利奈唑胺注射液含量測定方法驗證

張婷

【摘 要】 目的：考察利奈唑胺注射液的含量檢驗方法是否能準確、可靠，并獲得客觀實際的數據或結果。方法：按照利奈唑胺注射液質量標準及中國藥典的要求對利奈唑胺注射液含量檢驗方法進行驗證，本次驗證的項目包括系統適用性、專屬性、線性、準確度、重復性及范圍、耐用性。結論：從分析的結果看，使用高效液相色譜法檢測利奈唑胺注射液的含量具有很高的準確性，值得推廣。

【關鍵詞】 利奈唑胺注射液；方法學考察；含量測定

【中圖分類號】R927 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2014）24-0017-02

利奈唑胺為惡唑烷酮類的合成抗生素，利奈唑胺注射液用于治療由特定微生物敏感株引起的下列感染：耐萬古霉素的屎腸球菌引起的感染，包括并發的菌血癥；獲得性肺炎，致病菌為金黃色葡萄球菌（甲氧西林敏感或耐甲氧西林的菌株）或肺炎鏈球菌（包括多藥耐藥的菌株MDRSP）；復雜性皮膚和皮膚軟組織感染，包括未并發骨髓炎的糖尿病足部感染，由金黃色葡萄球菌（甲氧西林敏感或耐甲氧西林的菌株）、化膿鏈球菌或無乳鏈球菌引起[1-2]。因注射劑質量標準的嚴格要求，需按照規定的標準對其含量測定方法進行驗證。

1 儀器與材料

11 儀器 高效液相色譜儀、容量瓶、電子天平、移液管。

12 試藥與試劑 利奈唑胺對照品；利奈唑胺注射液；三氟乙酸；乙腈、正己烷、異丙醇為色譜純。

2 方法與結果

21 方法[3] 用十八烷基鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；流動相A為三氟醋酸水溶液（取10%三氟醋酸溶液10ml加入到1000ml水中），流動相B為三氟醋酸乙腈溶液（取10%三氟醋酸溶液10ml加入到1000ml乙腈中），按表1進行線性梯度洗脫；檢測波長為254nm。精密量取本品5ml，置100ml量瓶中，加10%乙腈溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取利奈唑胺對照品10mg，精密稱定，用10%乙腈溶液制成每1ml中約含利奈唑胺01mg的溶液，作為對照品溶液，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得。

22 結果

221 系統適用性試驗 取系統適應性溶液10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。出峰順序依次為5-羥甲基糠醛、雜質A、Z4d、雜質B和利奈唑胺，利奈唑胺與相鄰雜質峰的分離度符合要求。

222 方法專屬性 精密量取溶劑、空白輔料溶液、對照品溶液、樣品溶液10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；要求溶劑、空白輔料不干擾利奈唑胺含量的測定，供試品溶液主峰的保留時間應與利奈唑胺對照品一致。實驗結果見表2。

表2 專屬性實驗結果

專屬性標準要求試驗結果

溶劑溶劑在利奈唑胺及其雜質峰位置應無干擾空白溶劑在利奈唑胺及其雜質峰位置無干擾

空白輔料空白輔料在利奈唑胺及其雜質峰位置應無干擾空白輔料在利奈唑胺及其雜質峰位置無干擾

利奈唑胺對照品——

利奈唑胺注射液各雜質與主峰應分離良好各雜質與主峰的分離度符合要求

結論檢驗方法的專屬性符合要求

223 線性 精密稱取利奈唑胺對照品005064g，置50ml容量瓶中，加10%乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液。分別精密量取對照品貯備液25、40、50、60、75ml置50ml量瓶中，加10%乙腈稀釋至刻度，搖勻，配制成濃度分別為50、80、100、120、150μg/ml的溶液，相當于供試品含量測定濃度線性范圍的50%～150%的溶液。實驗結果見表3。

結論：樣品峰面積與濃度的相關系數均大于0999；樣品峰面積與濃度作圖為一條直線。

224 精密度 精密稱取利奈唑胺對照品010048g，置100ml量瓶中，加10%乙腈超聲溶解并定容搖勻，作為對照品貯備液；稱取與處方量相應比例的輔料，置50ml容量瓶中，然后分別加入對照品貯備液40、50、60ml（每個濃度制備三份），加10%乙腈溶液適量，超聲并稀釋至刻度，搖勻，過濾，作為供試品溶液（相當于含量測試濃度的80%，100%，120%）。精密量取對照品貯備液50ml置50ml量瓶中，用10%乙腈稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。分別精密量取上述供試品溶液和對照品溶液各10μl注入色譜儀，記錄色譜圖。實驗結果見表4。[FL）]

