共刺激分子在原發(fā)性膽汁淤積性肝硬化中的研究進(jìn)展

季蓉，徐婷，吳敏

·綜述·

共刺激分子在原發(fā)性膽汁淤積性肝硬化中的研究進(jìn)展

季蓉，徐婷，吳敏

原發(fā)性膽汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis，PBC）是一種慢性漸進(jìn)性自身免疫性肝病，特征是匯管區(qū)淋巴細(xì)胞浸潤和膽管上皮細(xì)胞的選擇性破壞［1-3］。90%～95% PBC 患者血清中都會出現(xiàn)高低度抗線粒體抗體（anti-mitochondrial antibody，AMA）陽性。PBC 病因不明，可能是環(huán)境、免疫紊亂、遺傳變異等多種因素共同作用的結(jié)果。研究表明PBC 的發(fā)生與 T 細(xì)胞的異常活化有關(guān)。原始 T 細(xì)胞的活化不僅需要 TCR/CD3 復(fù)合物與主要組織相容性復(fù)合體（major histocompatibility complex，MHC）I、II 類分子的相互作用和識別，還需要共刺激分子的共同參與。共刺激分子是指參與免疫反應(yīng)的輔助分子，存在于 T、B 淋巴細(xì)胞、抗原提呈細(xì)胞（antigen presenting cell，APC）表面。共刺激信號在免疫應(yīng)答中起著極其重要的作用，是決定受到抗原刺激的 T 細(xì)胞有效激發(fā)、適度效應(yīng)和適時終止的關(guān)鍵因素。PBC 的發(fā)病機(jī)制主要是自身反應(yīng)性 T 細(xì)胞的過度免疫反應(yīng)。因此，控制自身反應(yīng)性 T 細(xì)胞的活化和效應(yīng)功能成為PBC 重要的潛在治療靶點(diǎn)。現(xiàn)就共刺激分子 CD28/B7、CTLA-4/B7、PD-1/PD-L1、PD-L2 在 PBC 的免疫發(fā)病機(jī)制和相關(guān)治療綜述如下。

1 CD28/B7 和 CTLA-4/B7

1.1 CD28、CTLA-4、B7-1、B7-2 的分子結(jié)構(gòu)

CD28 是大小為 44 kD 的 I 跨膜糖蛋白，是由二硫鍵連接而成的二聚體，屬于免疫球蛋白超家族成員，所有的CD4+T 細(xì)胞和約 50% 的 CD8+T 細(xì)胞都可以被誘導(dǎo)表達(dá)CD28。T 細(xì)胞活化后其表達(dá)量迅速增加，并誘導(dǎo)其他共刺激分子的表達(dá)。細(xì)胞毒 T 淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原 4（cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4，CTLA-4）也是免疫球蛋白超家族成員，與 CD28 在基因序列上有 70% 的同源性。但 CTLA-4 的表達(dá)范圍較窄，僅表達(dá)于活化的 CD4+T、CD8+T 細(xì)胞上。CD28 和 CTLA-4 與 APC 表面的天然配體 B7-1 和 B7-2 是目前最重要的共刺激分子。B7-1 是大小為 44～60 kD 的免疫球蛋白超家族成員，有典型的 I 型膜蛋白特征。它主要以二聚體的形式表達(dá)于活化的 B 細(xì)胞、單核細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞（dendritic cells，DC）、巨噬細(xì)胞和 T 細(xì)胞表面。B7-2 是大小為 75～115 kD 細(xì)胞表面糖蛋白，與 B7-1 在氨基酸序列上有 25% 的同源性，B7-2 多以單體的形式表達(dá)于靜止的單核細(xì)胞、活化的 B 細(xì)胞、單核細(xì)胞、DC、自然殺傷細(xì)胞，巨噬細(xì)胞和 T 細(xì)胞表面。CTLA-4、CD28 與 B7 均互為受體配體。雖然 CTLA-4 的表達(dá)量不到 CD28 的 3%，但 CTLA-4 與 B7 的結(jié)合力卻可以達(dá)到 CD28 與 B7 結(jié)合力的 20 倍。兩者在 T 細(xì)胞免疫應(yīng)答中的作用完全相反，CTLA-4 主要誘導(dǎo) T 細(xì)胞的活化和增殖，CD28 則主要起抑制 T 細(xì)胞免疫應(yīng)答的作用。

