蓮心堿固體分散體的表征及體外溶出度的測定

唐 婷， 嚴 航， 周 江， 桂 卉

（湖南中醫藥大學藥學院，湖南長沙410208）

蓮心堿固體分散體的表征及體外溶出度的測定

唐 婷， 嚴 航， 周 江， 桂 卉*

（湖南中醫藥大學藥學院，湖南長沙410208）

目的對蓮心堿固體分散體的溶出度進行測定，并探明蓮心堿在固體分散體中存在的狀態。方法以PVP-K30為載體材料，溶劑法制備蓮心堿固體分散體，通過顯微電鏡掃描法、紅外光譜法、差示量熱掃描法及X-ray衍射法對蓮心堿固體分散體的結構進行鑒定，并進行體外溶出度測定。結果將藥物制成固體分散體后，蓮心堿以無定形狀態分散在PVP-K30載體材料中；與原料藥及物理混合物相比，固體分散體的溶出度、溶出速率均有明顯提高。結論將蓮心堿制備成固體分散體后，可顯著提高蓮心堿的溶出度及溶出速率，為蓮心堿相關制劑的研發及臨床應用奠定了基礎。

蓮心堿；固體分散體；結構表征；溶出度

蓮心堿（1iensinine）是睡蓮科植物蓮（Nelumbo nucifera Gaertn）的蓮子心中含有量較高的一種雙芐基異喹啉類生物堿，具有降壓、抗心律失常［1-2］、抗氧化、降低血清總膽固醇等藥理作用。由于蓮心堿難溶于水，溶出速度慢，生物利用度低，極大地限制了其在臨床上的應用。本實驗采用固體分散技術，以親水性載體材料PVP-K30為載體，采用溶劑法制得蓮心堿固體分散體，通過X射線衍射法、紅外光譜法、差示量熱掃描法、顯微成像法對其結構進行表征，探明蓮心堿在固體分散體中存在的狀態，并對其體外溶出度進行考察，為蓮心堿相關制劑的研發及臨床應用奠定基礎，為固體分散技術用于提高難溶性藥物的溶出度和生物利用度提供實驗依據。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 ZRS-8G型溶出儀（天津大學無線電廠）；756PC型紫外分光光度儀（上海奧普勒有限公司）；DF-101S型集熱式恒溫加熱磁力攪拌器 （鞏義市予華有限責任公司）；CP-114型電子分析天平 （上海奧豪斯公司）；傅里葉紅外掃描儀（FTIR-8000）；X衍射掃描儀 （北京宏昌信科技有限公司：XRD系列）；REM電子掃描儀（FEI公司：Quanta-200）；差示量熱掃描儀（NETZSCH STA 499 C）。

1.2 試藥 固體分散體自制 （蓮心堿的純度為50%）；蓮心堿對照品 （上海源葉生物有限公司，純度≥98%，批號20121122）；聚乙烯吡咯烷酮 （PVP-K30）上海源葉生物科技有限公司）；其他試劑均為分析純。

2 方法

2.1 標準曲線的繪制 精密稱取蓮心堿對照品適量，用pH 6.8磷酸鹽緩沖液配制成 0.005、0.010、0.015 0、0.200、0.250、0.030 mg/m L的系列標準溶液，于282 nm處，以質量濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標，進行線性回歸，繪制標準曲線，得回歸曲線：Y=13.086X+ 0.018 3，r=0.999 6。結果表明蓮心堿對照品溶液在0.005～0.03 mg/mL范圍內線性關系良好。

2.2 供試品的制備

2.2.1 固體分散體的制備［3］稱取蓮心堿和PVP-K30各1 g，加15 mL甲醇溶解，超聲處理10 min后，混合，磁力攪拌30 m in，揮干溶劑，40℃真空干燥，粉碎，過80目篩，制得蓮心堿固體分散體。

