基于輸血檢驗的凝聚胺技術(shù)應(yīng)用效果觀察

楊萬濤

（湖北省南漳縣人民醫(yī)院，湖北 南漳 441500）

基于輸血檢驗的凝聚胺技術(shù)應(yīng)用效果觀察

楊萬濤

（湖北省南漳縣人民醫(yī)院，湖北 南漳 441500）

目的對輸血檢驗中采用凝聚胺技術(shù)的效果進行觀察分析。方法采用凝聚胺技術(shù)對我院收集的260例健康體檢人群的血樣進行檢測，比較分析抗球蛋白、木瓜酶和常規(guī)鹽水介質(zhì)等配血試驗，同時選取80例疑難標本進行檢測。結(jié)果凝聚胺技術(shù)靈敏度明顯高于木瓜酶、常規(guī)鹽水介質(zhì)等，比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；凝聚胺技術(shù)能夠快速檢出IgG。結(jié)論凝聚胺技術(shù)在輸血檢驗中使用具有反應(yīng)快速、操作簡便、靈敏度高等優(yōu)勢，有助于減少臨床輸血中溶血性輸血反應(yīng)癥狀的發(fā)生。

輸血檢驗；凝聚胺技術(shù)；應(yīng)用效果

臨床輸血中，準確快速的進行交叉配血試驗有著重要作用，是保證患者搶救成功的重要保證。輸血檢驗有助于減少輸血反應(yīng)，凝聚胺技術(shù)是目前檢出RBC IgG抗體的重要手段[1]，具有靈敏度高、快速、操作簡單等優(yōu)勢，在不規(guī)則抗體篩選、交叉配血等輸血前檢查中使用廣泛，為對凝聚胺技術(shù)在輸血檢驗中的使用價值進行觀察，筆者分別采用酶法、鹽水法、凝聚胺法及抗人球蛋白法等進行觀察，具體報道如下。

1 材料與方法

1.1 使用材料：采用ASK臺灣東耀有限公司提供的Polybrene試劑，廣州血液中心提供的抗人球蛋白血清，菠蘿酶。臺灣（BASO）離心機，使用75 mm×12 mm試管。使用哈藥公司生產(chǎn)的葡萄糖，成都化學(xué)試劑廠提供的乙二胺四乙酸二鈉，上海城關(guān)化工廠提供的疊氮鈉，法國進口的凝聚胺，北京化工廠生產(chǎn)的檸檬酸三鈉，成都臨江化工廠生產(chǎn)的氯化鈉，我研究所自制AB型血清及抗-D。

嚴格按照凝聚胺操作試劑盒說明書進行凝聚胺操作：分別將2滴患者血清加入主管，1滴獻血者3%紅細胞懸液加入側(cè)管，2滴獻血者血清、1滴患者3%紅細胞懸液分別加入次側(cè)管；將低離子介質(zhì)液0.6 mL加入各管內(nèi)，搖勻后，室溫下放置1 min；將2滴Polybrene試分別加入各管內(nèi)，充分搖勻后，3500 r/min離心15 s，取出上清后，輕搖晃試管，對管底內(nèi)是否出現(xiàn)紅細胞凝塊；各管各加重懸液2滴，輕搖后對凝塊進行觀察，是否散開（1 min內(nèi)自然散開為凝聚胺引起的非免疫性凝集，凝塊散開則是由特異性抗原抗體反應(yīng)引起的凝集），此時需要在顯微鏡下進行觀察。木瓜酶試驗、鹽水介質(zhì)試驗、ACT等嚴格按照《血型工作手冊》進行操作。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析：本次研究所有患者的臨床資料均采用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件處理，計量資料采用t檢驗，組間對比采用χ2檢驗，P＜0.05為差異具有顯著性，具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 在260例正常人血液標本中，非特異性凝聚消失時間在10 s內(nèi)共145例，占55.8%；非特異性凝聚消失時間在20 s內(nèi)103例，占39.6%；260例正常人非特異性凝聚均在3 min內(nèi)完成，研究者特異性凝聚均未在3 min內(nèi)消失。

2.2 經(jīng)凝聚胺技術(shù)進行檢驗發(fā)現(xiàn)抗體、需要重復(fù)輸血、配血不合格血液標本共80例，采用鹽水法檢測，未出現(xiàn)不配合標本，檢出率為0，試驗時間約為3～6 min，酶法不配合4例，檢出率為5%，試驗時間約為30 min；抗人球蛋白法不配合7例，檢出率為8.8%，實驗時間為40～60 min；凝聚胺方法不配合10例，檢出率為12.5%，實驗時間為4～6 min。