225 重復性及范圍 取本品同一批樣品9份，（約相當于含量供試品濃度的80%，100%，120%各3份），依含量測定方法進行測定。

226 耐用性 取含量測定項下的對照品溶液和供試品溶液置容量瓶中，室溫放置，分別于0、2、4、8、24h取樣，按上述色譜條件進樣10μl，記錄色譜圖。結果見表6。

3 討論

通過系統適用性試驗、方法專屬性、線性、準確度、重復性及范圍和耐用性等六個方面對利奈唑胺注射液含量測定方法進行了研究。從驗證結果來看，利奈唑胺與相鄰雜質峰的分離度符合要求，檢驗方法的專屬性良好。在50～150μg/ml濃度范圍內呈良好線性關系（r=09999），在測試濃度的80%～120%范圍內平均回收率為100%，基本完全回收。樣品溶液在室溫條件下放置24h穩定。綜上證明：在我們的實驗室條件下能達到方法規定的系統適用性要求；該方法對我公司生產的利奈唑胺注射液產品含量檢測具有良好的專屬性；我們實驗條件下的能滿足檢測要求，對產品質量進行控制。

參考文獻

[1] 王建國，陳建.臨床治療中利奈唑胺的藥效學和藥動學研究進展[J].中國抗生素雜志，2013，38（10）：730-736.

[2] 崔向麗，趙志剛.新型噁唑烷酮類抗生素利奈唑胺[J].中國新藥雜志，2008，17（6）：530-533.

[3] 蔡劍秋.中華人民共和國藥典[M].北京：化學工業出版社，1995.

【摘 要】 目的：考察利奈唑胺注射液的含量檢驗方法是否能準確、可靠，并獲得客觀實際的數據或結果。方法：按照利奈唑胺注射液質量標準及中國藥典的要求對利奈唑胺注射液含量檢驗方法進行驗證，本次驗證的項目包括系統適用性、專屬性、線性、準確度、重復性及范圍、耐用性。結論：從分析的結果看，使用高效液相色譜法檢測利奈唑胺注射液的含量具有很高的準確性，值得推廣。

【關鍵詞】 利奈唑胺注射液；方法學考察；含量測定

【中圖分類號】R927 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2014）24-0017-02

利奈唑胺為惡唑烷酮類的合成抗生素，利奈唑胺注射液用于治療由特定微生物敏感株引起的下列感染：耐萬古霉素的屎腸球菌引起的感染，包括并發的菌血癥；獲得性肺炎，致病菌為金黃色葡萄球菌（甲氧西林敏感或耐甲氧西林的菌株）或肺炎鏈球菌（包括多藥耐藥的菌株MDRSP）；復雜性皮膚和皮膚軟組織感染，包括未并發骨髓炎的糖尿病足部感染，由金黃色葡萄球菌（甲氧西林敏感或耐甲氧西林的菌株）、化膿鏈球菌或無乳鏈球菌引起[1-2]。因注射劑質量標準的嚴格要求，需按照規定的標準對其含量測定方法進行驗證。

1 儀器與材料

11 儀器 高效液相色譜儀、容量瓶、電子天平、移液管。

12 試藥與試劑 利奈唑胺對照品；利奈唑胺注射液；三氟乙酸；乙腈、正己烷、異丙醇為色譜純。

2 方法與結果

21 方法[3] 用十八烷基鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；流動相A為三氟醋酸水溶液（取10%三氟醋酸溶液10ml加入到1000ml水中），流動相B為三氟醋酸乙腈溶液（取10%三氟醋酸溶液10ml加入到1000ml乙腈中），按表1進行線性梯度洗脫；檢測波長為254nm。精密量取本品5ml，置100ml量瓶中，加10%乙腈溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取利奈唑胺對照品10mg，精密稱定，用10%乙腈溶液制成每1ml中約含利奈唑胺01mg的溶液，作為對照品溶液，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得。

22 結果

221 系統適用性試驗 取系統適應性溶液10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。出峰順序依次為5-羥甲基糠醛、雜質A、Z4d、雜質B和利奈唑胺，利奈唑胺與相鄰雜質峰的分離度符合要求。

222 方法專屬性 精密量取溶劑、空白輔料溶液、對照品溶液、樣品溶液10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；要求溶劑、空白輔料不干擾利奈唑胺含量的測定，供試品溶液主峰的保留時間應與利奈唑胺對照品一致。實驗結果見表2。

