雷公藤紅素誘導腫瘤細胞凋亡機制的研究進展

宋書中， 伍春蓮，2*

（1.西華師范大學生命科學學院，西南野生動植物資源保護教育部重點實驗室，四川南充637009；2.西南大學，三峽庫區(qū)生態(tài)環(huán)境與生物資源省部共建國家重點實驗室，重慶400715）

雷公藤紅素誘導腫瘤細胞凋亡機制的研究進展

宋書中1， 伍春蓮1，2*

（1.西華師范大學生命科學學院，西南野生動植物資源保護教育部重點實驗室，四川南充637009；2.西南大學，三峽庫區(qū)生態(tài)環(huán)境與生物資源省部共建國家重點實驗室，重慶400715）

雷公藤紅素 （celastrol）是一種從傳統(tǒng)中藥雷公藤根皮中提取出的三萜單體，具有顯著的抗癌活性。它作為一種蛋白酶體抑制劑，能影響腫瘤細胞內(nèi)多種信號通路，如抑制蛋白酶體、IKKα/β激酶、HSP90等，并能激活caspase3/7。本文就雷公藤紅素誘導腫瘤細胞凋亡及其機制做一系統(tǒng)綜述。

雷公藤紅素；蛋白酶體；NF-κB；HSP90；凋亡

雷公藤Tripterygium wilfordii Hook.F.，又名黃藤，是我國傳統(tǒng)中草藥，在治療風濕性關節(jié)炎、肺結核以及其他慢性疾病時發(fā)揮著重要作用。雷公藤紅素（celastrol，CSL）是從雷公藤根皮中提取出的一種三萜單體，具有抗炎、治療神經(jīng)性退化疾病等多種藥理活性［1-3］。近年來，它的抗腫瘤作用也備受關注，其分子機制較為復雜，不過越來越多的實驗表明，雷公藤紅素在誘導腫瘤細胞凋亡方面表現(xiàn)出巨大的潛力。

1 雷公藤紅素的理化性質

雷公藤紅素又名南蛇藤素或南蛇藤醇，分子式C29H38O4，紅色針狀結晶，mp 185～200℃，在425 nm處有最強吸收，易溶有機溶劑，不溶于水。從結構上看，它屬于五環(huán)三萜類化合物，其芳香酮基上的C2和C6有很強的親核活性，從而具有抗腫瘤、抗微生物、抗氧化、細胞毒性和抗瘧疾等作用，結構見圖1。

圖1 雷公藤紅素化學結構式

2 雷公藤紅素誘導腫瘤細胞凋亡

近年來的實驗表明，低劑量下的雷公藤紅素在多種腫瘤細胞凋亡體外實驗中都表現(xiàn)出較理想的抑制效果，如乳腺癌細胞、肺癌細胞、胰腺癌細胞、神經(jīng)膠質瘤細胞、黑色素瘤細胞和前列腺癌細胞等［4-9］。雷公藤紅素作為一種天然的蛋白酶體抑制劑［10-11］，可影響細胞內(nèi)多種信號通路及蛋白發(fā)揮作用，如NF-κB、Hsp90、蛋白酶體、c-Jun、AKT/mTOR、VEGFR、caspase等［1，4，11-12］。

2.1 作用于β1亞基，抑制蛋白酶體活性 蛋白酶體又稱26S蛋白酶體 （沉降系數(shù)為26S），是一種催化復合蛋白體，可降解細胞內(nèi)約80%以上的蛋白質，如周期蛋白、轉錄因子、IκB-α、促凋亡蛋白Bax以及錯誤折疊蛋白等。蛋白酶體與細胞中多種信號通路及蛋白發(fā)揮作用密切相關，例如NF-κB、Bcl-2家族蛋白等［13-14］。