2.2.2 蓮心堿/PVP-K30的物理混合物的制備 將蓮心堿與PVP-K30以質量比1∶1的比例準確稱量后，置于研缽中充分混合，得到蓮心堿/PVP-K30物理混合物。

2.3 體外溶出度的測定 按照 《中國藥典》2010年版二部附錄XC中溶出度測定方法第一法 （漿法）測定溶出度。以pH=6.8的磷酸鹽緩沖液為溶出介質，溫度 （37± 0.5）℃，轉速為100 r/min，取適量的固體分散體、蓮心堿、蓮心堿與PVP載體的物理混合物 （相當于含蓮心堿1.0mg），分別于0、3、8、10、20、30、45 min時取樣7 mL（取后立即補充等量的溶出介質），過0.45μm的微孔濾膜，取濾液作為供試品，在282 nm處測定其吸光度值，求算累積溶出百分率。

2.4 蓮心堿固體分散體結構表征

2.4.1 顯微掃描電鏡 加速電壓20 kV，放大倍數2 000倍，分別對蓮心堿、PVP-K30、蓮心堿/PVP-K30物理混合物及蓮心堿固體分散體進行顯微電鏡掃描。

2.4.2 傅里葉紅外光譜鑒別 將蓮心堿，PVP-K30，蓮心堿/PVP-K30物理混合物、蓮心堿固體分散體用KBr壓片，分別在4 000～400 cm-1處檢測紅外吸收光譜。

2.4.3 差示掃描量熱分析 將蓮心堿、PVP-K30、蓮心堿/PVP-K30物理混合物及蓮心堿固體分散體分別封閉在鋁盤中，調節溫度，以10℃/min的速度升溫，在30～300℃范圍內進行差示量熱掃描。

2.4.4 X-ray衍射分析 在室溫條件下，采用Cu靶，KA線，加速電壓為40 kV，掃描范圍5°～75°，掃描速度8°/min。采用壓片法制片，分別對蓮心堿、PVP-K30、蓮心堿/PVP-K30物理混合物及蓮心堿固體分散體的粉末進行X衍射掃描分析。

3 實驗結果

3.1 體外溶出度及溶出曲線 蓮心堿固體分散體、蓮心堿原料藥及蓮心堿/PVP-K30物理混合物（1∶1）在45 min的溶出度及累積溶出曲線見圖1。由圖可知，與蓮心堿原料藥及蓮心堿/PVP-K30物理混合物比較，蓮心堿固體分散體在溶出介質中的溶出度、溶出速率都有較明顯提高。45 min時蓮心堿固體分散體的累積溶出百分率達到了88.02%，為蓮心堿原料藥的 4.71倍，物理混合物的6.55倍。

3.2 顯微掃描電鏡 蓮心堿、PVP-K30、蓮心堿/PVP-K30物理混合物、蓮心堿固體分散體顯微掃描電鏡結果見圖2。由圖2可知，在蓮心堿與PVP-K30物理混合物中，兩種物體只是物理混合，而在固體分散體中，蓮心堿高度分散在PVP-K30中，從而掩蓋了蓮心堿晶體狀形狀，說明蓮心堿固體分散體已經形成，藥物以非晶體的狀態存在于固體分散體中，能夠提高藥物的溶出度。

3.3 傅里葉紅外光譜 蓮心堿、PVP-K30、蓮心堿/PVPK30物理混合物、蓮心堿固體分散體的紅外光譜圖見圖3。由圖3可知，蓮心堿固體分散體 （d）與PVP-K30（b）在2 370 cm-1處的-COCH3伸縮振動吸收峰和3 365 cm-1附近的-OH伸縮振動吸收峰的峰型相似，但在3 456 cm-1處的-OH伸縮振動吸收峰發生了明顯的紅移，且藥物的吸收強度降低，可能是蓮心堿和PVP-K30之間發生了結合作用，且以氫鍵結合，從而降低了藥物與PVP-K30之間的鍵能。此外，固體分散體中蓮心堿在2 370 cm-1處的特征峰被遮蔽，說明蓮心堿固體分散體已經形成，且并非物理混合［4-5］。

