痔炎沖洗靈散劑的質量標準研究

黃 芊，陳茹茹，袁倩倩，岳寶森，竇建衛＊（.西安交通大學藥學院，西安 7006；.陜西中醫學院，咸陽 7046；.西安市中醫醫院，西安 7000）

痔炎沖洗靈散劑的質量標準研究

黃 芊1，陳茹茹2，袁倩倩1，岳寶森3，竇建衛1＊（1.西安交通大學藥學院，西安 710061；2.陜西中醫學院，咸陽 712046；3.西安市中醫醫院，西安 710001）

目的 建立痔炎沖洗靈散劑的質量標準。方法 采用TLC法對痔炎沖洗靈中青黛、大黃進行定性鑒別，用HPLC法測定野菊花中蒙花苷的含量。結果 定性鑒別專屬性好，陰性對照無干擾；蒙花苷含量在0.092 8～1.113 6μg范圍內線性關系良好（r＝0.999 9）；平均回收率為99.6%RSD＝1.5%（n＝6）。結論 建立的分析方法準確、簡便，可作為痔炎沖洗靈的質量控制方法。

痔炎沖洗靈散劑；質量標準；薄層色譜法；HPLC

痔炎沖洗靈散劑是西安市中醫院院內制劑，由冰片、明礬、野菊花、青黛、生大黃等十味中藥組成，具清熱消腫、祛腐生肌、收濕殺蟲、止血止癢的功效，用于肛門直腸的急慢性炎癥，如：肛痛及血栓外痔初期，炎性外痔，肛裂肛瘺感染，內痔嵌頓，肛竇炎，濕疹，結、直腸炎（保留灌腸）等。該制劑為西安市中醫醫院肛腸科保守治療的主要藥物之一，臨床使用療效顯著、可靠，深受廣大醫生、患者好評。為有效控制藥品的質量，保證臨床用藥安全，本實驗采用薄層色譜法對青黛、大黃進行薄層鑒別；采用HPLC法對野菊花中的有效成分蒙花苷進行含量測定。本法操作簡便，重復性好，測定結果準確可靠，可作為本制劑的質量控制方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 高效液相色譜儀（日本島津LC－20A高效液相色譜儀）；N2010色譜工作站（浙江大學色譜信息研究所）；C18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm，江蘇漢邦公司生產）；YP1201N型分析天平（上海天平儀器廠）；超聲波清洗機（昆山市超聲儀器有限公司）；FA1104型0.1mg微量分析天平（上海天平儀器廠）。

1.2 試藥 蒙花苷對照品（批號111528－200504，中國藥品生物制品檢定所）；大黃對照藥材（批號121249－200402，中國藥品生物制品檢定所）；青黛對照藥材（批號121170－200001，中國藥品生物制品檢定所）；痔炎沖洗靈由西安市中醫醫院制劑室提供；甲醇為色譜純；其余均為分析純。

2 薄層色譜鑒別

2.1 大黃 取本品5g，放入30mL甲醇中浸泡1 h，濾過，濾液蒸干，剩余殘渣溶解于10mL水中，加鹽酸1mL，加熱回流30min，立即冷卻，用乙醚提取2次，每次20mL，合并乙醚液，蒸干，殘渣溶解于1 mL三氯甲烷中，作為供試品溶液。取大黃對照藥材1g，放入30mL甲醇中浸泡1h，濾過，濾液蒸干，剩余殘渣溶解于10mL水中，加鹽酸1mL，加熱回流30min，立即冷卻，用乙醚提取2次，每次20mL，合并乙醚液，蒸干，殘渣溶解于1mL三氯甲烷中，制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB）實驗，將上述溶液各吸取6μL，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上，制備石油醚（30～60℃）－甲酸乙酯－甲酸（15∶5∶1）的上層溶液為展開劑，將點有供試品溶液及對照藥材溶液的薄層板放入展開缸中，展開，取出，晾干，置于紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，陰性無干擾［1］。

2.2 青黛 取本品5g，加三氯甲烷30mL，超聲處理（功率240W，頻率50Hz）20min，濾過，濾液作為供試品溶液。取青黛對照藥材1g，加三氯甲烷30 mL，超聲處理（功率240W，頻率50Hz）20min，濾過的濾液制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB）實驗，將上述溶液各吸取10μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，制備苯－三氯甲烷－丙酮（5∶4∶1）為展開劑，將點有供試品溶液及對照藥材溶液的薄層板放入展開缸中，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性無干擾。

3 含量測定

3.1 色譜條件與系統適用性實驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇－5mL·L－1醋酸溶液（50∶50）［2］為流動相；檢測波長326nm。理論板數按蒙花苷峰計算應不低于1 500。

3.2 對照品溶液的制備 取蒙花苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液，即得。

3.3 供試品溶液的制備 取本品約10g，精密稱定，置于100mL具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，稱定質量，加熱回流3h，放冷至室溫，稱定質量，用甲醇補足減失的質量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

3.4 專屬性實驗 精密吸取蒙花苷對照品溶液5 μL、痔炎沖洗靈供試品溶液5μL、缺野菊花藥材的陰性對照溶液5μL，注入高效液相色譜儀，按3.1項下色譜條件進行測定。結果，在供試品溶液中，蒙花苷峰與其他色譜峰達到分離，陰性對照溶液在與蒙花苷對照品相同的位置上并未出現色譜峰，表明本品中其他成分對蒙花苷測定無干擾。