雷公藤紅素作為一種天然蛋白酶體抑制劑，可以誘導多種腫瘤細胞凋亡。Yang等［8］用雷公藤紅素 （1～5 mol/L）處理前列腺癌細胞（PC-3和LNCaP），結果發(fā)現(xiàn)類胰凝乳蛋白酶的活性明顯受到抑制，泛素化的蛋白及蛋白酶體底物 （IκB-α、Bax、p27）大量堆積，由此開始了對雷公藤紅素作為蛋白酶體抑制劑的研究。隨后其抑制蛋白酶體進而誘導腫瘤細胞凋亡這一作用被Wang等［15］在人宮頸癌細胞Hela中得到確認，但是它是否直接作用于蛋白酶體仍不明確。Feng等［16］發(fā)現(xiàn)，雷公藤紅素在體外能分別抑制肽基谷氨酰肽水解酶樣（peptidyl glutamyl-like）、胰蛋白酶樣（trypsin-like）、糜蛋白酶樣（chymotrypsin-like）這3類蛋白酶的活性，分別對應β1、β2、β5亞基的催化。但是在以上3種催化亞基中，只有β1的活性可被雷公藤紅素抑制，即使在較低的0.2μmol/L濃度下也同樣如此。然后，他們將人的蛋白酶體β1亞基在大腸桿菌中克隆表達，發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素能明顯地抑制其活性，進一步證實了它是直接抑制蛋白酶體的活性。

蛋白酶體抑制劑可以通過內(nèi)質網(wǎng)應激，從而誘導腫瘤細胞的凋亡［17］。硼替佐米 （bortezomib）作為唯一一種上市的蛋白酶體抑制劑，能通過內(nèi)質網(wǎng)應激抑制蛋白酶體降解蛋白，并促進細胞的凋亡［18］。實驗證明，在多種腫瘤細胞中，雷公藤紅素也可通過抑制蛋白酶體活性，引發(fā)內(nèi)質網(wǎng)應激反應和未折疊蛋白反應［17-20］。Wang等［15］通過Western blot實驗發(fā)現(xiàn)，雷公藤紅素可明顯上調(diào)HeLa細胞內(nèi)PERK的表達，同時內(nèi)質網(wǎng)應激的其他標志物Bip和IREI也得到上調(diào)。Feng等［16］也證實，它能激活內(nèi)質網(wǎng)應激PERK通路的標志物eIF2α和CHOP。另外，F(xiàn)ribley等［21］報道，雷公藤紅素還能激活腫瘤細胞eIF2α激酶的活性。

2.2 抑制IκB蛋白降解，抑制NF-κB通路活化 NF-κB（nuclear factor kappa B）即核因子κB，是由Rel蛋白家族中的成員以同源或異源二聚體形式形成的一組轉錄因子，參與炎癥、免疫、應激、細胞的增殖和細胞凋亡等多種生理病理過程的基因調(diào)節(jié)。大量實驗表明，持續(xù)性激活NF-κB可以引發(fā)人體中大量的惡性腫瘤［22］。

硼替佐米是一種蛋白酶體抑制劑，能抑制NF-κB通路的活化［23］，而且雷公藤紅素也有同樣的抑制作用［24］。NF-κB通路的激發(fā)需要IκB蛋白的降解，而其前提是IκB激酶（IKK）的活化。2006年，Lee等［4］報道雷公藤紅素能夠抑制IKKα和IKKβ激酶的活化。Dai等［10］發(fā)現(xiàn)，在雄性激素非依賴型前列腺癌（AIPC）中，它可迅速抑制胞漿中IκBα的降解，阻止RelA進入細胞核。Sethi等［24］報道，雷公藤紅素能夠抑制誘導型和構成型的NF-κB活化，以及腫瘤壞死因子（TNF-α）誘導IκBα激酶的活化及降解。TAK1在TNF激活IKK過程中發(fā)揮著重要作用，而雷公藤紅素能夠抑制TAK1，F(xiàn)reuddsperger等［25］也進一步證實了這一點。

