賽科希德SF-8000凝血測試系統(tǒng)性能評價

吳啟嬌，童毅，曹麗琰，楊德琴，徐君全，常俊，范林霞

(昆明學院醫(yī)學院，云南昆明650214)

賽科希德SF-8000凝血測試系統(tǒng)性能評價

吳啟嬌，童毅，曹麗琰，楊德琴，徐君全，常俊，范林霞

(昆明學院醫(yī)學院，云南昆明650214)

目的對國產(chǎn)賽科希德SF-8000凝血測試系統(tǒng)(簡稱SF-8000)進行性能評價。方法對SF-8000的精密度、準確度、線性、可比性等基本性能進行評價。將200 g/L血紅蛋白液以1∶200、2∶200、3∶200、4∶200、5∶200比例分別加入到12例新鮮血漿中，獲得實驗血漿，與原血漿及鹽水稀釋對照血漿凝血結(jié)果進行比較;對15例氣泡標本與對照標本進行配對t檢驗，比較檢測參數(shù)有無差異;對12例新鮮標本應用新鮮復溶試劑及冷藏24 h試劑分別進行檢測，比較測定結(jié)果的差異;分別對13例冷藏4 h及24 h標本與新鮮標本進行配對t檢驗，比較測定結(jié)果的差異。結(jié)果儀器各項基本性能均符合廠家要求。溶血及氣泡會不同程度影響凝血4項的檢測，當血紅蛋白濃度達到1～1.5 g/L時，活化部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶原時間(PT)結(jié)果與原血漿組產(chǎn)生差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，達到4 g/L時與對照血漿組差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);試劑復溶24 h后除APTT試劑外(P＜0.01)，其它項目試劑與新復溶試劑檢測結(jié)果無明顯差異，穩(wěn)定性良好;標本放置4 h不會導致結(jié)果出現(xiàn)明顯差異，但放置24 h后，APTT、PT、纖維蛋白原(FIB)結(jié)果差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。結(jié)論SF-8000凝血測試系統(tǒng)實驗性能符合國家、行業(yè)標準。應嚴格按照使用手冊操作，避免干擾因素出現(xiàn)，以保證結(jié)果的臨床適用性。

SF-8000凝血測試系統(tǒng);性能評價;干擾因素

長期以來，由于國內(nèi)醫(yī)療器械技術(shù)水平與國外差異懸殊，且國內(nèi)醫(yī)院也不認可，所以我國高端醫(yī)療設備市場被進口產(chǎn)品所壟斷。近日，國家衛(wèi)生與計劃生育委員會啟動第1批優(yōu)秀國產(chǎn)醫(yī)療設備產(chǎn)品遴選工作［1］。這意味著在推進我國醫(yī)療制度的改革過程中，推進國產(chǎn)醫(yī)療設備發(fā)展應用，降低醫(yī)療成本，也是非常重要的一環(huán)。基于這樣的國產(chǎn)醫(yī)械發(fā)展背景，我們對國產(chǎn)賽科希德SF-8000凝血測試系統(tǒng)(簡稱SF-8000)的性能進行了系統(tǒng)評測，旨在客觀的評價其實驗室應用的可接受性及為產(chǎn)品今后技術(shù)升級的方向提出些許建議。

材料和方法

一、儀器

SF-8000和法國STAGO-STA全自動血凝儀(簡稱STAGO-STA)。

二、試劑

SF-8000配套2 mL活化部分凝血活酶時間(activated partial thromboplastin time，APTT)、凝血酶原時間(prothrombin time，PT)、凝血酶時間(thrombin time，TT)、纖維蛋白原(fibrinogen，F(xiàn)IB)測定試劑和STAGO-STA原裝試劑。

三、標本

某高校醫(yī)學生志愿者靜脈血，109 mmol/L枸櫞酸鈉抗凝，2500×g離心15 min;賽科希德Ⅰ、Ⅱ水平質(zhì)控血漿用于日間精密度及準確度測定。

四、方法

1.批內(nèi)精密度分析將3份高、中、低值標本各連續(xù)測定20次APTT、PT、TT、FIB，計算各參數(shù)的變異系數(shù)(CV)值。

2.日間精密度及準確性分析將同批次賽科希德水平Ⅰ、Ⅱ質(zhì)控血漿(批號D124B001-1、D112C002-2)連續(xù)測定10 d，每天測定2次，2次測定間隔4～6 h，求各參數(shù)的CV值;并同時進行單樣本t檢驗，檢驗待評價的檢測系統(tǒng)測定值與標定值是否存在差異，從而評價其準確性。

