頂空氣相色譜法測定鹽酸右美托咪定中3種有機溶劑殘留量

李 繼，林 芳，王 莉，王蓀璇，王牛民（.陜西省食品藥品檢驗所，西安 70065；2.西安交通大學醫學院第一附屬醫院藥學部，西安 7006）

頂空氣相色譜法測定鹽酸右美托咪定中3種有機溶劑殘留量

李 繼1，林 芳1，王 莉1，王蓀璇1，王牛民2＊（1.陜西省食品藥品檢驗所，西安 710065；2.西安交通大學醫學院第一附屬醫院藥學部，西安 710061）

目的 建立頂空氣相色譜法測定鹽酸右美托咪定原料藥中3種有機溶劑殘留量的方法。方法 用水溶解樣品，采用頂空進樣，在DB－WAX（25.0m×320μm×0.5μm）毛細管柱上程序升溫，應用FID檢測器，載氣為氮氣。結果 甲醇、丙酮、二氯甲烷均能得到有效分離，各組分在考察的質量濃度范圍內線性關系良好，r＝0.999 0～0.999 9，平均回收率為96.2%～102.2%。結論 該方法可用于檢測鹽酸右美托咪定原料藥中甲醇、丙酮及二氯甲烷的殘留量。

鹽酸右美托咪定；溶劑殘留；頂空毛細管氣相色譜

鹽酸右美托咪定是一種選擇性α2腎上腺素受體拮抗劑，通過作用于2種腎上腺素能受體而具有抗交感、陣痛和鎮靜作用，主要適用于手術和術后的鎮靜，尤其適用于重癥患者。自2000年3月在美國首次上市（商品名Precedex）后，由于其療效佳且不良反應小，特別是與其他α2腎上腺素受體拮抗劑相比，本品對呼吸的抑制作用小，故臨床上對此藥物的需求量很大［13］。鹽酸右美托咪定是通過拆分其消旋體美托咪定而得，在美托咪定的合成及鹽酸右美托咪定的拆分過程中，均需使用多種有機溶劑［4］，但尚未見到鹽酸右美托咪定原料中殘留溶劑檢測的相關報道。本文根據ICH對有機溶劑殘留量測定的指導原則［5］，針對生產工藝中涉及的丙酮、甲醇、二氯甲烷3種有機溶劑進行檢測，根據《中國藥典》2010年版二部附錄殘留溶劑測定法［6］及相關研究［7］，采用頂空氣相色譜法，以高純水溶解樣品，同時測定上述3種有機溶劑，結果重復性好，穩定，分析速度快，為進一步對鹽酸右美托咪定的生產工藝考察及質量控制提供了參考。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 6890N氣相色譜儀及7694E頂空進樣儀（美國安捷倫）；SPB－3全自動空氣源（北京中惠普析技術研究所）；BS－223S電子分析天平（賽多利斯）；Millipore超純水機。

1.2 試藥 鹽酸右美托咪定（西安利君制藥有限公司，批號120401，120402，120403）；甲醇、丙酮、二氯甲烷（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）；N，N－二甲基甲酰胺（色譜純，德國Merck公司）；水（自制高純水）。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 使用DB－WAX（25.0m×320μm× 0.5μm）石英毛細管柱；程序升溫：在40℃保持8min后，以8℃·min－1的速率升溫至120℃，保持10min，再以20℃·min－1的速率升溫至180℃，保持5min；進樣口溫度200℃，分流比為10∶1；檢測器溫度220℃；載氣為氮氣，流速1.5mL·min－1；頂空進樣，平衡溫度85℃，平衡時間為30min，頂空定量環體積為1mL，定量環溫度95℃，傳輸線溫度105℃。