TMPRSS2/ERG（T/E）基因能促進前列腺癌細胞的增殖和侵襲［26］，而NF-κB在此過程中發(fā)揮重要作用。Wang等［27］研究表明，NF-κB能通過 p65第 536位絲氨酸（p536）的磷酸化來激活腫瘤細胞T/E的表達。Shao等［28］報道，雷公藤紅素是 p536的抑制劑，在前列腺癌細胞（PCa）中通過NF-κB抑制T/E基因的表達。

2.3 作用HSP90 C-末端，抑制HSR活化 熱休克反應（heat shock response，HSR）在促進蛋白質折疊過程中起著關鍵作用，而在多種腫瘤細胞中，這條通路是持續(xù)和激活過度的［29］。研究顯示，雷公藤紅素能在人乳腺癌細胞系MCF-7和BT474、人非小細胞性肺癌細胞系H157、人神經(jīng)母細胞瘤細胞系SH-SY5Y及HeLa細胞中抑制熱休克反應［30］。

人類胞漿中含有兩種HSP90亞型，分別為HSP90α和HSP90β。雷公藤紅素能夠作用于HSP90-Cdc37復合物［6］，抑制HSP90 ATP酶活性［31］，Cdc-37和ATP結合域位于HSP90 N-末端。Zhang等［32］認為，雷公藤紅素可作用于HSP90 C-末端，進而影響HSP90與Cdc37的相互作用。Zamphorlin等［33］通過HSP90α缺失變異體C-HSP90α（只剩C-末端）的SEC-MALS實驗，證實雷公藤紅素是作用于C-末端結合域從而影響HSP90α的功能。Sreeramulu等［34］報道，它不僅能直接作用于HSP90復合物，而且會將Cdc37作為靶標，從而影響HSP90-Cdc37復合物的形成。Peng等［31］認為，雷公藤紅素可能是以共價鍵的方式與Cdc37氨基端的3個半胱氨酸殘基相連，進而影響蛋白激酶的相互作用。此外，它不僅能誘導HSP90分子伴侶 p23的寡聚化［35］，而且還是熱休克轉錄因子 （HSF1）的抑制劑［34］。

HSP90維持著細胞內(nèi)多種激酶、轉錄因子、受體等的穩(wěn)定性和活性，如Raf-1、EGFR和AKT［36-38］。雷公藤紅素不僅能促進H1650和H1975細胞內(nèi)EGFR及AKT的降解［39］，同時還可促進H460細胞EGFR、ErbB2和凋亡抑制蛋白survivin降解，并提高細胞內(nèi)p53蛋白表達水平［40］。Huang等［41］發(fā)現(xiàn)，無論在常氧或缺氧條件下，雷公藤紅素都能夠下調(diào)HIF-1αmRNA水平，降低核HIF-1α蛋白累積。

2.4 升高Caspase-3/7表達水平 Caspase凋亡途徑是細胞凋亡不可或缺的通路。其中，Caspase-3/7被認為是細胞凋亡的執(zhí)行者［42］，一旦被激活就會導致級聯(lián)的介導細胞凋亡。PARP（poly ADP-ribose polymerase）為DNA修復酶，同時也是Caspase的切割底物［43］，常被看作是細胞凋亡的標記物。

實驗顯示，雷公藤紅素能夠明顯提高多種腫瘤細胞內(nèi)Caspase3/7蛋白表達水平［39，44-45］，同時PARP的剪切帶也得到不同程度的增強［39，46-47］。Fan等［39］通過Western blot實驗發(fā)現(xiàn)，在雷公藤濃度為2μmol/L和4μmol/L時，H1650細胞Caspase3/7蛋白濃度明顯升高，PARP也得以激活。Jiang等［44］報道，雷公藤紅素聯(lián)合肝細胞生長因子受體（C-Met）抑制劑PHA-665752（PHA）作用于Huh7細胞，在高濃度（大于1.0μmol/L）時，它能使細胞停滯在G2/M時期并激活Caspase-3/7。另外，Mou等［48］發(fā)現(xiàn)，在非小細胞肺癌A549細胞中，雷公藤紅素可以促進細胞色素C釋放，上調(diào)Bax蛋白表達，同時下調(diào)Bcl-2蛋白表達。Yang等［45］報道，它可劑量依賴性地誘導乳腺癌細胞凋亡，在MCF-7細胞中，雷公藤紅素顯著促進了細胞色素C及凋亡誘導因子AIF釋放，并降低Bcl-2蛋白表達，上調(diào)Bax蛋白表達。