圖2 顯微掃描電鏡結果

圖3 蓮心堿/PVP-K 30紅外吸收圖譜

3.4 差示掃描量熱分析 蓮心堿、PVP-K30、蓮心堿/ PVP-K30物理混合物、蓮心堿固體分散體的差示掃描升溫曲線見圖4。由圖4可知，蓮心堿/PVP-K30物理混合物在115°和83°兩點處的特征峰，分別為蓮心堿與載體PVP-K30的熔點峰。而固體分散體中蓮心堿的115°處的熔點峰消失了，只剩下PVP-K30的熔點峰。蓮心堿熔點峰的消失或者減少表明蓮心堿是以非晶態均勻分散在PVP-K30中，即形成了分散體［6-7］。

圖4 差示量熱掃描圖

3.5 X-Ray衍射分析 蓮心堿、PVP-K30、蓮心堿/PVPK30物理混合物、蓮心堿固體分散體的粉末衍射結果見圖5。由圖5可知，蓮心堿在12.5°、30.12°、52.66°處有強度的吸收，在40.06°也有吸收，PVP-K30在5°～75°范圍內有13.54°、22.54°兩處較大的衍射峰；蓮心堿與PVP-K30物理混合物則為兩者的結合，保留了蓮心堿與PVP-K30的所有特征峰；而蓮心堿固體分散體中蓮心堿的特征晶體的衍射峰全部消失，僅保留了PVP-K30的兩個特征峰，證明蓮心堿是以非晶狀態均勻分散在載體中，形成了固體分散體［8］。

圖5 X-Ray衍射圖譜

4 結果與討論

體外溶出實驗顯示蓮心堿固體分散體的溶出度大于其物理混合物，大于蓮心堿原料藥，故將蓮心堿制備成固體分散體能夠增大其溶出度及溶出速率。

以PVP-K30為載體制備蓮心堿固體分散體，可明顯增加藥物蓮心堿的溶出度，究其原理，可能與蓮心堿在固體分散體中狀態的改變有關。顯微電鏡掃描法分析結果顯示，蓮心堿/PVP-K30物理混合物中，兩者僅為物理混合，而蓮心堿以非晶體的狀態存在于固體分散體中；由紅外色譜掃描圖可知，在固體分散體中，蓮心堿特征峰被載體所遮蔽，以高度分散的狀態存在于載體材料中；通過差示量熱掃描分析顯示，在固體分散體中蓮心堿的115°處的熔點峰消失，只剩下PVP-K30的熔點峰，說明蓮心堿與載體發生了相互作用，使蓮心堿的晶體結構發生改變；由X-ray衍射圖譜可知，蓮心堿的特征衍射峰清晰可見，而固體分散體的衍射峰僅為一條寬帶，說明在固體分散體中，蓮心堿的晶體已經完全消失，而以高度分散的狀態分散在載體材料中，從而提高蓮心堿的溶出度及溶出速率。

以PVP-K30為載體材料，采用溶劑法制得固體分散體能顯著提高蓮心堿的溶出度及溶出速率，對于將蓮心堿制成固體分散體是否能提高其在體內的生物利用度，將通過進一步的實驗進行研究。

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R927.11

B

1001-1528（2015）08-1853-03

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.08.051

2014-05-17

湖南省教育廳創新平臺開放基金科研項目 （13K078）；湖南省科技計劃項目社會發展支撐計劃項目 （2013SK3100）；國家中醫藥管理局 “中藥藥劑學”重點學科項目（國中醫藥發 ［2009］30號）；湖南省 “中藥學”重點學科建設項目資助（湘教通 ［2011］76號）

唐 婷（1988—），女，碩士生。E-mai1：232319194@qq.com

*通信作者：桂 卉，教授，碩士生導師，從事中藥新劑型與新技術研究。Te1：13707488252，E-mai1：guihui1993@126.com