癲癇患者腦組織中SCG10的表達與耐藥性的相關性分析

田 光

河南周口市川匯區中醫院西醫普內科 周口 466000

癲癇是臨床常見的短暫性大腦功能障礙慢性疾病，現將我院收治的40例耐藥性癲癇患者作為對象進行研究，具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2011-08—2013-06收治的40例耐藥性癲癇患者為觀察組，男27例，女13例；年齡7～60歲，平均（32.8±6.7）歲；選取同期40例神經外科減壓或清創治療患者為對照組，男26例，女14例；年齡8～58歲，平均（33.2±5.4）歲；2組性別、年齡等比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 標本制備和隨機化處理：2組取出腦組織后，以4%多聚甲醛48h固定，以石蠟常規包埋，保存備用。將石蠟塊取出，使用石蠟切片機連續性冠狀切片，控制切片厚度為5 μm，每份標本制備10張切片，隨機抽取2張，實施免疫組化和熒光染色檢測。

1.2.2 免疫組化檢測：組織切片，使用電吹風烘烤10min，乙醇脫蠟，自來水浸泡5min，PBS緩沖液反復沖洗3次。蒸餾水配備3%雙氧水，室溫放置10min；以0.01枸櫞酸鈉緩沖液熱修復抗原30min，溫度95℃。加入抗原修復液Ⅰ，室溫放置10min，隨后PBS緩沖液反復沖洗3次，每次沖洗3 min。加入正常兔血清，室溫放置30min，甩掉多余液體。加入適量稀釋后益康山羊抗人SCG10，使用PBS代替一抗室溫過夜作為陰性對照。設置冰箱溫度4℃，于第2天37℃水浴箱中孵育30min，PBS反復沖洗3次，5min／次。添加生物素化二抗，上述相同步驟孵育沖洗，加入SABC，相同步驟孵育沖洗，DAB顯色，蘇木素復染，二甲苯脫水、透明，中性樹膠封片。MAPK檢測步驟相同于SCG10。

1.2.3 免疫熒光檢測：切片脫蠟，抗原修復，加入1%牛血清蛋白及0.4%ritonX-100，室溫放置60min，添加兔血清封閉液，封閉5h。添加SCGl0山羊抗人多克隆一抗和MAPK小鼠抗人多克隆一抗，以PBS替代作為陰性對照，4℃放置一夜。于第2天37℃水浴箱中孵育30min，PBS反復沖洗3次，5min／次。體添加RITC-兔抗羊二抗及FITC一兔抗小鼠二抗，室溫下3h孵育，PBS反復沖洗，以油-PBS封片。

1.3 統計學分析 數據資料采用SPSS 20.0軟件處理，計數資料以百分比表示，卡方檢驗，計量資料以（±s）表示，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 2組SCG10及MAPK表達情況比較 觀察組SCG10表達（0.484±0.025）明顯高于對照組（0.314±0.020），觀察組MAPK表達（0.447±0.148）顯著高于對照組（0.315±0.130），差異有統計學意義（P＜0.05）。

2.2 癲癇患者SCG10及MAPK表達情況比較 觀察組經熒光雙標檢測，患者腦組織SCG10及MAPK表達處于同一細胞。

3 討論

癲癇為神經系統常見疾病，屬于短暫腦功能失調綜合征，具有反復發作性特點，其特征主要表現為腦神經元異常放電致癲癇反復發作。研究［2］認為，癲癇病理變化表現為細胞骨架變化，而事實為神經可塑性結構改變。癲癇發病機制復雜，發病率高，嚴重影響患者身心健康，目前臨床以藥物治療為主，但發病機制尚未明確，尚無特效藥物。

SCG10是神經特異性蛋白，胚胎期神經元發生期間，SCG10在生長錐部位表達較高，但胎兒娩出后，SCG10表達大幅度降低，而在成熟大腦神經元突觸重塑部位，SCG10依然存在表達。SCG10會促進神經延伸，重塑突觸，影響了神經系統可塑性。同時在動物癲癇模型中，SCG10表達明顯增高［3］，可見SCG10與癲癇形成有很大關系。MAPK為絲裂原活化蛋白激酶，于中樞神經系統表達廣泛，受到各種細胞外刺激信號時，會對突觸傳遞、神經元重塑等產生影響。SCG10是MAPK的下游底物，研究［4］發現，MAPK和神經元重塑有關，與癲癇發病機制有密切關系。在本組研究中，2組經免疫組化檢測后，觀察組患者SCG10和MAPK表達均顯著高于對照組（P＜0.05）。且癲癇患者經熒光雙標檢測，患者腦組織SCG10及MAPK表達處于同一細胞。由此可見，SCGl0表達及MVPK表達與癲癇患者發病密切相關，且處于同一細胞。說明癲癇患者腦組織中SCG10的表達水平明顯較高，通過對其觀察能夠明確患者病情，而SCG10及MAPK之間相互作用與療效有一定的相關性。

［1］姚蘭，張美林，陳陽美.難治性癲癇患者腦組織中SCGl0的表達及其意義［J］.世界科技研究與發展，2010，32（2）：239-242.

［2］韓璞.ATP-結合相關基因mRNA在耐藥性癲癇患者腦組織中的表達［J］.中華醫學雜志，2011，33（2）：198-199.

［3］楊柳.ROCK1，TRAF3mRNA在耐藥性癲癇患者海馬組織中的表達及意義［J］.重慶醫科大學學報，2011，36（6）：176-177.

［4］葛曉霞.癲癇患者腦組織中SCG10的表達及其與耐藥的相關性分析［J］.中國實用醫藥，2014，9（1）：183-184.