表2 專屬性實驗結果

專屬性標準要求試驗結果

溶劑溶劑在利奈唑胺及其雜質峰位置應無干擾空白溶劑在利奈唑胺及其雜質峰位置無干擾

空白輔料空白輔料在利奈唑胺及其雜質峰位置應無干擾空白輔料在利奈唑胺及其雜質峰位置無干擾

利奈唑胺對照品——

利奈唑胺注射液各雜質與主峰應分離良好各雜質與主峰的分離度符合要求

結論檢驗方法的專屬性符合要求

223 線性 精密稱取利奈唑胺對照品005064g，置50ml容量瓶中，加10%乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液。分別精密量取對照品貯備液25、40、50、60、75ml置50ml量瓶中，加10%乙腈稀釋至刻度，搖勻，配制成濃度分別為50、80、100、120、150μg/ml的溶液，相當于供試品含量測定濃度線性范圍的50%～150%的溶液。實驗結果見表3。

結論：樣品峰面積與濃度的相關系數均大于0999；樣品峰面積與濃度作圖為一條直線。

224 精密度 精密稱取利奈唑胺對照品010048g，置100ml量瓶中，加10%乙腈超聲溶解并定容搖勻，作為對照品貯備液；稱取與處方量相應比例的輔料，置50ml容量瓶中，然后分別加入對照品貯備液40、50、60ml（每個濃度制備三份），加10%乙腈溶液適量，超聲并稀釋至刻度，搖勻，過濾，作為供試品溶液（相當于含量測試濃度的80%，100%，120%）。精密量取對照品貯備液50ml置50ml量瓶中，用10%乙腈稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。分別精密量取上述供試品溶液和對照品溶液各10μl注入色譜儀，記錄色譜圖。實驗結果見表4。[FL）]

225 重復性及范圍 取本品同一批樣品9份，（約相當于含量供試品濃度的80%，100%，120%各3份），依含量測定方法進行測定。

226 耐用性 取含量測定項下的對照品溶液和供試品溶液置容量瓶中，室溫放置，分別于0、2、4、8、24h取樣，按上述色譜條件進樣10μl，記錄色譜圖。結果見表6。

3 討論

通過系統適用性試驗、方法專屬性、線性、準確度、重復性及范圍和耐用性等六個方面對利奈唑胺注射液含量測定方法進行了研究。從驗證結果來看，利奈唑胺與相鄰雜質峰的分離度符合要求，檢驗方法的專屬性良好。在50～150μg/ml濃度范圍內呈良好線性關系（r=09999），在測試濃度的80%～120%范圍內平均回收率為100%，基本完全回收。樣品溶液在室溫條件下放置24h穩定。綜上證明：在我們的實驗室條件下能達到方法規定的系統適用性要求；該方法對我公司生產的利奈唑胺注射液產品含量檢測具有良好的專屬性；我們實驗條件下的能滿足檢測要求，對產品質量進行控制。

參考文獻

[1] 王建國，陳建.臨床治療中利奈唑胺的藥效學和藥動學研究進展[J].中國抗生素雜志，2013，38（10）：730-736.

[2] 崔向麗，趙志剛.新型噁唑烷酮類抗生素利奈唑胺[J].中國新藥雜志，2008，17（6）：530-533.

[3] 蔡劍秋.中華人民共和國藥典[M].北京：化學工業出版社，1995.

【摘 要】 目的：考察利奈唑胺注射液的含量檢驗方法是否能準確、可靠，并獲得客觀實際的數據或結果。方法：按照利奈唑胺注射液質量標準及中國藥典的要求對利奈唑胺注射液含量檢驗方法進行驗證，本次驗證的項目包括系統適用性、專屬性、線性、準確度、重復性及范圍、耐用性。結論：從分析的結果看，使用高效液相色譜法檢測利奈唑胺注射液的含量具有很高的準確性，值得推廣。

【關鍵詞】 利奈唑胺注射液；方法學考察；含量測定

【中圖分類號】R927 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2014）24-0017-02

利奈唑胺為惡唑烷酮類的合成抗生素，利奈唑胺注射液用于治療由特定微生物敏感株引起的下列感染：耐萬古霉素的屎腸球菌引起的感染，包括并發的菌血癥；獲得性肺炎，致病菌為金黃色葡萄球菌（甲氧西林敏感或耐甲氧西林的菌株）或肺炎鏈球菌（包括多藥耐藥的菌株MDRSP）；復雜性皮膚和皮膚軟組織感染，包括未并發骨髓炎的糖尿病足部感染，由金黃色葡萄球菌（甲氧西林敏感或耐甲氧西林的菌株）、化膿鏈球菌或無乳鏈球菌引起[1-2]。因注射劑質量標準的嚴格要求，需按照規定的標準對其含量測定方法進行驗證。

