探析利用“自上而下”方法對8項特種蛋白指標定量檢測不確定度的評估

王雁勇，曹輝彩，蔡會欣，戴冬雪，馬雅文

(保定市第一中心醫(yī)院檢驗科，河北保定071000)

探析利用“自上而下”方法對8項特種蛋白指標定量檢測不確定度的評估

王雁勇，曹輝彩，蔡會欣，戴冬雪，馬雅文

(保定市第一中心醫(yī)院檢驗科，河北保定071000)

目的通過分析8項特種蛋白指標定量檢測不確定的評估，探析其價值與意義。方法收集本實驗室2013年4月至9月共6個月的室內(nèi)質(zhì)量控制(簡稱室內(nèi)質(zhì)控)數(shù)據(jù)及2011年至2013年6次參加衛(wèi)生部臨床檢驗中心特種蛋白室間質(zhì)量評價(簡稱室間質(zhì)評)的結(jié)果，參照《醫(yī)學(xué)實驗室——測量不確定度的評定與表達》，采用“自上而下”方法評定免疫球蛋白(Ig)A、IgG、IgM、補體C3、補體C4、抗鏈球菌溶血素O(ASO)、類風(fēng)濕因子(RF)、C反應(yīng)蛋白(CRP)的相對測量不確定度(ucrel)和相對擴展測量不確定度(urel)。結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，8項檢測指標的urel存在明顯的差異，C4的urel最大為16.01%，與美國臨床實驗室改進修正法案(CLIA'88)的允許總誤差比較，除C4外，其它7項指標均處于允許范圍之內(nèi)。結(jié)論利用室內(nèi)和室間質(zhì)控數(shù)據(jù)，采用“自上而下”方法對免疫速率散射比濁法測定特種蛋白的測量不確定度的評價，方法簡單、方便，能在進行測量不確定度評定的同時充分了解實驗室檢測系統(tǒng)分析性能，具有很好的臨床應(yīng)用價。

不確定度;評估;室內(nèi)質(zhì)量控制;室間質(zhì)量評價;特種蛋白

測量不確定度是于20世紀60年代提出[1]，直到90年代其評定和表示方式才逐步得到公認[2]。測量不確定度是表征合理地賦予被測量之值的分散性，與測量準確度為負相關(guān)[3]。它是測量結(jié)果質(zhì)量的指標。不確定度愈小，所述結(jié)果與被測量的真值愈接近，質(zhì)量越高，水平越高，其使用價值越高;不確定度越大，測量結(jié)果的質(zhì)量越低，水平越低，其使用價值也越低。在ISO17025文件中也明確提出檢測實驗室需要對結(jié)果的不確定度進行評估。

在2005年，王治國等[4]首次介紹了“自上而下”評定不確定度的方法。中國合格評定國家認可委員會(China National Accreditation Service for Conformity Assessment，CNAS)于2012年發(fā)表了以“自上而下”方法評定醫(yī)學(xué)實驗室不確定度的技術(shù)報告[5]。“自上而下”方法是在控制不確定度來源或程序的前提下評定測量不確定度，即運用統(tǒng)計學(xué)原理直接評定特定測量系統(tǒng)的受控結(jié)果的測量不確定度。典型方法是依據(jù)特定方案(正確度評估和校準方案)的試驗數(shù)據(jù)、QC數(shù)據(jù)或方法驗證試驗數(shù)據(jù)進行評定，正確度/偏移(b)和精密度/實驗室內(nèi)復(fù)現(xiàn)性[s(Rw)]是兩個主要的分量。“自上而下”方法評定測量不確定度是基于正確度和實驗室內(nèi)測量復(fù)現(xiàn)性進行測量不確定度評定的方法。對于常規(guī)醫(yī)學(xué)實驗室，“自上而下”評定測量不確定度的方法是經(jīng)濟、實用和可接受的方法。我們利用室內(nèi)質(zhì)量控制(簡稱室內(nèi)質(zhì)控)和室間質(zhì)量評價(簡稱室間質(zhì)評)數(shù)據(jù)，采用“自上而下”方法探析測量不確定度評估在8項特種蛋白指標定量檢測中的應(yīng)用。

