乳腺癌組織中E-cadherin和CD105的表達(dá)

陳謙，高超，張磊

(1徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，江蘇徐州221000;2連云港市第二人民醫(yī)院)

乳腺癌發(fā)病率呈緩慢上升及年輕化趨勢，如今已躍居女性惡性腫瘤第1位［1～4］。上皮鈣黏蛋白(E-cadherin)與腫瘤細(xì)胞的黏附有關(guān)，且可作為乳腺癌有價值的預(yù)后指標(biāo);CD105是一種新的血管內(nèi)皮抗體，即同型二聚體細(xì)胞膜糖蛋白，在與腫瘤有關(guān)的新生血管內(nèi)皮中強表達(dá)，是新生血管增殖的標(biāo)志。現(xiàn)就乳腺癌中E-cadherin、CD105的表達(dá)及其兩者間的關(guān)系分析如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2012年3月～2013年10月連云港市第二人民醫(yī)院收治的60例乳腺癌患者，年齡30～69(49.57±10.23)歲。組織學(xué)分級(Elson and Eliis分級法):Ⅰ級15例，Ⅱ級41例，Ⅲ級4例;pTNM分期:Ⅰ期15例，Ⅱ期34例，Ⅲ期11例。人表皮生長因子受體(C-erbB-2)陰性38例，陽性22例;雌激素受體(ER)陰性29例，陽性31例;孕激素受體(PR)陰性28例，陽性32例。所有患者手術(shù)治療前未做任何治療。

1.2 方法

1.2.1 E-cadherin、CD105蛋白表達(dá)檢測 通過免疫組化SP法對乳腺癌標(biāo)本進(jìn)行處理。兔抗人E-cadherin蛋白多克隆抗體使用濃度為1∶100，鼠抗人CD105蛋白多克隆抗體使用濃度為1∶100，SP試劑盒、DAB染色劑均購于武漢博士德生物公司。陰性對照為PBS代替一抗的空白對照和正常兔血清代一抗的替代對照，陽性對照為已知明確陽性的乳腺癌組織。E-cadherin蛋白表達(dá)陽性細(xì)胞主要定位于細(xì)胞膜與細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，表現(xiàn)為棕黃色。顯微鏡下觀察陽性細(xì)胞＜25.0%為E-cadherin蛋白表達(dá)陰性，≥25.0%為表達(dá)陽性。CD105蛋白陽性表達(dá)主要定位在細(xì)胞質(zhì)，以微血管密度(MVD)表示，MVD＞30.0%為表達(dá)陽性。

1.2.2 E-cadherin、CD105 mRNA 表達(dá)檢測 按試劑盒說明書提取組織RNA，用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄得到 cDNA，保存 －80℃冰箱備用;使用ABI7900實時熒光定量PCR檢測儀進(jìn)行E-cadherin、CD105 mRNA表達(dá)水平檢測。

1.2.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，計量數(shù)據(jù)以±s表示，兩組間比較采用t檢驗;計數(shù)資料以百分比表示，比較采用χ2檢驗;基因表達(dá)狀態(tài)與乳腺癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系用χ2檢驗或Fisher's精確概率法;相關(guān)性檢驗選用Spearman分析。P≤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 E-cadherin、CD105蛋白表達(dá)與乳腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 見表1。

2.2 E-cadherin蛋白與 CD105蛋白的相關(guān)性CD105蛋白在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織分級Ⅰ和Ⅱ級、pTNM分期Ⅲ期中呈高表達(dá)，E-cadherin蛋白在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織分級Ⅰ和Ⅱ級、pTNM分期Ⅲ期中呈低表達(dá);經(jīng)過Spearman相關(guān)性分析，E-cadherin蛋白與CD105蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r= －0.343，P ＜0.05)。

2.3 E-cadherin、CD105 mRNA 表達(dá)與乳腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 見表2。

表1 E-cadherin、CD105蛋白表達(dá)與乳腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

表2 E-cadherin、CD105 mRNA表達(dá)與乳腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

3 討論

復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移是乳腺癌治療失敗的最主要原因。乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展過程復(fù)雜，因而尋找影響乳腺癌治療和預(yù)后的相關(guān)因子成為人們近年研究熱點。本文通過對CD105、E-cadherin表達(dá)與乳腺癌臨床特征的關(guān)系可以看出，CD105陽性率在腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織分級、pTNM分期間存在差異，E-cadherin陽性率在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織分級、pTNM分期、C-erbB-2陰性與陽性間存在差異，這與屈洪波等［5］報道一致。E-cadherin的功能是一類介導(dǎo)細(xì)胞之間相互黏附的鈣依賴性跨膜蛋白，參與形成和維護正常細(xì)胞之間的鏈接，對維持正常上皮細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)的完整性起重要作用［6］。腫瘤細(xì)胞的浸潤、轉(zhuǎn)移是一個多因素、多步驟的復(fù)雜過程，在這一過程中，E-cadherin起著關(guān)鍵的作用。E-cadherin在正常細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)，但在癌細(xì)胞中表達(dá)常不穩(wěn)定，且在多種上皮性腫瘤中表達(dá)下調(diào)［7］。由于E-cadherin是上皮細(xì)胞中的黏附分子，故對維持正常上皮細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)的完整性起著重要作用，陽性表達(dá)有抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的功能。當(dāng)E-cadherin表達(dá)下降或缺失，細(xì)胞間的相互黏附力下降，細(xì)胞容易分散而向外周浸潤性生長，一旦獲得轉(zhuǎn)移的必要條件，就可脫離原發(fā)灶而發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移［8］。有相關(guān)報道［9］證實，E-cadherin的黏附能力的丟失是獲得去分化和有侵襲力表型的關(guān)健一步。上皮細(xì)胞E-cadherin的正常表達(dá)能抑制細(xì)胞的游走和增殖，E-cadherin表達(dá)下調(diào)則使細(xì)胞連接松散，刺激細(xì)胞增殖游走，有利于腫瘤浸潤擴散［10］。王剛平等［11］研究表明，CD105 在乳腺癌組織血管內(nèi)皮細(xì)胞中強表達(dá)，新生血管尤為明顯，正常組織則弱表達(dá)。CD105高表達(dá)的乳腺癌患者總生存期及無病生存期較短，從而預(yù)測在轉(zhuǎn)移性乳腺癌中C105有可能成為重要的治療靶標(biāo)。E-cadherin表達(dá)降低與腫瘤的分化侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān);CD105在乳腺癌中的表達(dá)高于癌前病變組以及乳腺纖維瘤組［12］。

綜上所述，乳腺癌中E-cadherin與CD105表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，聯(lián)合檢測E-cadherin與CD105表達(dá)對判斷乳腺癌的惡性程度及預(yù)后有較大作用。

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