1 儀器與材料

11 儀器 高效液相色譜儀、容量瓶、電子天平、移液管。

12 試藥與試劑 利奈唑胺對照品；利奈唑胺注射液；三氟乙酸；乙腈、正己烷、異丙醇為色譜純。

2 方法與結果

21 方法[3] 用十八烷基鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；流動相A為三氟醋酸水溶液（取10%三氟醋酸溶液10ml加入到1000ml水中），流動相B為三氟醋酸乙腈溶液（取10%三氟醋酸溶液10ml加入到1000ml乙腈中），按表1進行線性梯度洗脫；檢測波長為254nm。精密量取本品5ml，置100ml量瓶中，加10%乙腈溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取利奈唑胺對照品10mg，精密稱定，用10%乙腈溶液制成每1ml中約含利奈唑胺01mg的溶液，作為對照品溶液，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得。

22 結果

221 系統適用性試驗 取系統適應性溶液10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。出峰順序依次為5-羥甲基糠醛、雜質A、Z4d、雜質B和利奈唑胺，利奈唑胺與相鄰雜質峰的分離度符合要求。

222 方法專屬性 精密量取溶劑、空白輔料溶液、對照品溶液、樣品溶液10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；要求溶劑、空白輔料不干擾利奈唑胺含量的測定，供試品溶液主峰的保留時間應與利奈唑胺對照品一致。實驗結果見表2。

表2 專屬性實驗結果

專屬性標準要求試驗結果

溶劑溶劑在利奈唑胺及其雜質峰位置應無干擾空白溶劑在利奈唑胺及其雜質峰位置無干擾

空白輔料空白輔料在利奈唑胺及其雜質峰位置應無干擾空白輔料在利奈唑胺及其雜質峰位置無干擾

利奈唑胺對照品——

利奈唑胺注射液各雜質與主峰應分離良好各雜質與主峰的分離度符合要求

結論檢驗方法的專屬性符合要求

223 線性 精密稱取利奈唑胺對照品005064g，置50ml容量瓶中，加10%乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液。分別精密量取對照品貯備液25、40、50、60、75ml置50ml量瓶中，加10%乙腈稀釋至刻度，搖勻，配制成濃度分別為50、80、100、120、150μg/ml的溶液，相當于供試品含量測定濃度線性范圍的50%～150%的溶液。實驗結果見表3。

結論：樣品峰面積與濃度的相關系數均大于0999；樣品峰面積與濃度作圖為一條直線。

224 精密度 精密稱取利奈唑胺對照品010048g，置100ml量瓶中，加10%乙腈超聲溶解并定容搖勻，作為對照品貯備液；稱取與處方量相應比例的輔料，置50ml容量瓶中，然后分別加入對照品貯備液40、50、60ml（每個濃度制備三份），加10%乙腈溶液適量，超聲并稀釋至刻度，搖勻，過濾，作為供試品溶液（相當于含量測試濃度的80%，100%，120%）。精密量取對照品貯備液50ml置50ml量瓶中，用10%乙腈稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。分別精密量取上述供試品溶液和對照品溶液各10μl注入色譜儀，記錄色譜圖。實驗結果見表4。[FL）]

225 重復性及范圍 取本品同一批樣品9份，（約相當于含量供試品濃度的80%，100%，120%各3份），依含量測定方法進行測定。

226 耐用性 取含量測定項下的對照品溶液和供試品溶液置容量瓶中，室溫放置，分別于0、2、4、8、24h取樣，按上述色譜條件進樣10μl，記錄色譜圖。結果見表6。

3 討論

通過系統適用性試驗、方法專屬性、線性、準確度、重復性及范圍和耐用性等六個方面對利奈唑胺注射液含量測定方法進行了研究。從驗證結果來看，利奈唑胺與相鄰雜質峰的分離度符合要求，檢驗方法的專屬性良好。在50～150μg/ml濃度范圍內呈良好線性關系（r=09999），在測試濃度的80%～120%范圍內平均回收率為100%，基本完全回收。樣品溶液在室溫條件下放置24h穩定。綜上證明：在我們的實驗室條件下能達到方法規定的系統適用性要求；該方法對我公司生產的利奈唑胺注射液產品含量檢測具有良好的專屬性；我們實驗條件下的能滿足檢測要求，對產品質量進行控制。

參考文獻

[1] 王建國，陳建.臨床治療中利奈唑胺的藥效學和藥動學研究進展[J].中國抗生素雜志，2013，38（10）：730-736.

[2] 崔向麗，趙志剛.新型噁唑烷酮類抗生素利奈唑胺[J].中國新藥雜志，2008，17（6）：530-533.

[3] 蔡劍秋.中華人民共和國藥典[M].北京：化學工業出版社，1995.