材料和方法

一、儀器和試劑

IMMAGE 800特種蛋白分析儀及原裝試劑、校準品、質(zhì)控品由美國Beckman-Coulter公司提供。

二、數(shù)據(jù)來源

1.室內(nèi)指控數(shù)據(jù)收集本實驗室2013年4月至9月共6個月的室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)，計算其靶值、標準差(s)和變異系數(shù)。

2.室間質(zhì)控數(shù)據(jù)收集2011年至2013年6次參加衛(wèi)生部臨床檢驗中心特種蛋白室間質(zhì)評的結(jié)果，取與室內(nèi)質(zhì)控中值水平接近的公認值(Ccons)、每個參加實驗室的測量值(xi)及由全部能力驗證(proficiency testing，PT)數(shù)據(jù)得出的測量復(fù)現(xiàn)性(SR)。

三、方法

1.批內(nèi)重復(fù)性將特種蛋白的室內(nèi)質(zhì)控品重復(fù)測定20次，和臨床標本一起測定，用雙側(cè)迪克遜檢驗法(P=95%)剔除離群值，計算其均值()、標準差(s)及批內(nèi)變異系數(shù)(CVw)。

2.批間重復(fù)性統(tǒng)計2013年4月1日至9月30日6個月內(nèi)每天檢測的8項特種蛋白的室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)，利用儀器繪制的質(zhì)控圖分別計算其、s及批間變異系數(shù)(CVb)。

3.方法偏倚(CVbias)的計算根據(jù)王治國等[4]建議的方法，收集本實驗室2011年至2013年參加的衛(wèi)生部臨床檢驗中心8項特種蛋白6次室間質(zhì)評結(jié)果。根據(jù)衛(wèi)生部臨床檢驗中心提供的靶值和本實驗室的測定值，計算6次結(jié)果的百分偏差(dn%)及其均值(dm%)和標準差(sdr=，根據(jù)如下公式計算出

4.相對測量不確定度(ucrel)的計算(1)ucrel的計算公式為;(2)參照文獻[6]建議的以6次PT結(jié)果數(shù)據(jù)作為評定測量不確定度的依據(jù)，即用PT數(shù)據(jù)作為由偏移引入的不確定度進行合成并進行計算，為此Nordtest提出一個新的術(shù)語“方法和實驗室偏移”，符號為RMSbias。RMSrel(bias)=，公式中bias為單次PT的偏移量值，n為PT次數(shù)。urel(Cref)，其中urel(cons，i)=，式中RSDR，i為單次PT的相對測量復(fù)現(xiàn)性;m為參加單次PT的實驗室數(shù)量。ucrel(bias)為偏移引入的相對測量不確定度分量，計算公式為。(3)實驗室內(nèi)測量復(fù)現(xiàn)性引入的相對測量不確定度分量urel(Rw)，計算公式為urel(Rw)=[s(Rw)/||]×100%，其中urel(Rw)=RSD(Rw);s(Rw)= u(Rw)。s(Rw)和RSD(Rw)分別為室內(nèi)質(zhì)控的標準差和變異系數(shù)。

5.相對擴展測量不確定度(urel)的計算對于95%的置信水平，包含因子k=2，urel=2×ucrel。

結(jié)果

一、8項特種蛋白室內(nèi)質(zhì)控的CVw和CVb見表1。

表1 8項特種蛋白室內(nèi)質(zhì)控的CVw和CVb結(jié)果

二、偏倚計算

以IgA為例，選擇與室內(nèi)質(zhì)控最接近的值計算其偏倚，結(jié)果見表2。以同樣的方法計算其它項目的偏倚。

表2 IgA室間質(zhì)評信息

三、8項指標測量不確定度結(jié)果

以美國臨床實驗室改進修正案(CLIA'88)允許總誤差(TEa)為質(zhì)量目標，7項特種蛋白指標的不確定度均符合目標不確定度要求，外體C4不符合目標不確定度要求，見表3。