1.2 CD28/B7 和 CTLA-4/B7 的生物學(xué)功能

1.2.1 CD28/B7 的生物學(xué)功能 CD28/B7 提供 T 細(xì)胞活化的正性調(diào)節(jié)信號，CD28/B7 分子通過各種途徑參與了T 細(xì)胞的反應(yīng)：①加強(qiáng) TCR/CD3 復(fù)合物與 APC 之間黏附和相互作用，誘導(dǎo) T 細(xì)胞的活化和增殖；②誘導(dǎo) IL-2、IFN-γ 等多種細(xì)胞因子表達(dá)及其 mRNA 的穩(wěn)定，間接誘導(dǎo)細(xì)胞分裂周期抑制因子 p27 的降解和 G1-激酶的表達(dá)等，從而促進(jìn) T 細(xì)胞活化［4］；③促進(jìn) CTLA-4、ICOS、OX40、4-1BB 等共刺激分子的表達(dá)，從而促進(jìn)T 細(xì)胞亞群的分化和增殖［5］；④阻止 T 細(xì)胞無反應(yīng)并誘導(dǎo)短鏈細(xì)胞凋亡抑制蛋白（c-FLIPs）和抗凋亡蛋白 Bcl-xL、Bcl-2 等的產(chǎn)生，從而調(diào)節(jié) Fas/fasL 介導(dǎo) T 細(xì)胞的凋亡［5］。

1.2.2 CTLA-4/B7 的生物學(xué)功能 CTLA-4/B7 提供 T 細(xì)胞活化的負(fù)性信號。研究發(fā)現(xiàn) CTLA-4 缺陷性小鼠中 T、B 淋巴細(xì)胞大量增殖，血清免疫球蛋白濃度增高，說明CTLA-4/B7 在抑制 T 細(xì)胞活化和維持免疫自穩(wěn)狀態(tài)中具有重要作用［6-7］，在 T 細(xì)胞活化過程中，CTLA-4 的作用機(jī)制是：①CTLA-4 可以下調(diào)整個 T 細(xì)胞群的增殖和細(xì)胞因子合成，起到抑制免疫應(yīng)答的作用［8］。②CTLA-4 可以與 B7分子結(jié)合，從而抑制吲哚胺 2、3-加氧酶（idoleamine 2，3-dioxygenase，IDO），IDO 可以大量分解 T 細(xì)胞增殖分化所必需的氨基酸如色氨酸等，間接抑制了 T 細(xì)胞活化［9］。③CTLA-4 還通過調(diào)節(jié) T 細(xì)胞來抑制免疫應(yīng)答反應(yīng)［10］。

1.3 CD28/B7 和 CTLA-4/B7 在 PBC 中的研究現(xiàn)況

1.3.1 CD28/B7 與 PBC PBC 血清中 AMA 可識別 2-氧酸脫氫酶復(fù)合體，特別是位于線粒體內(nèi)膜的丙酮酸脫氫酶E2（PDC-E2）。PBC 的主要靶組織是肝內(nèi)小膽管，可見膽管周圍漿細(xì)胞浸潤和膽管上皮細(xì)胞（biliary duct epithelial cells，BDEC）損傷和抗 PDC-E2 的 T 細(xì)胞在 BDEC 上異常表達(dá)。Kamihira 等［11］研究發(fā)現(xiàn)在 PBC 患者外周血和肝臟組織中可見抗 PDC-E2 的 CD4+CD28-T 細(xì)胞顯著增加。這些 CD28-T 細(xì)胞主要通過以下途徑影響 PBC 疾病的進(jìn)展：①CD4+CD28-T 細(xì)胞可以使 Bcl-2 表達(dá)增高并抑制Bcl-2 的凋亡［12］。此外，它還可以表達(dá)具有細(xì)胞毒作用的穿孔素、顆粒酶 B［13］及分泌具有細(xì)胞殺傷作用的 IFN-γ［14-15］。②Isse 等［16］研究發(fā)現(xiàn) PBC 患者小葉間 BDEC 中的CD4+CD28-T 細(xì)胞能克隆擴(kuò)增自身反應(yīng)性 T 細(xì)胞，最終導(dǎo)致 PBC 患者 BDEC 的損傷。