2.5 其他轉導途徑 在細胞有條不紊地生命代謝的穩(wěn)態(tài)中，稍微出現(xiàn)一個或幾個小環(huán)節(jié)的細小差錯，就會誘發(fā)整個細胞代謝的紊亂，可能將導致腫瘤細胞的發(fā)生。

馬永嵐等［49］報道，在人早幼粒白血病細胞HL-60中，雷公藤紅素能抑制Akt的磷酸化，同時下調(diào)CyclinD1蛋白的表達水平，并呈顯著的劑量和時間依賴性來誘導細胞凋亡。周培等［50］報道，它能顯著抑制PCa細胞株生長，同時降低SENP1基因在mRNA水平表達，表明雷公藤紅素可能是通過SENP1相關信號通路來誘導前列腺癌細胞凋亡的。雌激素受體α（ERα）作為一種核轉錄因子，是治療乳腺癌的靶點。Jang等［51］發(fā)現(xiàn)，在人乳腺癌細胞 MCF7和T47D中，雷公藤紅素能降低ERα在mRNA及蛋白水平表達，揭示它可降低MCF7和T47D細胞中ERα的轉錄活性，對于治療人乳腺癌有著重大的意義。

3 雷公藤紅素的藥物作用強度

作為從傳統(tǒng)中草藥中提取出的單體，雷公藤紅素的抗炎、治療神經(jīng)退行性疾病及抗癌作用已被廣泛報道。作為一種具有巨大潛在價值的抗腫瘤新藥，它無論是在腫瘤細胞，還是在腫瘤組織模型方面都表現(xiàn)出較強的抑制腫瘤增殖的特性，并具劑量和時間依賴性。

雷公藤紅素針對不同類型的體外培養(yǎng)的腫瘤細胞，其半數(shù)抑制濃度 （IC50）也不同，見表1。Feng等［16］用雷公藤紅素處理Hela細胞48 h，MTT細胞活性實驗檢測出其IC50值為（0.79±0.22）μmol/L。

利用腫瘤異體移植模型（Tumor xenograftmodel），Pang等［54］以雷公藤紅素2 mg/（kg·d）的量連續(xù)腹腔注射16 d，結果發(fā)現(xiàn)裸鼠PC-3腫瘤組織體積明顯減小，從 （129.36± 37.35）mm3降至 （35.49±9.71）mm3，而對照組腫瘤組織則明顯增大，從 （130.63±37.62）mm3升至 （330.74± 72.20）mm3。采用同樣的腫瘤異體移植模型，Zheng等［55］以雷公藤紅素每2天注射一次裸鼠腹腔，連續(xù)21 d，發(fā)現(xiàn)隨著濃度的增大，它能明顯的抑制肺癌細胞95-D組織體積的增大，見表2。

在臨床實驗中，Zhang等［56］報道，按100μg/kg的劑量，通過靜脈注射，雷公藤紅素峰濃度Cmax為 （38.83± 12.83）μg/L，血藥濃度為 （79.35±19.85）μg/（h·L），半衰期T1/2β為 （8.33±0.84）h，而片劑的生物利用度為17.06%。由此推測，體內(nèi)代謝和組織分布可能是生物利用度較低的原因。

