復方枸櫞酸噴托維林顆粒中枸櫞酸噴托維林的含量測定

李 霞，柳小秦，王紅英，段婧婧，戴 涌，劉海靜（.陜西省食品藥品檢驗所，西安 70065；.西安交通大學藥學院，西安 7006）

復方枸櫞酸噴托維林顆粒中枸櫞酸噴托維林的含量測定

李 霞1，柳小秦1，王紅英2，段婧婧1，戴 涌1，劉海靜1（1.陜西省食品藥品檢驗所，西安 710065；2.西安交通大學藥學院，西安 710061）

目的 建立HPLC法測定復方枸櫞酸噴托維林顆粒中枸櫞酸噴托維林的含量。方法 色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠（250mm×4.6mm，5μm）；流動相為1mL·L－1三乙胺溶液（pH3.0）－甲醇（45∶55）；檢測波長215nm；柱溫35℃；流速1.0mL·min－1。結果 枸櫞酸噴托維林在0.04～2.0mg·mL－1范圍內線性關系良好（r＝0.999 9），定量限為4μg·mL－1，高、中、低3種質量濃度的平均回收率為100.2%（RSD＝0.78%）。結論 該方法簡便、準確、專屬性好，能有效控制復方枸櫞酸噴托維林顆粒中枸櫞酸噴托維林的含量。

復方枸櫞酸噴托維林顆粒；枸櫞酸噴托維林；含量；高效液相色譜法

復方枸櫞酸噴托維林顆粒為復方類祛痰鎮咳平喘藥，其主要成分枸櫞酸噴托維林為非成癮性鎮咳藥，鎮咳作用強度約為可待因的1／3，具有中樞和外周性鎮咳作用，除對延髓的呼吸中樞有直接作用外，還有微弱的阿托品樣作用。口服后作用可持續4～6h，吸收后部分藥物經呼吸道排出，可輕度抑制支氣管感應器和傳入神經末梢，減小咳嗽反射。大劑量使用可使痙攣的支氣管平滑肌松弛，減小氣管阻力。該品種目前的執行標準為國家藥品標準WS－10001－（HD－1161）－2002［1］，采用的是樣品經乙醚反復提取后用非水溶液滴定法測定枸櫞酸噴托維林的含量。該方法樣品前處理復雜，費時，費力，損失大。有文獻報道，采用HPLC法測定其他制劑中枸櫞酸噴托維林的含量［2－6］，本文建立的HPLC法采用三乙胺溶液－甲醇系統為流動相測定復方枸櫞酸噴托維林顆粒中枸櫞酸噴托維林的含量。方法操作簡便，結果準確，專屬性強，為進一步提高復方制劑的質量標準提供依據。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Waters 2489高效液相色譜儀，紫外檢測器（VWD）；十萬分之一天平（CP225D型，德國Sartorius）。

1.2 試藥 枸櫞酸噴托維林對照品（中國藥品生物制品檢定研究院，批號100432－200401）；復方枸櫞酸噴托維林顆粒（同一生產廠家提供，批號110101， 110102，110103）；甲醇為色譜純，水為高純水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件與系統適用性實驗 固定相為Kromasil C18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動相為1mL·L－1的三乙胺溶液（磷酸調pH3.0）－甲醇（45∶55）；柱溫：35℃；檢測波長：215nm；流速：1.0mL·min－1，進樣量10μL。

在此條件下，枸櫞酸噴托維林與其他組分達到基線分離，與相鄰的色譜峰分離度大于1.5，理論板數按枸櫞酸噴托維林峰計算不低于2 000。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱取枸櫞酸噴托維林對照品約200mg，置于50mL量瓶中，加甲醇∶水（1∶1）溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對照品儲備液；再精密量取5mL，置于50mL量瓶中，定容，搖勻，即得對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備 取供試品適量（約相當于枸櫞酸噴托維林20mg），置于50mL量瓶中，加甲醇∶水（1∶1）適量，振搖使其溶解，用上述溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液。

2.4 專屬性實驗 取不含枸櫞酸噴托維林的陰性樣品溶液約1g，置于100mL量瓶中，加甲醇∶水（1∶1）適量振搖使其溶解，再定容至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，按2.1項下的色譜條件進樣分析。結果表明，在該色譜條件下輔料及其他成分對原料藥的含量測定無干擾，見圖1。

2.5 線性關系考察 精密吸取2.2項下的對照品儲備液1，5，10，15，20和50mL，分別置于100mL量瓶中，用甲醇∶水（1∶1）稀釋至刻度，搖勻。按2.1項下的色譜條件進樣，以枸櫞酸噴托維林的峰面積為縱坐標、質量濃度（mg·mL－1）為橫坐標，進行線性回歸，回歸方程為：Y＝2.074 4×107X－2.849 1×104（r＝0.999 9），線性范圍為0.04～2.0mg·mL－1。