3 討 論

在臨床治療及搶救中，通過有效正確的輸血，擴大患者血容量對于手術(shù)及治療的順利進行有著重要作用。在進行輸血時，臨床醫(yī)者需要注意同種反應(yīng)問題，保證輸血的有效性[2]。患者輸血后，抗原細胞遭到較大破壞，極易出現(xiàn)嚴重溶血性輸血反應(yīng)，威脅患者的生命安全，同種反應(yīng)能夠誘導(dǎo)輸血有效性的降低。目前檢驗血液交叉配合的手段較多，主要有鹽水法、低分子凝聚胺法、酶法等，而不同的檢驗方法，特點亦不相同。鹽水法操作簡單，得到結(jié)果時間較短，然而在檢測不完全抗體時，效果較差，因此在輸血檢驗中僅采用鹽水法可能會導(dǎo)致不完全抗體引起的輸血反應(yīng)現(xiàn)象的發(fā)生，威脅患者的安全[3]；酶法相較鹽水法能夠有效避免這一危險的發(fā)生，然而其試驗步驟繁瑣，同時操作較為復(fù)雜，消耗時間較長，因此仍然具有一定的局限性[4]。秦江萍等在研究中采用凝聚胺與鹽水法進行比較觀察，結(jié)果顯示鹽水法僅能對完全抗體檢出，而對于ABO之外的抗體，完全無法檢測，凝聚胺法能夠?qū)崿F(xiàn)抗體與紅細胞的反應(yīng)，使得紅細胞表面抗體與帶正電荷的結(jié)合，同時促進了分子的運動，在加入重懸液后，凝聚現(xiàn)象仍然存在；而對于IgG等不規(guī)則抗體，鹽水法無法使其凝聚，而凝聚胺法能夠快速實現(xiàn)其凝聚反應(yīng)的發(fā)生，檢出不規(guī)則抗體效果較好[5]。

凝聚胺作為四胺聚合物，能夠與紅細胞上負電荷進行中和，促使Zeta電位的降低，細胞間距離明顯縮短，從而形成可逆性非特異性紅細胞凝聚現(xiàn)象。當血清及紅細胞在低離子介質(zhì)內(nèi)孵育時，紅細胞相應(yīng)抗原與抗體相結(jié)合，同時在凝聚胺的作用下，積聚呈肉眼可見的凝集；從外表上不能將此類凝集與普通凝集現(xiàn)象進行區(qū)分，然而當加入重懸液后，血液內(nèi)凝聚胺上正電荷與重懸液內(nèi)負電荷互相中和，從而導(dǎo)致普通凝集現(xiàn)象消失，然而真正產(chǎn)生的凝集不會消失[6]。凝聚胺作為近年來輸血檢驗中常用的有效手段，具有操作簡便、靈敏、快速等優(yōu)勢，能夠減少輸血反應(yīng)的發(fā)生。凝聚胺技術(shù)不僅能夠鑒定交叉配血與血型，同時能夠?qū)贵w進行篩選，在溶血性貧血中亦有顯著的使用效果。凝聚胺技術(shù)作為可逆性凝聚反應(yīng)，掌握其非特異性反應(yīng)及特異性反應(yīng)消失時間有著重要作用，因此在實際操作中，操作人員要嚴格掌握檢驗時間，避免假陽性或假陰性的發(fā)生。

從本次研究結(jié)果看，在臨床輸血中，若僅通過鹽水法，則可能導(dǎo)致交叉配血現(xiàn)象的發(fā)生，不完全抗體極易漏診，從而導(dǎo)致受血者出現(xiàn)溶血性輸血反應(yīng)。臨床報道顯示，在對冷抗體及Kell血型系統(tǒng)進行檢驗時，凝聚胺技術(shù)檢出率較低，同時在對部分血漿蛋白紊亂患者進行診斷時，可能出現(xiàn)假陽性檢測結(jié)果等，本次研究中，1例患者經(jīng)醫(yī)院證實，缺失有血漿蛋紊亂病癥，這可能是導(dǎo)致假陽性的重要原因。筆者認為在輸血檢驗中采用凝聚胺技術(shù)時，為保證檢測結(jié)果的準確性，對于結(jié)果為弱陽性標本，盡量采用重懸液重懸，之后采用9%生理鹽水與5% 0.2M枸櫞酸混合液進行3次洗滌，完成后通過抗人球蛋白方法確診。

本次研究結(jié)果顯示，相較鹽水法、抗人球蛋白等方法，凝聚胺技術(shù)具有操作簡單、靈敏準確、快速等優(yōu)勢，在輸血檢驗中使用有著顯著效果，能夠有效避免輸血反應(yīng)的發(fā)生，促進患者康復(fù)。

[1]秦江萍.低離子凝聚胺技術(shù)在臨床輸血檢驗中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代診斷與治療,2012,23(12):2207-2208.

[2]李莎,鄭山根.微柱凝聚技術(shù)篩選不規(guī)則抗體的初步觀察[J].中國輸血雜志,2009,12(3):169-171.

[3]董海偉.輸血檢驗中凝聚胺技術(shù)臨床應(yīng)用分析[J].河南醫(yī)學(xué)研究,2013,22(1):58-60.

[4]高樂俊,王樹誠,石效榮,等.凝聚胺技術(shù)在臨床輸血檢驗中的優(yōu)勢及應(yīng)用研究[J].中國中醫(yī)藥咨訊,2012,4(2):48-49.

[5]劉家瑞,王遠杰,馮寧,等.抗體篩查細胞抗原涵蓋范圍與電子配血技術(shù)的安全應(yīng)用[J].西部醫(yī)學(xué),2013,25(9):1401-1403.

[6]李清,古麗扎爾,李志強.吸收放散試驗在高效價冷凝集素致ABO血型鑒定不符及交叉配血不合的應(yīng)用[J].中國醫(yī)藥科學(xué),2012, 2(22):118-120.

R446.11

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1671-8194（2015）07-0117-02