Tsuneyama 等［17］發(fā)現(xiàn)在 PBC 早期階段，膽管周圍幾乎所有浸潤性 T 細(xì)胞表面均表達(dá) CD28 及 B7-2。通過 DC和壞死 BDEC 中的 B7-2 和T 細(xì)胞上的 CD28 的相互作用激活 Th 細(xì)胞，從而分泌特異性的細(xì)胞因子［18］。以上研究均證實(shí) CD28/B7 共刺激信號途徑在 PBC 發(fā)病機(jī)制中具有重要意義。

1.3.2 CTLA-4/B7 與 PBC Li 等［19］發(fā)現(xiàn) CTLA4 基因的 rs231775 的 G 等位基因和 rs231725 的 A 等位基因與 PBC 的危險(xiǎn)度顯著相關(guān)，攜帶 rs3087243 的 A 等位基因患者比攜帶相同片段 G 等位基因的患者有著更好的生活質(zhì)量。sCTLA-4 是 CTLA-4mRNA 選擇性剪接外顯子 3導(dǎo)致半胱氨酸殘基的缺失的一種水溶性單體蛋白［20-22］。在自身免疫性甲狀腺疾病、I 型糖尿病、SSc、SLE 和 MG 患者血清中檢測到高濃度的 sCTLA-4，sCTLA-4 被認(rèn)為是自身免疫性疾病的新的標(biāo)記物［23］。Saverino 等［24］發(fā)現(xiàn)在 AMA陽性的 PBC 患者血清中可以檢測到 sCTLA-4。由此，我們推測 CTLA 基因的缺失干擾了 CTLA-4 蛋白的表達(dá)和功能，從而阻止 T 細(xì)胞活化抑制信號的傳遞。

研究表明，CTLA-4Ig 能有效地抑制 CD8+T 細(xì)胞增殖活化并阻斷 CD28/B7 信號通路［25］。Tanaka 等［26］構(gòu)建了一個小鼠 PBC 的模型，小鼠表達(dá)的 TGF-β 受體（dnTGF-βRII）可促進(jìn) CTLA-4Ig 的分泌，結(jié)果發(fā)現(xiàn) CTLA-4Ig 可以阻止誘導(dǎo)成 PBC 的小鼠的肝臟炎癥反應(yīng)和 T 細(xì)胞的活化。因此 CTLA-4Ig 有望成為 PBC 的新的治療手段。

2 PD-1/PD-L1、PD-L2

2.1 PD-1/PD-L1、PD-L2 的分子結(jié)構(gòu)

PD-1（programmed death-1）是一個大小為 55 kD 的I 型跨膜糖蛋白，屬于 CD28 免疫球蛋白超家族新成員，它包含一個 IgV 結(jié)構(gòu)域和一個含有 97 個氨基酸的胞質(zhì)尾，其胞質(zhì)尾包含一個免疫受體酪氨酸抑制基序（ITIM）和一個免疫受體酪氨酸轉(zhuǎn)化基序（ITSM）［27］。PD-1 主要表達(dá)在活化的 T 細(xì)胞、B細(xì)胞髓系細(xì)胞和胸腺細(xì)胞上［28］。PD-1 有 2 個配體 PD-L1 和 PD-L2，兩者均屬于 I 型跨膜糖蛋白，兩種配體有 40% 的氨基酸序列相同，且均有IgC 與 IgV 型結(jié)構(gòu)域、跨膜區(qū)和一個短而保守的胞漿區(qū)尾部。PD-L1 除了在大多數(shù)淋巴細(xì)胞上表達(dá)，還可以廣泛地表達(dá)于非淋巴樣細(xì)胞如上皮細(xì)胞［29］、內(nèi)皮細(xì)胞［30］和各種腫瘤細(xì)胞［31-32］上。相反，B7-DC 表達(dá)的限制在巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞上［33］。PD-1/PD-L1、PD-L2 在介導(dǎo)負(fù)性共刺激信號，抑制自身反應(yīng)性 T 細(xì)胞和維持免疫耐受中發(fā)揮重要作用，也成為腫瘤免疫、移植免疫和自身免疫的研究熱點(diǎn)［34-35］。