2.6 定量限 取2.2項下的對照品溶液逐級稀釋，進樣，按10倍信噪比計算，定量限為4μg·mL－1。

2.7 精密度實驗 取2.2項下的對照品溶液，按2.1項下的色譜條件重復進樣6次，測定枸櫞酸噴托維林的峰面積，RSD為0.2%（n＝6）。

圖1 HPLC圖a.供試品溶液；b.陰性樣品溶液；c.對照品溶液；1.枸櫞酸噴托維林Fig.1 HPLC chromatogramsa.sample solution；b.negative solution；c.reference substances solution；1.pentoxyverine citrate

2.8 重復性實驗 精密稱取復方枸櫞酸噴托維林顆粒（批號110102）6份，按2.3項下方法配制樣品溶液，按2.1項下色譜條件進樣，結果枸櫞酸噴托維林的平均含量為98.2%（n＝6），RSD為1.8%。

2.9 穩定性實驗 取2.3項下的供試品溶液，按2.1項下的色譜條件分別在0，2，4，8，12，16，20和24h各進樣10μL，計算枸櫞酸噴托維林峰面積的RSD為1.2%，表明供試品溶液在室溫下放置24h的穩定性良好。

2.10 準確度實驗 稱取不含枸櫞酸噴托維林的陰性樣品約5g，分別精密加入對照品儲備溶液（4mg·mL－1）4，5和6mL，照2.3項下方法制備樣品，每種質量濃度各配制3份，依法測定。結果見表1。2.11 耐用性實驗 實驗中比較了Kromasil C18（250mm×4.6mm，5μm）柱、Welch C18（250mm× 4.6mm，5μm）柱等不同廠家的同類型色譜柱，分離效果均良好。

表1 枸櫞酸噴托維林準確度實驗結果Tab.1 The result of accuracy test of pentoxyverine citrate

2.12 樣品的含量測定 分別取不同批號的供試品，平行取樣2次，按2.3項下的方法制備樣品，按2.1項下的色譜條件下進樣，以外標法計算枸櫞酸噴托維林的含量。結果3批樣品的含量分別為97.9%，98.2%和97.2%。

3 討論

復方枸櫞酸噴托維林為復方制劑，原標準中樣品經乙醚反復提取后，采用非水溶液滴定法測定主要成分枸櫞酸噴托維林的含量。該方法測定前必須排除其他成分、輔料和水分的干擾，樣品前處理復雜，且損失較大，對測定的準確性帶來一定影響。本文建立了HPLC法測定枸櫞酸噴托維林的含量，樣品前處理簡單，檢測方法準確，專屬性好，更適合于該制劑的質量控制。

在色譜條件的選擇中，流動相曾采用其他文獻中的0.05mol·L－1的醋酸溶液－乙腈－三乙胺（55∶45∶0.05），但枸櫞酸噴托維林和相鄰峰的分離效果不好，保留時間也不理想，經反復實驗，最終選擇流動相為1mL·L－1三乙胺溶液（磷酸調pH3.0）－甲醇（45∶55），結果枸櫞酸噴托維林的峰形良好，與相鄰成分達到基線分離。

［1］ 國家藥典委員會.國家藥品標準：WS－10001－（HD－1161）－2002.

［2］ 趙霓，李寧.HPLC法測定枸磺新啶片中枸櫞酸噴托維林和鹽酸溴己新含量［J］.西北藥學雜志，2008，26（4）：255－257.

［3］ 袁華峰.愈創維林那敏片中枸櫞酸噴托維林的含量測定［J］.中國藥業，2009，18（1）：19－20.

［4］ 田兆紅，梁柱紅.HPLC法測定枸櫞酸噴托維林片的含量［J］.西北藥學雜志，2008，23（1）：4－6.

［5］ 楊宏偉，張迪.HPLC法同時測定枸磺新啶片中枸櫞酸噴托維林和鹽酸溴己新的含量［J］.中國藥事，2009，23（9）：914－916.

［6］ 童龍彪.高效液相色譜法測定枸櫞酸噴托維林片含量［J］.醫藥導報，2011，30（3）：375－376.

Determination of pentoxyverine citrate in Compound Pentoxyverine Citrate Granules

LI Xia1，LIU Xiaoqin1，WANG Hongying2，DUAN Jingjing1，DAI Yong1，LIU Haijing1（1.Shaanxi Institute for Food and Drug Control，Xi′an 710065China；2.School of Pharmacy，Xi′an Jiaotong University，Xi′an 710061，China）

Objective To establish an HPLC method for the determination of the contents of pentoxyverine citrate in Compound Pentoxyverine Citrate Granules.Methods A C18（250mm×4.6mm，5μm）column was used with 1mL·L－1triethylamine（pH3.0）－methanol（45∶55）as the mobile phase at a flow rate of 1.0mL·min－1.The detection wavelength was set at 215nm.The column temperature was 35℃.Results The linear range was 0.04－2.0mg·mL－1（r＝0.999 9）and the limit of quantification was 4μg·mL.The average recovery was 100.2%（RSD＝0.78%）.Conclusion The method is simple，accurate and can be used for the quality control.

Compound Pentoxyverine Citrate Granules；pentoxyverine citrate；content；HPLC

10.3969／j.issn.1004－2407.2015.02.012

R927.2

A

0254－1793（2015）02－0145－02

2014－06－20）