表1 雷公藤紅素作用不同類型細胞系IC50值

表2 雷公藤紅素作用人肺癌95-D細胞裸鼠模型

4 展望

雷公藤作為一種常用藥材，在消炎止痛、祛風通絡、殺蟲解毒方面發(fā)揮著重要作用。而來源于其根皮的三萜單體雷公藤紅素，近年來在抗腫瘤、抗炎等方面也顯示出巨大的潛在治療價值。另外在低濃度下，雷公藤紅素不易產(chǎn)生毒副作用，而其在誘導腫瘤細胞凋亡方面的顯著活性正在不斷得到實驗的證實。

作為一種蛋白酶體抑制劑，雷公藤紅素可作用于蛋白酶體β1亞基，從而抑制其活性。它可通過抑制IκB蛋白降解，從而抑制NF-κB信號途徑活化。而且，雷公藤紅素還能通過作用于HSP90 C-末端結構域，進而影響HSP90與其底物蛋白的相互作用。本課題組認為，雷公藤紅素分別通過直接作用于蛋白酶體和HSP90，引起蛋白酶體多種底物蛋白降解異常，以及HSP90多種分子伴侶功能異常。受到抑制的蛋白酶體，通過抑制IκB蛋白的降解，進而抑制NF-κB信號通路的活化，使錯誤折疊蛋白累積，引發(fā)內(nèi)質網(wǎng)應激反應，再通過激活線粒體凋亡信號途徑，進一步誘導腫瘤細胞的凋亡。作為一種提取于我國傳統(tǒng)中草藥的抗腫瘤藥物，雷公藤紅素高效低毒，其藥用價值正在被不斷地發(fā)掘，期望能像青蒿素一樣為人類的醫(yī)藥事業(yè)做出更大的貢獻。

［1］Salminen A，Lehtonen M，Paimela T，etal.Celastrol：molecular targets of Thunder God Vine［J］.Biochem Biophys Res Commun，2010，394（3）：439-442.

［2］Morita T.Celastrol：a new therapeutic potential of traditional Chinesemedicine［J］.Am JHypertens，2010，23（8）：821.

［3］Kannaiyan R，Shanmugam M K，Sethi G.Molecular targets of celastrol derived from Thunder of God Vine：potential role in the treatment of inflammatory disorders and cancer［J］.Cancer Lett，2011，303（1）：9-20.

［4］Lee JH，Koo T H，Yoon H，et al.Inhibition of NFkappa B activation through targeting I kappa B kinase by celastrol，a quinonemethide triterpenoid［J］.Biochem Pharmacol，2006，72（10）：1311-1321.

［5］Zhu H，Liu X W，Cai T Y，et al.Celastrol acts as a potent antimetastatic agent targeting beta1 integrin and inhibiting cellextracellularmatrix adhesion，in part via the p38 mitogen-activated protein kinase pathway［J］.J Pharmacol Fxp Ther，2010，334（2）：489-499.

［6］Zhang T，Hamza A，Cao X，etal.A novel Hsp90 inhibitor to disrupt Hsp90/Cdc37 complex against pancreatic cancer cells［J］.Mol Cancer Ther，2008，7（1）：162-170.

［7］Huang Y，Zhou Y，F(xiàn)an Y，etal.Celastrol inhibits the growth of human glioma xenografts in nude mice through suppressing VEGFR expression［J］.Cancer Lett，2008，264（1）：101-106.

［8］Yang H，Chen D，Cui Q C，et al.Celastrol，a triterpene ex-tracted from the Chinese“Thunder of God Vine，“is a potent proteasome inhibitor and suppresses human prostate cancer growth in nude mice［J］.Cancer Res，2006，66（9）：4758-4765.

［9］Dai Y，Desano JT，Meng Y，et al.Celastrol potentiates radiotherapy by impairment of DNA damage processing in human prostate cancer［J］.Int J Radiat Oncol Biol Phys，2009，74（4）：1217-1225.

［10］Dai Y，Desano J，TangW，et al.Natural proteasome inhibitor celastrol suppresses androgen-independent prostate cancer progression by modulating apoptotic proteins and NF-kappaB［J］. PLoSOne，2010，5（12）：e14153.