表3 8項特種蛋白指標測量不確定度結(jié)果

討論

誤差多數(shù)情況下是指測量誤差，它的傳統(tǒng)定義是測量結(jié)果與被測量真值之差。誤差是客觀存在的，它應(yīng)該是一個確定的值。但由于在絕大多數(shù)情況下，真值是不知道的，所以真誤差也無法準確知道。我們只是在特定的條件下尋求最佳的真值近似值，并稱之為約定真值。因此可能確定的誤差只是其估計值。經(jīng)典的誤差理論并不完全適用于醫(yī)學(xué)檢驗的實際工作，并具有一定的不確定度。測量不確定度是目前對于誤差分析最新的理解和闡述，是誤差理論發(fā)展到一定程度的產(chǎn)物。測量不確定度無須對隨機和系統(tǒng)誤差進行分類，提供了一種包括測量真值在內(nèi)的一組測量結(jié)果范圍，表征被測量值的分散性，使檢驗結(jié)果質(zhì)量的衡量成為可能，可行性更高，是與測量水平密切相關(guān)的參數(shù)。楊振華[7]認為可以考慮將經(jīng)驗方法評定測量不確定度應(yīng)用到臨床化學(xué)實驗室。張曉紅等[8-9]依據(jù)Nordtest準則，利用室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評數(shù)據(jù)評估臨床生化檢驗中的測量不確定度。CNAS的技術(shù)報告也對Nordtest準則建議方法進行了詳盡的說明。

本研究利用室內(nèi)和室間數(shù)據(jù)對8項特種蛋白指標的不確定度進行了評估。結(jié)果顯示，7項特種蛋白指標的不確定度均符合目標不確定度要求，外體C4不符合目標不確定度要求。分析其原因，外體C4不精密度和偏倚對合成不確定度的構(gòu)成比分別為59.4%和70.4%。提示引起測量不確定度高的主要原因在于正確度較差，可以通過提高檢測項目的準確性來降低RMSbias，減小其擴展不確定度。由此可見，不同的檢測項目若要改進其擴展不確定度，需對分量貢獻的大小進行質(zhì)量改進。

本研究利用室內(nèi)和室間質(zhì)控數(shù)據(jù)對免疫速率散射比濁法檢測8項特種蛋白指標的測量不確定度。在評估過程中我們發(fā)現(xiàn)，因為使用了6個月的室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)和3年6次室間質(zhì)控數(shù)據(jù)對各項指標的不確定度進行評定，所以能更真實地反映實驗室每日檢測的不確定度情況，最大化地找出不確定度潛在來源的概率。

綜上所述，我們通過評估8項特種蛋白指標的不確定度，發(fā)現(xiàn)了影響擴展不確定度的主要因素，為改善臨床檢測質(zhì)量提供科學(xué)的依據(jù)，確保檢測結(jié)果的準確性。

[1]International Organization for Standardization.Guide to the expression of uncertainty in measurement[S].ISO，1995.

[2]KRISTIANSEN J.The guide to expression of uncertainty in measurement approach for estimating uncertainty:an appraisal[J].Clin Chem，2003，49 (11):1822-1829.

[3]FUENTEN-ARDERIU X.Uncertainty of measurement in clinical laboratory sciences[J].Clin Chem，2000，46(9):1437-1438.

[4]王治國，王薇，李小鵬.測量不確定度及其在臨床檢驗中應(yīng)用[J].中國衛(wèi)生統(tǒng)計，2005，22(2):85-86.

[5]中國合格評定國家認可委員會.醫(yī)學(xué)實驗室-測量不確定度的評定與表達[S].2012.

[6]Nordtest.Handbook for calculation of measurement uncertainty in environmental laboratories[R].Espoo: Nordtest，2011.

[7]楊振華.用“經(jīng)驗辦法”評定測量不確定度[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2011，34(3):278-230.

[8]張曉紅，魯辛辛.依據(jù)Nordtest準則評估測量不確定度更適合于臨床實驗室[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2012，35(5):404-406.

[9]張曉紅，劉向煒，文江平，等.利用“室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評”數(shù)據(jù)評估臨床生化檢驗中的測量不確定度[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2012，35(5):457-462.

1673-8640(2015)07-0747-03

R446.1

A

10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.018

2014-12-26)

(本文編輯:龔曉霖)

王雁勇，1970年生，男，學(xué)士，副主任技師，從事臨床生化、微生物檢驗工作。

蔡會欣，聯(lián)系電話:0312-5976674。