2.2 溶液的配制

2.2.1 混合對照品溶液 稱取甲醇、丙酮、二氯甲烷各適量，精密稱定，以N，N－二甲基甲酰胺為溶劑制成每1mL中含甲醇30mg、丙酮5mg、二氯甲烷6mg的溶液，再精密移取各對照溶液5mL，置于同一50mL量瓶中，加水稀釋至刻度，制成每1mL中含甲醇3mg、丙酮0.5mg、二氯甲烷0.6mg的混合對照品儲備液。精密量取對照品儲備液5mL，置于50mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為混合對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液 取鹽酸右美托咪定約1.0g，精密稱定，置于10mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3 專屬性考察 分別精密量取混合對照品溶液、空白溶劑及供試品溶液各5mL，置于20mL頂空瓶中，密封，按2.1項下色譜條件進行分析，記錄色譜圖，見圖1。

由圖1可知，該方法的專屬性良好，各待測組分峰之間無相互干擾且峰形良好，理論板數均不低于5 000。

圖1 GC圖A.對照溶液；B.溶劑空白；C.供試溶液；a.丙酮；b.甲醇；c.二氯甲烷；d.N，N－二甲基甲酰胺Fig.1 GC chromatogramsA.standard reference B.solution blank；C.sample solution；a.acetone；b.methanol；c.dichloromethane；d.N，N－dimethylformamide

2.4 線性關系考察 精密量取對照品儲備液適量，逐級稀釋得標準曲線系列溶液。精密量取標準曲線系列溶液各5mL，分別置于20mL頂空瓶中，密封，按2.1項下色譜條件進行分析，記錄各峰面積。以峰面積（A）為縱坐標、各對照品的質量濃度（ρ）為橫坐標，進行線性回歸，分別得到甲醇、丙酮及二氯甲烷的標準曲線線性回歸方程及線性范圍，結果見表1。

表1 3種殘留溶劑的線性方程和線性范圍Tab.1 Linear regression equation and their concentration range of 3residual solvents （n＝6）

2.5 精密度實驗 精密量取混合對照品溶液5mL共6份，分別置于20mL頂空瓶中，密封，各進一針，連續進樣，按2.1項下色譜條件進行分析，計錄各待測組分的峰面積，甲醇、丙酮、二氯甲烷峰面積的RSD分別為1.5%，2.0%和2.4%。

2.6 重復性實驗 取鹽酸右美托咪定（批號120401），按2.2項下方法操作，分別制備供試品溶液6份，按2.1項下色譜條件進行分析，檢測供試品中含丙酮的質量分數為0.0040%（RSD＝2.7%），甲醇及二氯甲烷均未檢出。

2.7 穩定性實驗 取混合對照品溶液，于24h內每隔4h測定1次峰面積，甲醇、丙酮、二氯甲烷峰面積的RSD值分別為2.4%，1.8%和2.2%。

2.8 定量限與檢測限 用逐步稀釋法進行測定檢測限和定量限，甲醇、丙酮、二氯甲烷的檢測限分別為1.0，0.2和0.2mg·L－1，定量限分別為3.0，0.6和0.6mg·L－1。

2.9 加樣回收實驗 稱取各溶劑已知含量的供試品（批號：120401）0.5g共9份，精密稱定，隨機分成3組，以各溶劑檢查限度的80%，100%和120%，分別精密加入混合對照品儲備液0.8，1.0和1.2mL，按2.2項下方法制備供試品溶液，再分別精密量取5mL，置于20mL頂空瓶中，密封，按2.1項下色譜條件進行分析，結果見表2。

表2 加樣回收實驗結果Tab.2 Results of recovery test

2.10 樣品含量測定 取鹽酸右美托咪定3批樣品（批號120401，120402，120403），按2.2項下方法制備供試品溶液，再精密量取供試品溶液5mL，置于20mL頂空瓶中，密封，按2.1項下色譜條件進行分析，結果3批樣品中丙酮含量分別為0.004 0%，0.003 4%和0.003 9%，甲醇與二氯甲烷均未檢出。

3 討論

鹽酸右美托咪定易溶于水，可制成真溶液，適用于頂空氣相色譜法，故擬選擇以水為溶劑。但在制備對照品溶液時，由于二氯甲烷在水中的溶解度差，故擬先使用N，N－二甲基甲酰胺溶解制成對照品儲備液，再用水稀釋成對照品溶液。實驗結果表明，采用該方法溶解對照品，各組分峰之間分離度良好，無相互干擾，且殘留溶劑回收率良好，無明顯基質影響。