2.2 PD-1/PD-L1、L2 的生物學(xué)功能

PD-1 基因敲除的 C57BL/6PD-1/- 小鼠可出現(xiàn)狼瘡樣腎炎和關(guān)節(jié)炎［36］。而 PD-1 基因敲除的 BALB/cPD-1/- 小鼠可發(fā)展為擴(kuò)張型心肌病［37］。這些結(jié)果表明，PD-1 及其配體在調(diào)節(jié)免疫耐受性和自身免疫性發(fā)揮重要作用。PD1/PD-L1、PD-L2 通過多種途徑參與機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)：①PD-1 分子的細(xì)胞內(nèi)信號由 PI3K-Akt 通路主導(dǎo)［38］。PD-1 可以通過 ITIM和 ITSM 中的 α-氨基對羥丙酸殘基進(jìn)行傳導(dǎo)磷酸化信號，它通過 Lyn 磷酸化使 BCR 與 PD-1 的 Fc 片段的交叉偶聯(lián)更為緊密。此外，磷酸化的 ITSM 還可以產(chǎn)生去磷酸化作用，它通過 SH2 區(qū)域募集 SHP-2。SHP-2 又可使BCR 近端信號分子 Iga/b、Syk 去磷酸化，從而減弱下游分子 PLCg2、PI3K、vav 和 ERK1/2 的激活，由此抑制了B 細(xì)胞的活化［39］。PD-1/PD-L1、PD-L2 抑制 T 細(xì)胞受體、Toll 樣受體及微生物表面的受體信號傳遞也是通過類似的通路。②PD-1/PD-L1、PD-L2 可以通過抑制自身反應(yīng)性 T 細(xì)胞的活化和功能及促進(jìn) Foxp3+Treg 細(xì)胞的形成和功能，進(jìn)而誘導(dǎo)機(jī)體的免疫耐受。③PD-L1 促進(jìn) TH2 型免疫應(yīng)答及其細(xì)胞因子（IL-10 和 IL-4 等）的分泌，抑制 TH1 型免疫應(yīng)答及其細(xì)胞因子（IL-2 和 IFN-γ 等）的分泌。④PD-1影響 T 細(xì)胞在胸腺發(fā)育過程進(jìn)而影響外周 T 細(xì)胞庫［40］。

2.3 PD-1/PD-L1、PD-L2 與 PBC

PD-1 可以表達(dá)在肝臟的庫普弗細(xì)胞（Kupffer cells，KC）、其他單核細(xì)胞衍生的細(xì)胞、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞上［32，41-42］。Mataki 等［43］研究發(fā)現(xiàn)，PD-L1、PD-L2 可表達(dá)在肝臟的門脈區(qū)。PD-L1 主要表達(dá)在 KC、DC 及肝竇內(nèi)皮細(xì)胞（liver sinusoidal endothelial cells，LSEC）上，尤其在 LSEC 上表達(dá)特別強(qiáng)烈，而 PD-L2 只出現(xiàn)在 KC 和DC 上。肝內(nèi) PD-1 和 KC 及 LSEC 上的 PD-L1、PD-L2相互作用可以下調(diào)自身反應(yīng)性 T 淋巴細(xì)胞從而引起 PBC的免疫失調(diào)［44］。實(shí)驗(yàn)中，他們還發(fā)現(xiàn)肝內(nèi)表達(dá)的 PD-L1、PD-L2 受 IFN-γ 的調(diào)節(jié)，PBMCs 受到 IFN-γ 刺激后，PD-L1、PD-L2 的表達(dá)均會上升。因此我們可以通過調(diào)節(jié)IFN-γ 的分泌，從而達(dá)到控制 PD-L1、PD-L2 的表達(dá)及疾病進(jìn)展的目的。

