類風濕關節炎血清標本庫的構建及意義

鈕敏紅　萬曉春　閆曉霏　呂衛東

（深圳大學第一附屬醫院，廣東 深圳 518035）

類風濕關節炎血清標本庫的構建及意義

鈕敏紅萬曉春閆曉霏呂衛東

（深圳大學第一附屬醫院，廣東 深圳 518035）

目的 探討類風濕關節炎血清標本庫的創建及管理方法，合理利用標本資源，為臨床及類風濕關節炎的防治研究提供平臺。方法收集類風濕關節炎患者外周血標本，分離血清、血漿和血細胞，按照標本入庫編號進行登記，-80 ℃低溫冷凍保存；同時建立血清標本庫的信息管理系統，以便于標本及臨床資料數據的收集管理、查詢及調用。結果已收集了類風濕關節炎患者不同分期的血清共326份，血漿261份，淋巴細胞213份。并對所收集標本的流行病學及臨床資料整理后歸檔管理。結論初步建立了具有一定數量的類風濕關節炎血清標本庫，為今后相關的類風濕關節炎研究提供服務平臺。

類風濕關節炎；血清標本庫；構建

類風濕關節炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種常見的、以全身性炎癥及骨關節病變為主的慢性自身免疫性疾病。隨著病情的進展，可出現全身滑膜關節的病變、骨質破壞、關節畸形甚至關節強直，具有較高的致殘率，患病率約為0.3%～0.4%，其發病機制尚不明確，多認為RA的發病是由遺傳和環境因素共同作用的結果，RA目前尚無根治的藥物，但早期診斷、早期治療可以有效延緩病情進展，改善患者的生活質量。RA的血清樣本是重要的臨床病例資料，建立規范化、臨床資料完整的RA血清標本庫，不僅能最大限度的保護和合理利用標本資源，同時還可為相關研究提供足夠的標本，實現臨床資源和樣本資源的共享，縮短研究周期，促進類風濕關節炎研究的進展。

1　材料與方法

1.1主要材料：人淋巴細胞分離液（灝洋生物），DMEM培養基、小牛血清（GIBCO），DMSO（Amresco），-80 ℃超低溫冰箱（SANYO），液氮罐（Thermo），離心機（Eppendorf）等。

1.2血液標本的收集：所收集的病例均符合美國風濕病學會RA診斷標準，同時排除糖尿病、高血壓、慢性系統性疾病及其他自身免疫性疾病。血液樣本來源于晨起空腹采集的外周靜脈血，在首先滿足臨床病理檢測的前提下，收集剩余血液樣本，每份血液樣本以抗凝與不抗凝兩種形式保存。所有血液標本處理工作應盡快完成，通過嚴格控制標本處理時間從而有效保證血液標本的質量。

1.3血清的分離與凍存：收集的抗凝血液樣本于37 ℃靜置1 h后，1500轉/分離心5 min分離血清，每份血清樣本經分裝后置于-80 ℃冰箱中保存。

1.4血漿、淋巴細胞的分離與凍存：取收集的新鮮抗凝血，小心加入等體積的細胞分離液于液面上，1500轉/分離心15 min，此時所分離的血液樣本分為四層，其中第一層即為血漿層，第二層為淋巴細胞。收集第一層的血漿分裝后置于-80 ℃冰箱中保存。將第二層的細胞轉移至含PBS的離心管中，充分混勻后，1500轉/分離心15～20 min，棄上清，沉淀經反復洗2次后即得淋巴細胞。所得淋巴細胞與凍存液混勻后，分裝至凍存管，經程序降溫后轉移至液氮罐保存。

1.5標本的后期管理：收集的標本經編號登記后，標本數據庫實行信息化管理，以便與后期的使用和管理。

2　結　果

2.1血液標本的采集及凍存：已收集了類風濕關節炎患者不同分期的血清共326份，血漿261份，淋巴細胞213份。并對所收集標本的流行病學及臨床資料整理后歸檔管理。

2.2標本數據的收集及管理：我們按照血清標本庫建設的各項工作流程、工作制度、質控和管理要求建立了類風濕關節炎血清標本庫。根據標本庫建設及管理需要，標本庫需詳細記錄患者的基本信息、臨床診斷信息、標本基本信息、標本使用情況、標本質量控制等相關資料。標本庫信息主要包括以下內容：①患者的一般資料：姓名、性別、年齡、民族、職業、聯系方式、住院號等；②標本臨床檢驗資料：臨床診斷、病理診斷等；③病理資料：診治經過、預后資料等；④標本基本信息：編號、存放位置、入庫日期、標本數量、標本到期時間；⑤標本使用管理：出庫編號、出庫時間、使用單位、使用人、審批單位、審批人等；⑥患者隨訪信息：定期隨訪患者的疾病發展情況信息。