實驗中考察了DB－1與DB－WAX 2種不同極性的毛細管柱，在非極性的DB－1毛細管柱中丙酮與甲醇分離效果差，且二氯甲烷峰形拖尾較嚴重，但在相同的色譜條件下，使用DB－WAX色譜柱時，各組分峰形良好，分離度滿足檢測需要，故最終選擇DBWAX毛細管色譜柱。

根據《中國藥典》2010年版二部規定，丙酮為第三類溶劑，其允許限度的質量分數為0.5%。本次研究中，應按藥典規定考察其質量濃度在500mg·L－1時的線性關系，由于樣品中的丙酮含量低，導致供試品溶液中其質量濃度遠低于規定質量濃度，故在實驗中選擇考察丙酮質量濃度范圍為5～100mg·L－1時的線性關系，實驗結果表明，在該范圍內，其峰面積與質量濃度線性關系良好，更適用于丙酮殘留量的檢測。

本實驗摸索并建立了頂空氣相色譜法測定鹽酸右美脫咪定中甲醇、丙酮及二氯甲烷的方法，采用頂空進樣法，避免了直接進樣時原料樣品對檢測的干擾和對色譜柱帶來的污染，同時程序升溫能有效地分離待測組分，使各組分間分離度良好，實驗證明，該方法靈敏度高，穩定性和重復性好，可作為鹽酸右美托咪定中有機溶劑殘留測定的參考方法。

［1］ 梁飛，肖曉山.鹽酸右美托咪定的臨床藥理及應用［J］.現代醫院，2010，10（5）：90－93.

［2］ 趙慧人，譚志榮，周淦，等.HPLC－MS／MS法研究鹽酸右美托咪定注射液的人體藥物代謝動力學［J］.藥物分析雜志，2008，28（5）：698－701.

［3］ 盛照志，李清濤，孫峰京.鹽酸右美托咪定注射液的穩定性研究［J］.齊魯藥事，2010，29（2）：106－107.

［4］ 王玉平，馮頌延，林麗薇.鹽酸右美托咪定的合成［J］.廣東藥學院學報，2012，28（2）：135－137.

［5］ 周海均.藥品注冊的國際技術要求［M］.北京：人民衛生出版社，2006：126.

［6］ 國家藥典委員會.中國藥典2010年版［S］.二部.北京：中國醫藥科技出版社，2010：附錄ⅧP.

［7］ 尤亞寧，雷琨，李霞，等.頂空氣相色譜法測定丹參素冰片酯脂肪乳中溶劑殘留量［J］.西北藥學雜志，2013，28（4）：357－359.

Determination of three residual solvents in dexmedetomidine hydrochloride by headspace gas chromatography

LI Ji1，LIN Fang1，WANG Li1，WANG Sunxuan1，WANG Niumin2＊（1.Shaanxi Provincial Institute for Food and Drug Control，Xi′an 710065，China；2.Department of Pharmacy，the First Affiliated Hospital of Medical College，Xi′an Jiaotong University，Xi′an 710061，China）

Objective To establish a headspace gas chromatography method for determining three kinds of residual solvents in dexmedetomidine hydrochloride.Methods The samples were dissolved by water，then the content of residual solvents was measured by headspace gas chromatography by using DB－Wax（25.0m×320μm×0.5μm）capillary column with sequential increasing of temperature.Nitrogen was used as the carrier gas with FID as a detector.Results The linearity（r＝0.999 0－0.999 9）were satisfactory.Three residual solvents were completely separated，and the average recovery rates were between 96.2%－102.2%.Conclusion The method is simple，accurate and sensitive for the detection of three residual solvents in dexmedetomidine hydrochloride，and can be used for the quality control.

dexmedetomidine hydrochloride；residual organic solvent；headspace capillaryGC

10.3969／j.issn.1004－2407.2015.02.013

R917

A

1004－2407（2015）02－0147－03

2014－06－17）

李繼，男，主管藥師

＊通信作者：王牛民，男，主管藥師