大量研究證實(shí)自身免疫性疾病的發(fā)生和發(fā)展與遺傳相關(guān)。Juran 等［45］研究發(fā)現(xiàn) PD-1 的 PD1.3A 等位基因會促進(jìn)本身攜帶 CTLA4 49AG：CT60 AA 單倍型基因且 AMA 陽性的 PBC 患者疾病進(jìn)一步進(jìn)展。因此對 PBC 患者進(jìn)行遺傳性分析，我們就可以對 PBC進(jìn)行早期診斷，病情評估以及選擇合理的治療方案。Chen 等［46］還發(fā)現(xiàn) MSC 可以上調(diào)PD-L1 的表達(dá)從而抑制 IL-17 產(chǎn)生，這為我們治療自身免疫性肝病提供了新的思路。

3 展望

綜上所述，共刺激分子與 PBC 的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，但其機(jī)制仍有待深入研究，隨著分子生物學(xué)科學(xué)技術(shù)以及相關(guān)學(xué)科的不斷發(fā)展，科研與臨床疾病之間日益增加的聯(lián)系，我們還可能發(fā)現(xiàn)更多的共刺激分子，它們的分子結(jié)構(gòu)、生物學(xué)功能以及與 PBC 之間的關(guān)系的研究將會有更大的進(jìn)展，隨著對 PBC 發(fā)病機(jī)制的不斷深入研究，我們相信會為PBC 的診斷和治療提供全新的視角和前景。

［1］ Hirschfield GM， Gershwin ME. The immunobiology and pathophysiology of primary biliary cirrhosis. Annu Rev Pathol， 2013，8：303-330.

［2］ Liaskou E， Hirschfield GM， Gershwin ME. Mechanisms of tissue injury in autoimmune liver diseases. Semin Immunopathol， 2014，36（5）：553-568.

［3］ Wang L， Wang FS， Chang C， et al. Breach of tolerance： primary biliary cirrhosis. Semin Liver Dis， 2014， 34（3）：297-317.

［4］ Huang F， Mo XA. Co-stimulatory molecules and myasthenia gravis. Neural Inj Funct Reconstr， 2007， 2（2）：85-89. （in Chinese）

黃芳， 莫雪安. 共刺激分子與重癥肌無力. 神經(jīng)損傷與功能重建，2007， 2（2）：85-89.

［5］ Kirchhoff S， Muller WW， Li-Weber M， et al. Up-regulation of c-FLIPshort and reduction of activation-induced cell death in CD28-costimulated human T cells. Eur J Immunol， 2000， 30（10）：2765-2774.

［6］ Waterhouse P， Penninger JM， Timms E， et al. Lymphoproliferative disorders with early lethality in mice deficient in Ctla-4. Science， 1995，270（5238）：985-988.

［7］ Tivol EA， Borriello F， Schweitzer AN， et al. Loss of CTLA-4 leads to massive lymphoproliferation and fatal multiorgan tissue destruction，revealing a critical negative regulatory role of CTLA-4. Immunity，1995， 3（5）：541-547.

［8］ Krummel MF， Allison JP. CTLA-4 engagement inhibits IL-2 accumulation and cell cycle progression upon activation of resting T cells. J Exp Med， 1996， 183（6）：2533-2540.

［9］ Grohmann U， Orabona C， Fallarino F， et al. CTLA-4-Ig regulates tryptophan catabolism in vivo. Nat Immunol， 2002， 3（11）：1097-1101.

［10］ Takahashi T， Tagami T， Yamazaki S， et al. Immunologic self-tolerance maintained by CD25（+）CD4（+） regulatory T cells constitutively expressing cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4. J Exp Med，2000， 192（2）：303-310.

［11］ Kamihira T， Shimoda S， Harada K， et al. Distinct costimulation dependent and independent autoreactive T-cell clones in primary biliary cirrhosis. Gastroenterology， 2003， 125（5）：1379-1387.

［12］ Schirmer M， Vallejo AN， Weyand CM， et al. Resistance to apoptosis and elevated expression of Bcl-2 in clonally expanded CD4+CD28- T cells from rheumatoid arthritis patients. J Immunol， 1998， 161（2）：1018-1025.

［13］ Namekawa T， Wagner UG， Goronzy JJ， et al. Functional subsets of CD4 T cells in rheumatoid synovitis. Arthritis Rheum， 1998， 41（12）：2108-2116.