3　討　論

標本采集是臨床護士工作的一項重要內容，為了保證所收集的血清標本的質量，避免血清標本在收集與保存過程中因人為因素造成偏差，需要對標本采集人員進行相應的技術培訓，強化質量意識，確保所收集血清樣本的質量［1-3］。參與標本庫建立的護士需具有豐富的臨床經驗和高度的責任心，熟悉血清標本庫建設的工作流程及注意事項，能夠嚴格按照標準化的血清處理步驟建庫，從而嚴格控制血標本的質量。

建設規范化的標本庫，需嚴格把關所收集的患者血液標本，要具備完善的患者基本信息、臨床診斷信息等，以保證標本庫的信息完整性［4-6］。收集患者的標本前務必需要經患者或患者家屬的同意并簽署知情同意書，在首先滿足臨床病理檢測的前提下，收集剩余血液樣本。通過制定相應的規范操作流程以保證所收集標本的質量，其中包括制定標本采集流程標準，標本信息記錄規范，標本制備、保存，標本使用等規范。保證從標本收集開始整個過程都能標準化操作，標本的保存過程中還應定期對標本庫進行質量控制以保證標本的有效性和穩定性。標本庫的建設需要與科研緊密結合，做到物盡其用，避免不必要的資源浪費，規范化的工作流程也提高了工作效率。

RA是一種高致殘率的自身免疫性疾病，對其病因研究依然是近幾年研究的重點，目前針對RA相關細胞因子的研究雖已取得了進展，但RA是一種多因素引發的疾病，仍需進一步研究其發病機制以發現更有效的治療靶點。建立規范化、臨床資料完整的類風濕關節炎血清標本庫將為RA的研究提供大量臨床標本，并為今后開展相關方面的研究進行了資源儲備，對于促進RA研究的發展具有重要的醫學意義。

［1］溫博，曾升平.類風濕關節炎的研究進展［J］.世界中西醫結合雜志，2014，9（9）:1014-1019.

［2］高薇，魯靜，趙麗娟.炎性細胞因子與類風濕關節炎［J］.中國現代醫學雜志，2007，17（4）:450-457.

［3］董峰.腫瘤血清資源庫在腫瘤臨床研究中的應用［J］.甘肅科技，2008，24（9）:156-158.

［4］楊宗澤，譚維維，譚珺婭，等.華西醫院肝炎病毒血液標本庫的創建［J］.華西醫學，2013，28（5）:752-755.

［5］季加孚.北京大學臨床腫瘤學院腫瘤標本庫的建設［J］.北京大學學報（醫學版），2005，37（3）:329-330.

［6］朱杰，孫忠保.血清標本庫信息系統的建設和應用［J］.公共管理，2013，29（10）:180-181.

Establishment of Rheumatoid Arthritis Serum Specimen Bank and Its Significance

NIU Min-hong，WAN Xiao-chun，YAN Xiao-fei，LV Wei-dong
（The First Affiliated Hospital of Shenzhen University，Shenzhen 518035，China）

Objective To explore the methods to establish a rheumatoid arthritis serum specimen bank and information management system，rational use of resources specimen，which are important to establish a platform for rheumatoid arthritis research. Methods Blood samples were collected from rheumatoid arthritis patients，specimens of serum，plasma and lymphocytes were separated and stored at -80 ℃ after registration. The patient's information was entered into the database. Results326 portions of serum，261 portions of plasma and 213 portions of lymphocyte were collected，the donors' information of epidemiology，clinical records were documented. Conclusion A rheumatoid arthritis serum specimen bank have been established initially，which can provide quality samples and related clinical information for rheumatoid arthritis research.

Rheumatoid arthritis；Serum specimen bank；Establishment

R593.22

B

1671-8194（2015）22-0058-02

深圳大學科研基金資助項目（006023）