圖1 HPLC圖A.對照品；B.供試品；C.陰性對照品；1.蒙花苷Fig.1 HPLC chromatogramsA.reference substance；B.sample；C.negative sample；1.buddleoside

3.5 標準曲線及線性范圍 取蒙花苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含蒙花苷0.371 2mg的溶液作為蒙花苷儲備溶液，精密量取儲備溶液適量，加甲醇稀釋制成蒙花苷質量濃度分別為0.018 56，0.037 12，0.074 24，0.111 36，0.148 48，0.185 60和0.222 72mg·mL－1的溶液，將以上溶液分別進樣5μL，采集數據。以蒙花苷各進樣量值作為橫坐標（X），以峰面積積分值作為縱坐標（Y），得回歸方程：Y＝2 124 989.08 X－12 725.29，r＝0.999 9。表明蒙花苷在0.092 8～1.113 6μg范圍內線性關系良好。

3.6 精密度實驗 精密吸取蒙花苷對照品溶液和供試品溶液各5μL，分別重復進樣5次，計算出RSD值分別為1.12%和1.32%，表明儀器精密度良好。

3.7 穩定性實驗 精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5μL，每隔一定時間測定1次（0，2，4，6，12和24h），結果對照品溶液和供試品溶液在24h內穩定性良好，RSD值分別為0.84%和1.54%。

3.8 重復性實驗 取6份批號為20131101的樣品，按照供試品溶液制備項下的方法制備供試品溶液，精密吸取對照品和供試品溶液各5μL進樣，測定，計算樣品中蒙花苷的含量，測得蒙花苷的平均含量為15.52 mg·袋－1，RSD為0.98%，表明本品重復性良好。

3.9 加樣回收實驗 取批號為20131101的樣品6份，每份約5g，依次加入對照品2.65mg，按照供試品溶液制備項下的方法制備供試品溶液，計算回收率，結果見表1。

表1 加樣回收率實驗結果Tab.1 The results of recovery test （n＝6）

3.10 樣品測定 按上述方法對3批樣品進行含量測定，結果分別為15.95，15.57和15.67mg·袋－1，結合《中國藥典》（2010年版一部）野菊花藥材項下蒙花苷的含量限度規定（含蒙花苷不得少于0.8%）及其他因素，暫定本品每袋含蒙花苷不得少于10mg。

4 討論

痔炎沖洗靈散劑是復方制劑，含藥物多，成分復雜，質量標準控制指標成為質控中的難點，因此我們對其進行質量標準的研究。對痔炎沖洗靈中十味藥物進行篩選，結果：青黛、大黃的薄層鑒別，在與對照藥材相應的位置上有相同的斑點，陰性對照無干擾，方法具有專一性。采用高效液相色譜法測定制劑中蒙花苷的含量［3－5］，分離度好，精密度高，重復性好，陰性無干擾。通過對痔炎沖洗靈中物質定性鑒別、含量測定及方法學考察的研究表明，此方法準確，重復性好，可作為本品質量標準控制的依據。

［1］國家藥典委員會.中國藥典2010年版［S］.一部.北京：中國醫藥科技出版社，2010：283－284.

［2］黃杰芳.復方感冒靈片中蒙花苷的含量測定研究［J］.海峽藥學，2012，24（11）：71－72.

［3］賀建春，冼少華，張遠強，等.HPLC法測定鼻炎康片中間產品干浸膏粉中蒙花苷的含量［J］.西北藥學雜志，2010，25（4）：258－259.

［4］高超.HPLC法測定夏桑菊顆粒中蒙花苷的含量［J］.中國當代醫藥，2013，20（3）：64－65.

［5］唐維宏，韋建華，馬云婷.HPLC測定密蒙花配方顆粒中蒙花苷含量［J］.中國實驗方劑學雜志，2013，19（20）：50－51.

Study on the quality standard of Zhiyanchongxiling Powder

HUANG Qian1，CHEN Ruru2，YUAN Qianqian1，YUE Baosen3，DOU Jianwei1＊（1.School of Pharmacy，Xi′an Jiaotong University，Xi′an 710061，China；2.Shaanxi University of Chinese Medicine，Xianyang 712046，China；3.Xi′an Traditional Chinese Medi－cine Hospital，Xi′an 710001，China）

Objective To establish the quality standard for Zhiyanchongxiling Powder.Method Indigo Naturalis and Rhubarb in the prescription were identified by TLC.Quantative analysis of buddleoside which is an effective component of the formula was adopted by HPLC.Results The TLC of Indigo Naturals and Rhubarb showed good specificity and no negative interference was observed.The calibration curve of buddleoside was in good linearity over the range of 0.092 8－1.113 6μg（r＝0.999 9）and the average recovery was 99.6%（RSD＝1.5%，n＝6）.Conclusion The method is simple，sensitive and accurate，and could be used for the quality control of Zhiyanchongxiling Powder.

Zhiyanchongxiling Powder；quality standard；TLC；HPLC

10.3969／j.issn.1004－2407.2015.04.010

R282

A

1004－2407（2015）04－0361－03

2014－09－10）

黃芊，女，中藥師，在讀碩士研究生

＊通信作者：竇建衛，男，博士，副教授