［14］ Namekawa T， Snyder MR， Yen JH， et al. Killer cell activating receptors function as costimulatory molecules on CD4+CD28null T cells clonally expanded in rheumatoid arthritis. J Immunol， 2000，165（2）：1138-1145.

［15］ Weyand CM， Klimiuk PA， Goronzy JJ. Heterogeneity of rheumatoid arthritis： from phenotypes to genotypes. Springer Semin Immunopathol， 1998， 20（1-2）：5-22.

［16］ Isse K， Harada K， Sato Y， et al. Characterization of biliary intra-epithelial lymphocytes at different anatomical levels of intrahepatic bile ducts under normal and pathological conditions：numbers of CD4+CD28- intra-epithelial lymphocytes are increased in primary biliary cirrhosis. Pathol Int， 2006， 56（1）：17-24.

［17］ Tsuneyama K， Harada K， Yasoshima M， et al. Expression of co-stimulatory factor B7-2 on the intrahepatic bile ducts in primary biliary cirrhosis and primary sclerosing cholangitis： an immunohistochemical study. J Pathol， 1998， 186（2）：126-130.

［18］ Lenschow DJ， Ho SC， Sattar H， et al. Differential effects of anti-B7-1 and anti-B7-2 monoclonal antibody treatment on the development of diabetes in the nonobese diabetic mouse. J Exp Med， 1995， 181（3）：1145-1155.

［19］ Li Q， Wang B， Pan F， et al. Association between cytotoxic T-lymphocyte antigen 4 gene polymorphisms and primary biliary cirrhosis in Chinese population： data from a multicenter study. J Gastroenterol Hepatol， 2013， 28（8）：1397-1402.

［20］ Salomon B， Bluestone JA. Complexities of CD28/B7： CTLA-4 costimulatory pathways in autoimmunity and transplantation. Annu Rev Immunol， 2001， 19：225-252.

［21］ Magistrelli G， Jeannin P， Herbault N， et al. A soluble form of CTLA-4 generated by alternative splicing is expressed by nonstimulated human T cells. Eur J Immunol， 1999， 29（11）：3596-3602.

［22］ Oaks MK， Hallett KM. Cutting edge： a soluble form of CTLA-4 in patients with autoimmune thyroid disease. J Immunol， 2000， 164（10）：5015-5018.

［23］ Baehring JM， Damek D， Martin EC， et al. Neurolymphomatosis. Neuro Oncol， 2003， 5（2）：104-115.

［24］ Saverino D， Pesce G， Antola P， et al. High levels of soluble CTLA-4 are present in anti-mitochondrial antibody positive， but not in antibody negative patients with primary biliary cirrhosis. PLoS One， 2014，9（11）：e112509.

［25］ Suresh M， Whitmire JK， Harrington LE， et al. Role of CD28-B7 interactions in generation and maintenance of CD8 T cell memory. J Immunol， 2001， 167（10）：5565-5573.

［26］ Tanaka H， Yang GX， Tomiyama T， et al. Immunological potential of cytotoxic T lymphocyte antigen 4 immunoglobulin in murine autoimmune cholangitis. Clin Exp Immunol， 2015， 180（3）：371-382.

［27］ Okazaki T， Maeda A， Nishimura H， et al. PD-1 immunoreceptor inhibits B cell receptor-mediated signaling by recruiting src homology 2-domain-containing tyrosine phosphatase 2 to phosphotyrosine. Proc Natl Acad Sci U S A， 2001， 98（24）：13866-13871.

［28］ Linsley PS， Greene JL， Tan P， et al. Coexpression and functional cooperation of CTLA-4 and CD28 on activated T lymphocytes. J Exp Med， 1992， 176（6）：1595-1604.

［29］ Freeman GJ， Long AJ， Iwai Y， et al. Engagement of the PD-1 immunoinhibitory receptor by a novel B7 family member leads to negative regulation of lymphocyte activation. J Exp Med， 2000，192（7）：1027-1034.

［30］ Iwai Y， Terawaki S， Ikegawa M， et al. PD-1 inhibits antiviral immunity at the effector phase in the liver. J Exp Med， 2003， 198（1）：39-50.