［11］Kim Y，Kang H，Jang SW，et al.Celastrol inhibits breast cancer cell invasion via suppression of NF-κB-mediated matrix metalloproteinase-9 expression［J］.Cell Physiol Biochem，2011，28（2）：175-184.

［12］Kannaiyan R，Manu K A，Chen L，et al.Celastrol inhibits tumor cell proliferation and promotes apoptosis through the activation of c-Jun N-terminalkinase and suppression of PI3 K/Akt signaling pathways［J］.Apoptosis，2011，16（10）：1028-1041.

［13］Li B，Dou Q P.Bax degradation by the ubiquitin/proteasomedependent pathway：involvement in tumor survival and progression［J］.Proc Natl Acad Sci U S A，2000，97（8）：3850-3855.

［14］Karnak D，Xu L.Chemosensitization of prostate cancer by modulating Bcl-2 family proteins［J］.Curr Drug Targets，2010，11（6）：699-707.

［15］Wang W B，F(xiàn)eng L X，Yue Q X，et al.Paraptosis accompanied by autophagy and apoptosis was induced by celastrol，a natural compound with influence on proteasome，ER stress and Hsp90［J］.JCell Physiol，2012，227（5）：2196-2206.

［16］Feng L，Zhang D，F(xiàn)an C，et al.ER stress-mediated apoptosis induced by celastrol in cancer cells and important role of glycogen synthase kinase-3βin the signal network［J］.Cell Death Dis，2013，4（7）：e715.

［17］Fribley A，Wang C Y.Proteasome inhibitor induces apoptosis through induction of endoplasmic reticulum stress［J］.Cancer Biol Ther，2006，5（7）：745-748.

［18］Fels DR，Ye J，Segan A T，etal.Preferential cytotoxicity of bortezomib toward hypoxic tumor cells via overactivation of endop lasmic reticulum stress pathways［J］.Cancer Res，2008，68（22）：9323-9330.

［19］Bush K T，Goldberg A L，Nigam SK.Proteasome inhibition leads to a heat-shock response，induction ofendoplasmic reticulum chaperones，and thermotolerance［J］.J Biol Chem，1997，272（14）：9086-9092.

［20］Nawrocki S T，Carew JS，Dunner K J，et al.Bortezomib inhibits PKR-like endoplasmic reticulum（ER）kinase and induces apoptosis via ER stress in human pancreatic cancer cells［J］.Cancer Res，2005，65（24）：11510-11519.

［21］Fribley A M，Miller JR，Brownell A L，et al.Celastrol induces unfolded protein response-dependent cell death in head and neck cancer［J］.Fxp Cell Res，2014，330（2）：412-422.

［22］Habraken Y，Piette J.NF-kappaB activation by double-strand breaks［J］.Biochem Pharmacol，2006，72（9）：1132-1141.

［23］Ganten TM，Koschny R，Haas T L，etal.Proteasome inhibition sensitizes hepatocellular carcinoma cells，but not human hepatocytes，to TRAIL［J］.Hepatology，2005，42（3）：588-597.

［24］Sethi G，Ahn K S，Pandey M K，etal.Celastrol，anovel triterpene，potentiates TNF-induced apoptosis and suppresses invasion of tumor cells by inhibiting NF-kappaB-regulated gene productsand TAK1-mediated NF-kappaB activation［J］.Blood，2007，109（7）：2727-2735.

［25］Freudlsperger C，Bian Y，Contag Wise S，et al.TGF-βand NF-κB signal pathway cross-talk ismediated through TAK1 and SMAD7 in a subset of head and neck cancers［J］.Oncogene，2013，32（12）：1549-1559.

［26］Tom lins S A，Laxman B，Varambally S，et al.Role of the TMPRSS2-ERG gene fusion in prostate cancer［J］.Neoplasia，2008，10（2）：177-188.

