol為ABTS 自由基本身在測定波長的吸收度，Asample為樣品對ABTS 自由基作用后的吸收度數值(除去樣品自身吸收)。

2.2.3 FRAP 法

按照文獻［10］的方法配制TPTZ 工作液，在593 nm 處測定樣品及陽性對照的吸光度，結果以Trolox當量表示。當C(Trolox)=25～400 mol/L 時，有良好的線性關系(r=0.9996)。

3 結果與分析

3.1 對DPPH 自由基的清除作用

表1 紫薇花不同提取物的抗氧化活性Table 1 Antioxidant activity of different extracts of L.indica Flower

圖1 紫薇花各部位抗氧化質量濃度對ABTS 自由基的影響Fig.1 Scavenging activities of different concentrations of L.indica flowers on ABTS free radical

3.2 對ABTS 自由基的清除作用

表1 顯示，銀薇乙酸乙酯部位清除ABTS 自由基的能力(IC50=1.8 μg/mL)最強，強于陽性對照BHT(IC50=2.3 μg/mL)。紫薇花不同提取部位對ABTS 自由基的清除能力大小順序為:銀薇乙酸乙酯部位＞BHT ＞銀薇70%乙醇總浸膏＞紅花紫薇乙酸乙酯部位＞紅花紫薇70%乙醇總浸膏＞銀薇正丁醇部位＞紅花紫薇正丁醇部位＞紅花紫薇石油醚部位＞銀薇石油醚部位。

圖1 顯示，在實驗的濃度范圍內，質量濃度在5.59 μg/mL 時，紫薇紅花石油醚部位、正丁醇部位、70%乙醇總浸膏和銀薇正丁醇部位對ABTS 自由基的清除率都較低分別為15.93%、21.21%、65.42%和54.69%。隨著其質量濃度的增加，清除率也增大。當質量濃度為47.62 μg/mL 時，紅花紫薇石油醚部位、正丁醇部位、70%乙醇總浸膏和銀薇正丁醇部位對ABTS 自由基的清除率分別增加到93.95%、98.5%、99.03%和98.58%。說明紫薇花提取物清除ABTS 自由基的能力與其質量濃度呈正量效關系，即隨著提取物用量的增加，對ABTS 自由基的清除率也增大。當質量濃度＞47.62 μg/mL 時，提取物對ABTS 自由基的清除率幾乎不變，說明抗氧化作用已接近飽和，再增加提取物的用量，清除率變化不大。

3.3 還原Fe3+的能力

表1 顯示，在紫薇花提取物中，銀薇乙酸乙酯部位和70%乙醇總浸膏還原Fe3+的能力最強(TEAC分別為2664.7 和2414.95 μmol/g)，強于陽性對照BHT(TEAC 為1532.7 μmol/g)。紫薇花提取物及陽性對照還原Fe3+能力的順序為:銀薇乙酸乙酯部位＞銀薇70%乙醇總浸膏＞BHT ＞紅花紫薇乙酸乙酯部位＞紅花紫薇70%乙醇總浸膏＞紅花紫薇正丁醇部位＞銀薇正丁醇部位＞紅花紫薇石油醚部位＞銀薇石油醚部位。

4 結論

本文采用DPPH、ABTS 和FRAP 3 種方法評價同月份紅花紫薇和銀薇的抗氧化活性，結果表明，銀薇總抗氧化活性好于紅花紫薇，其中，銀薇乙酸乙酯部位的抗氧化活性最強(IC50分別為7.4 和1.8 μg/mL，TEAC 為2664.7 μmol/g)，遠強于陽性對照BHT。紫薇花的乙酸乙酯部位抗氧化活性好于其它部位，可以作為天然抗氧化劑進行深入研究開發。

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