3.線性分析針對SF-8000的特點，進行FIB的線性相關度及線性范圍的檢測，將3 g/L定值血漿用咪唑緩沖液做1∶5、1∶10、1∶20、1∶30稀釋，應用線性回歸檢測其線性相關性。

4.可比性分析將32份正常及異常標本、質(zhì)控血漿分別用SF-8000和STAGO-STA測定APTT、PT［國際標準化比值(international normalization ratio，INR)］、TT和FIB，最后分別進行各參數(shù)2個組之間的相關性分析。

5.攜帶污染率實驗采用Bioughton法［2］測定，即高低2個含量的血漿，先測定高值樣品3次(H1、H2、H3)，隨時測定低值樣品3次(L1、L2、L3)。攜帶污染率=(L1-L3)/(H3-L3)× 100%，本研究主要對1組標本進行了APTT、PT、TT、FIB的攜帶污染率抽樣實驗。

6.干擾實驗本研究主要考查了溶血與氣泡對凝血4項測定的影響。用洗滌壓積紅細胞凍融溶血，離心去除細胞碎片，制作成(200± 2)g/L的血紅蛋白液，以0∶200、1∶200、2∶200、3∶200、4∶200、5∶200、6∶200梯度比例加入到血漿中，對照血漿用生理鹽水作相同稀釋，分別進行凝血4項的測定;用2 μL加樣槍反復吹吸，獲取(2.0±0.5)mm氣泡層，從而得到氣泡血漿，與原血漿采用1∶1配對，分別測定凝血4項參數(shù)，最后用配對t檢驗分析溶血及氣泡對檢測結(jié)果的干擾。

7、試劑復溶冷藏時間影響分析分別使用復溶0 h及復溶24 h冷藏試劑同時對12份標本進行APTT、PT、TT、FIB測定，應用配對t檢驗分析2個組之間有無差異。

8、標本放置時間影響分析分別對同一標本在采集后0 h及冷藏4、24 h后進行APTT、PT、TT、FIB測定，應用配對t檢驗分別分析標本冷藏4 h和24 h后結(jié)果有無差異。

五、統(tǒng)計學方法

結(jié)果

一、批內(nèi)精密度及日間精密度分析

SF-8000日間精密度略高于批內(nèi)精密度，與廠家提供的CV范圍吻合，即正常樣本FIB≤5.0%，其余3項均≤3.0%;異常樣本FIB≤10.0%，其余3項均≤5.0%，同時也符合美國臨床實驗室標準化委員會(the National Committee for Clinical Laboratory Standards，NCCLS)EP5-A2文件［3］的要求。見表1、表2。

二、準確性分析

SF-8000檢測水平Ⅰ質(zhì)控血漿PT、APTT、FIB的結(jié)果與質(zhì)控品靶值進行比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P均＜0.05)，但偏倚均＜±10%(SF-8000產(chǎn)品使用手冊要求)。而水平Ⅰ質(zhì)控血漿TT及水平Ⅱ質(zhì)控血漿各指標的檢測結(jié)果與靶值比較差異均無統(tǒng)計學意義(P均＞0.05)。因此，可認為SF-8000的準確度符合要求。見表3。

表1 批內(nèi)精密度

三、線性分析

FIB濃度在0.88～5.98 g/L之間有良好的線性相關(P=0.000)，回歸方程為Y=-0.66+ 1.011X，線性系數(shù)=1.011，在廠家要求的范圍(1.00±0.02)內(nèi)，同時線性范圍與廠家說明的0.8～8.0 g/L符合，能滿足大多數(shù)臨床標本的檢測線性范圍。

表2 日間精密度

四、可比性分析

采用SF-8000和STAGO-STA同時測定32份正常及異常標本。結(jié)果顯示2個檢測系統(tǒng)PT、APTT、TT、FIB測定結(jié)果的相關性良好［相關系數(shù)(r)分別為0.911、0.962、0.844、0.887，P均= 0.00］，TT、FIB項目的r值略低。見表4。

五、攜帶污染率

本研究中PT、APTT、TT 3項參數(shù)時間延長定為低值樣品，時間正常為高值樣品，F(xiàn)IB濃度高者為高值樣品，反之為低值樣品。SF-8000攜帶污染率＜±5%，符合廠家的要求。見表5。