［27］Wang J，Cai Y，Shao L J，etal.Activation of NF-κB by TMPRSS2/ERG fusion isoforms through Toll-like receptor-4［J］. Cancer Res，2011，71（4）：1325-1333.

［28］Shao L J，Zhou Z S，Cai Y，et al.Celastrol suppresses tumor cell growth through targeting an AR-ERG-NF-κB pathway in TMPRSS2/ERG fusion gene expressing prostate cancer［J］. PLoSOne，2013，8（3）：e58391.

［29］Whitesell L，Lindquist S L.HSP90 and the chaperoning of cancer［J］.Nat Rev Cancer，2005，5（10）：761-772.

［30］Westerheide SD，Bosman JD，Mbadugha B N，et al.Celastrols as inducers of the heat shock response and cytoprotection［J］.Biol Chem，2004，279（53）：56053-56060.

［31］Peng B，Xu L，Gao F，etal.HSP90 inhibitor，celastrol，arrests human monocytic leukemia cell U937 at G0/G1 in thiolcontaining agents reversible way［J］.Mol cancer，2010，9（1）：79-91.

［32］Zhang T，Li Y，Yu Y，et al.Characterization of celastrol to inhibit hsp90 and cdc37 interaction［J］.J Biol Chem，2009，284（51）：35381-35389.

［33］Zanphorlin LM，Alves FR，Ramos CH.The effectof celastrol，a triterpene with antitumorigenic activity，on conformational and functional aspects of the human 90 kDa heat shock protein Hsp90α，a chaperone implicated in the stabilization of the tumor phenotype［J］.Biochim Biophys Acta，2014，1840（10）：3145-3152.

［34］Sreeramulu S，Gande S L，G?bel M，et al.Molecularmechanism of inhibition of the human protein complex Hsp90-Cdc37，a kinome chaperone-cochaperone，by triterpene celastrol［J］. Angew Chem Int Fd Fngl，2009，48（32）：5853-5855.

［35］Chadli A，F(xiàn)elts S J，Wang Q，et al.Celastrol inhibits Hsp90 chaperoning of steroid receptors by inducing fibrillization of the Co-chaperone p23［J］.J Biol Chem，2010，285（6）：4224-4231.

［36］Basso A D，Solit D B，Chiosis G，et al.Akt forms an intracellular complex with heat shock protein 90（Hsp90）and Cdc37 and is destabilized by inhibitors of Hsp90 function［J］.J Biol Chem，2002，277（42）：39858-39866.

［37］Schulte TW，Blagosklonny M V，Ingui C，et al.Disruption of the Raf-1-Hsp90 molecular complex results in destabilization of Raf-1 and loss of Raf-1-Ras association［J］.J Biol Chem，1995，270（41）：24585-24588.

［38］Sawai A，Chandarlapaty S，Greulich H，et al.Inhibition of Hsp90 down-regulates mutant epidermal growth factor receptor（EGFR）expression and sensitizes EGFR mutant tumors to paclitaxel［J］.Cancer Res，2008，68（2）：589-596.

［39］Fan X X，Li N，Wu JL，et al.Celastrol induces apoptosis in gefitinib-resistant non-small cell lung cancer cells via caspasesdependent pathways and Hsp90 client protein degradation［J］. Molecules，2014，19（3）：3508-3522.

［40］Lee JH，ChoiK J，SeoW D，etal.Enhancementof radiation sensitivity in lung cancer cells by celastrol ismediated by inhibition of Hsp90［J］.Int JMol Med，2011，27（3）：441-446.

［41］Huang L，Zhang Z，Zhang S，et al.Inhibitory action of celastrol on hypoxia-mediated angiogenesis and metastasis via the HIF-1αpathway［J］.Int J Mol Med，2011，27（3）：407-415.

［42］Lakhani SA，Masud A，Kuida K，et al.Caspases 3 and 7：keymediators ofmitochondrial events of apoptosis［J］.Science，2006，311（5762）：847-851.