［31］ Iwai Y， Ishida M， Tanaka Y， et al. Involvement of PD-L1 on tumor cells in the escape from host immune system and tumor immunotherapy by PD-L1 blockade. Proc Natl Acad Sci U S A， 2002，99（19）：12293-12297.［32］ Dong H， Strome SE， Salomao DR， et al. Tumor-associated B7-H1 promotes T-cell apoptosis： a potential mechanism of immune evasion. Nat Med， 2002， 8（8）：793-800.

［33］ Yamazaki T， Akiba H， Iwai H， et al. Expression of programmed death 1 ligands by murine T cells and APC. J Immunol， 2002， 169（10）：5538-5545.

［34］ Fife BT， Pauken KE. The role of the PD-1 pathway in autoimmunity and peripheral tolerance. Ann N Y Acad Sci， 2011， 1217：45-59.

［35］ Riella LV， Paterson AM， Sharpe AH， et al. Role of the PD-1 pathway in the immune response. Am J Transplant， 2012， 12（10）：2575-2587.

［36］ Nishimura H， Nose M， Hiai H， et al. Development of lupus-like autoimmune diseases by disruption of the PD-1 gene encoding an ITIM motif-carrying immunoreceptor. Immunity， 1999， 11（2）：141-151.

［37］ Nishimura H， Okazaki T， Tanaka Y， et al. Autoimmune dilated cardiomyopathy in PD-1 receptor-deficient mice. Science， 2001，291（5502）：319-322.

［38］ Subudhi SK， Zhou P， Yerian LM， et al. Local expression of B7-H1 promotes organ-specific autoimmunity and transplant rejection. J Clin Invest， 2004， 113（5）：694-700.

［39］ Chemnitz JM， Parry RV， Nichols KE， et al. SHP-1 and SHP-2 associate with immunoreceptor tyrosine-based switch motif of programmed death 1 upon primary human T cell stimulation， but only receptor ligation prevents T cell activation. J Immunol， 2004， 173（2）：945-954.

［40］ Toda G， Zeniya M， Watanabe F， et al. Present status of autoimmune hepatitis in Japan--correlating the characteristics with international criteria in an area with a high rate of HCV infection. Japanese National Study Group of Autoimmune Hepatitis. J Hepatol， 1997，26（6）：1207-1212.

［41］ Brown JA， Dorfman DM， Ma FR， et al. Blockade of programmed death-1 ligands on dendritic cells enhances T cell activation and cytokine production. J Immunol， 2003， 170（3）：1257-1266.

［42］ Selenko-Gebauer N， Majdic O， Szekeres A， et al. B7-H1（programmed death-1 ligand） on dendritic cells is involved in the induction and maintenance of T cell anergy. J Immunol， 2003， 170（7）：3637-3644.

［43］ Mataki N， Kikuchi K， Kawai T， et al. Expression of PD-1， PD-L1， and PD-L2 in the liver in autoimmune liver diseases. Am J Gastroenterol，2007， 102（2）：302-312.

［44］ Oikawa T， Takahashi H， Ishikawa T， et al. Intrahepatic expression of the co-stimulatory molecules programmed death-1， and its ligands in autoimmune liver disease. Pathol Int， 2007， 57（8）：485-492.

［45］ Juran BD， Atkinson EJ， Schlicht EM， et al. Interacting alleles of the coinhibitory immunoreceptor genes cytotoxic T-lymphocyte antigen 4 and programmed cell-death 1 influence risk and features of primary biliary cirrhosis. Hepatology， 2008， 47（2）：563-570.

［46］ Chen Y， Chen S， Liu LY， et al. Mesenchymal stem cells ameliorate experimental autoimmune hepatitis by activation of the programmed death 1 pathway. Immunol Lett， 2014， 162（2 Pt B）：222-228.

10.3969/j.issn.1673-713X.2015.06.015

江蘇省常州市衛(wèi)生局重大科技項(xiàng)目（ZD201108）；國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金（K11245213）

213003 常州，蘇州大學(xué)附屬第三醫(yī)院風(fēng)濕免疫科

吳敏，Email：wuumin@163.com

2015-06-08