表3 SF-8000的準確性

表4 SF-8000與STAGO-STA的相關性分析

表5 SF-8000的攜帶污染率分析

六、干擾實驗

隨著血紅蛋白加入量的增加，干擾越來越明顯，特別是對PT、APTT測定的影響更為顯著。溶血血漿血紅蛋白濃度為1.0～1.5 g/L時，測定結(jié)果與原血漿結(jié)果的差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，血紅蛋白濃度達到4 g/L時與鹽水稀釋血漿對照組差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。將200 g/L血紅蛋白以1∶50～1∶40比例加入血漿時，儀器在2項以上測定中無法獲得結(jié)果(即結(jié)果＞100或顯示＞max)。由此可見，SF-8000有一定的抗溶血干擾能力，但對于特殊的重度溶血標本應注意結(jié)果的偏倚。

氣泡血漿在PT、APTT、TT項目的檢測上與對照組有明顯差異(P＜0.05)。說明吸入氣泡對檢測結(jié)果有明顯干擾，應注意避免。

七、SF-8000配套試劑復溶冷藏時間對檢測的影響

SF-8000配套試劑說明書上聲明試劑復溶后在2～8℃條件下可穩(wěn)定5～30 d。本研究采用復溶后4℃冷藏24 h的試劑測定新鮮標本的PT、APTT、TT和FIB，其中APTT結(jié)果與新鮮復溶試劑測定結(jié)果比較有明顯差異(P=0.00)，其余3項未出現(xiàn)差異，見表8。由此可見，APTT試劑在冷藏24 h后質(zhì)量出現(xiàn)異常，會干擾到標本測定。

八、標本放置時間對檢測的影響

SF-8000配套試劑說明書上聲明標本應在4 h內(nèi)進行檢測。本研究中標本放置4 h后凝血4項檢測結(jié)果與新鮮標本檢測結(jié)果比較無明顯差異(P＞0.05)，而標本冷藏24 h再進行PT、APTT測定，檢測結(jié)果出現(xiàn)明顯變化。

表6 溶血干擾實驗結(jié)果

表7 氣泡干擾實驗結(jié)果

表8 新鮮復溶試劑與復溶后冷藏24 h試劑測定結(jié)果比較

表9 放置4 h、冷藏24 h與0 h標本的測定結(jié)果比較

討論

SF-8000主要檢測的參數(shù)為APTT、PT［凝血酶原比率(prothrombin rate，PTR)、INR］、TT、FIB值，其主要在民營、社區(qū)等一級醫(yī)院應用較為廣泛。本研究對SF-8000的精密度、準確度、線性范圍、與同類儀器相關性、攜帶污染率、干擾因素等方面進行了系統(tǒng)測評。總體來看，該檢測系統(tǒng)性能符合實驗室的診斷要求，與同類型進口血凝儀有良好的相關性。且該型儀器操作方便，設計合理，安裝條件不苛刻，非常適用于一、二級醫(yī)院的診斷需求。

SF-8000的檢測原理為凝固磁珠法，判斷方法為渦流感應，不易受特異性血漿的干擾［4］。因此本研究未對高脂及黃疸標本進行干擾檢測。SF-8000采用一次性檢測杯，可減少攜帶污染，提高準確度。SF-8000的FIB參數(shù)使用Clauss法測定。該方法為NCCLS推薦的臨床實驗室測定FIB的常規(guī)方法，能真實反映人體內(nèi)具有凝血功能的FIB水平［5］。SF-8000的線性范圍能滿足各級醫(yī)院的診斷需求，若超出線性范圍應按說明對標本進行稀釋后再測定。

在使用SF-8000時應注意產(chǎn)品使用手冊中明確提到的主要干擾因素，如溶血、血小板聚集及吸入氣泡。應嚴格按照操作說明進行操作。對于溶血標本對測定結(jié)果的干擾，從本研究結(jié)果來看，有部分因素來源于血紅蛋白液對血漿標本的稀釋作用，這與光學法溶血、黃疸、高脂等特異性標本能改變樣品的透射或散射濁度的成因是不同的［4］。氣泡在雙磁路磁珠法中一般不會嚴重影響測定結(jié)果［4］，但在本研究中其仍是影響結(jié)果的一項重要因素。分析原因可能是由于本研究使用的是低規(guī)格樣品吸入模式，吸入的氣泡較易造成標本吸入量誤差［5］。