［43］Gong K，Li W.Shikonin，a Chinese plant-derived naphthoquinone，induces apoptosis in hepatocellular carcinoma cells through reactive oxygen species：A potential new treatment for hepatocellular carcinoma［J］.Free Radic BiolMed，2011，51（12）：2259-2271.

［44］Jiang H L，Jin JZ，Wu D，et al.Celastrol exerts synergistic effects with PHA-665752 and inhibits tumor growth of c-Met-deficient hepatocellular carcinoma in vivo［J］.Mol Biol Rep，2013，40（7）：4203-4209.

［45］Yang H S，Kim JY，Lee JH，et al.Celastrol isolated from Tripterygium regelii induces through both caspase-dependentand independent pathways in human breast cancer cells［J］.Food Chem Toxicol，2011，49（2）：527-532.

［46］楊 溦.ABT-737與雷公藤紅素聯(lián)合抗腫瘤活性的機制研究［D］.杭州：浙江大學，2012.

［47］謝 勇，閆燕艷，尉杰忠，等.雷公藤紅素誘導胃癌細胞株MGC803凋亡作用研究［J］.中藥藥理與臨床，2010，26（5）：31-33.

［48］Mou H，Zheng Y，Zhao P，et al.Celastrol induces apoptosis in non-small-cell lung cancer A549 cells through activation of mitochondria-and Fas/FasL-mediated pathways［J］.Toxicol In Vitro，2011，25（5）：1027-1032.

［49］馬永嵐，易 虹，楊飛蘭，等.雷公藤紅素下調(diào)HLP-60細胞P-Akt與CyclinD1蛋白表達及其誘導細胞凋亡的效應［J］.中國實驗血液學雜志，2010，18（4）：898-902.

［50］周 培，喬小霞，賀甜甜，等.雷公藤紅素對人前列腺癌細胞凋亡及SENP1基因表達的影響［J］.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學，2011，19（11）：2153-2157.

［51］Jang SY，Jang SW，Ko J.Celastrol inhibits the growth of estrogen positive human breast cancer cells through modulation of estrogen receptorα［J］.Cancer Lett，2011，300（1）：57-65.

［52］Ni HW，Zhao W Z，Kong X T，et al.NF-kappa B modulation is involved in celastrol induced human multiple myeloma cell apoptosis［J］.PLoSOne，2014，9（4）：e95846.

［53］Tozawa K，Sagawa M，Kizaki M.Quinone methide tripterine，celastrol，induces apoptosis in humanmyeloma cells via NF-κB pathway［J］.Int JOncol，2011，39（5）：1117-1122.

［54］Pang X，Yi Z，Zhang J，etal.Celastrol suppresses angiogenesis-mediated tumor growth through inhibition of AKT/mammalian target of rapamycin pathway［J］.Cancer Res，2010，70（5）：1951-1959.

［55］Zheng L，F(xiàn)u Y，Zhuang L，et al.Simultaneous NF-κB inhibition and E-cadherin upregulation mediate mutually synergistic anticancer activity of celastrol and SAHA in vitro and in vivo［J］.Int JCancer，2014，135（7）：1721-1732.

［56］Zhang J，LiCY，Xu M J，etal.Oralbioavailability and gender-related pharmacokinetics of celastrol following administration of pure celastrol and its related tablets in rats［J］.JFthnopharmacol，2012，144（1）：195-200.

R966

：A

：1001-1528（2015）07-1548-05

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.07.033

2014-11-12

中國博士后基金項目 （2013M540391）；四川省教育廳重大培育項目 （13CZ0029）；三峽庫區(qū)生態(tài)環(huán)境與生物資源省部共建重點實驗室開放課題基金項目（SKL-2011-05）

宋書中 （1988—），男，碩士，從事天然藥物對腫瘤細胞凋亡作用的研究。

*通信作者：伍春蓮 （1976—），女，博士，副教授，從事細胞和分子生物學的研究和教學。Tel：18990874796，E-mail：wcl_xj@ 163.com