綜上所述，在操作中應嚴格進行分析前質(zhì)量控制工作，保證標本采集合格。同時應注意試劑復溶后及時使用，中間運輸、轉(zhuǎn)運等因素會導致復溶后的試劑實際使用時間縮短。對于標本而言，采集后也應及時進行測定，應避免長時間收集標本后統(tǒng)一上機檢測。另外，由于各實驗室條件不一，當正常實驗對象測定值不在95%參考區(qū)間內(nèi)，建議建立自己實驗室的參考區(qū)間［6］。通過本次評測，希望相關醫(yī)療同行能客觀看待國產(chǎn)醫(yī)療器械，并也希望民族品牌在我國的醫(yī)療行業(yè)中能不斷壯大、繁榮。

［1］中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會.國家衛(wèi)生計生委、工業(yè)和信息化部聯(lián)合召開推進國產(chǎn)醫(yī)療設備發(fā)展應用會議［EB/OL］.(2014-08-18)［2014-09-30］.http://www.nhfpc.gov.cn/ guihuaxxs/s3586/201408/71ce8bb4267 c4578a2ce 169a72bf4c60.shtml.

［2］International Committee for Standardization in Haematology and International Committee on Thrombosis and Haemostasis.ICSH/ICTH recommendation for reporting prothrombin time in oral anticoagulant control［J］.J Clin Pathol，1985，38 (7):133-134.

［3］National Committee for Clinical Laboratory Standards.Evaluation of precision performance of quantitative measurement methds［S］.EP5-A2，NCCLS，2004.

［4］曾照芳，洪秀華.臨床檢驗儀器［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2010:223.

［5］陸玉靜，馬駿龍，叢玉隆.UF-100分析儀檢測結(jié)果偏低原因與故障排除［J］.江西醫(yī)學檢驗，2007，25 (6):631.

［6］陳曉蓓.ACL-TOP全自動血凝儀纖維蛋白原測定方法學評價［J］.檢驗醫(yī)學，2012，27(12):1021-1023.

［7］馮厚梅，孫德華，鄭磊，等.Sysmex CA 7000全自動凝血儀性能評價［J］.檢驗醫(yī)學，2011，26(1):58-62.

Performance evaluation of SUCCEEDER SF-8000 coagu lation testing system

WU Qijiao，TONG Yi，CAO Liyan，YANG Deqin，XU Junquan，CHANG Jun，F(xiàn)AN Linxia.(The Medical College of Kunming University，Yunnan Kunming 650214，China)

ObjectiveTo evaluate the performance of domestic SUCCEEDER SF-8000 coagulation testing system (SF-8000).MethodsThe precision，accuracy，linearity，comparability and so on of SF-8000 were evaluated.The 200 g/L hemoglobin solution was added to 12 cases of fresh plasma in the proportions of 1∶200，2∶200，3∶200，4∶200 and 5∶200，and the experimental plasma was prepared.The differences of the results in the experimental plasma，the original plasma and the brine-diluted control plasma were analyzed.The differences of 15 cases of bubble specimens and control specimens＇results were analyzed by pairedt-test.The 12 fresh specimens were measured with fresh dissolvedreagents and 24h-refrigerated reagents separately，and the differences of the 2 sets of results were analyzed.A total of 13 cases of 4h-refrigerated specimens，24h-refrigerated specimens and fresh specimens were measured，and the differences were analyzed.ResultsThe basic properties of the instrument were all in accordance with the requirements of manufacturers.Hemolysis and bubbles affected the results of SF-8000 in different levels.When hemoglobin concentration reached 1-1.5 g/L，the results of activated partial thromboplastin time(APTT)and prothrombin time(PT) had significantly statistical differences from those of the original plasma group(P＜0.01)，when it reached 4 g/L，they had statistically significant differences from the control plasma group(P＜0.01).In addition to the reagent of APTT (P＜0.01)，the results of 24 h-refrigerated reagents and fresh refrigerated reagents had no statistical differences with good stability.The results of 4h-refrigerated specimens and fresh specimens had no statistical difference，but the results of 24 h-refrigerated specimens and fresh specimens in APTT，PT and fibrinogen(FIB)had statistical significance(P＜0.01).ConclusionsThe performance of SF-8000 meets the national and industrial standards.The manual operation should be strictly carried out to avoid appearing confounding factors，in order to ensure the results with clinical applicability.

SF-8000 coagulation testing system;Performance evaluation;Confounding factor

1673-8640(2015)09-0921-05

R446.11

A

10.3969/j.issn.1673-8640.2015.09.013

2014-09-30)

(本文編輯:范基農(nóng))

昆明學院大學生科研項目(DXS14057)

吳啟嬌，女，1992年生，主要從事血液學檢驗工作。

曹麗琰，聯(lián)系電話:087-65098540。