49例骨髓增生異常綜合征的細(xì)胞形態(tài)學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)分析

常 穎 張 影 陳佳美 曹 慧

（遼寧省錦州市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 錦州 121001）

49例骨髓增生異常綜合征的細(xì)胞形態(tài)學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)分析

常 穎 張 影 陳佳美 曹 慧

（遼寧省錦州市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 錦州 121001）

目的 分析骨髓增生異常綜合征（MDS）的形態(tài)學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)特征。方法 將2012年～2014年本院確診的49例MDS臨床和血液學(xué)特征進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果 MDS病例的血涂片及骨髓涂片中粒、紅、巨三系均存在不同程度的病態(tài)造血，在可供細(xì)胞遺傳學(xué)分析的31例患者中，染色體核型異常檢出率為51.6%（15/31例），其中單一異常53.3%（8/31），兩種異常33.3%（5/31），復(fù)雜異常13.3%（2/31），最常見的克隆性異常是+8，其余依次為-7/del（7q），5q-/del（5）（q13），5q-/del（5）（q22q35），5q-/del（5）（q11q15），del（20）（q11），del（18）（q21），+16（q24）），-6，-15，-17，+21（p11）。結(jié)論 細(xì)胞形態(tài)學(xué)是MDS最重要、最基礎(chǔ)的診斷手段，細(xì)胞遺傳學(xué)是MDS的確診條件之一，同時(shí)，也是判斷預(yù)后以及制定治療策略的主要依據(jù)。

骨髓增生異常綜合征；形態(tài)學(xué)；遺傳學(xué)；染色體異常

骨髓增生異常綜合征（myelodysplastic syndrome，MDS）是一組異質(zhì)性、克隆性造血干細(xì)胞疾病，表現(xiàn)為一系或多系發(fā)育異常和無效造血，部分高危患者可發(fā)展為急性白血病[1-2]，細(xì)胞形態(tài)學(xué)及細(xì)胞遺傳學(xué)檢測對(duì)于MDS的診斷、治療及預(yù)后具有重要意義。本文將我院2012年～2014年收治的49例MDS的細(xì)胞形態(tài)學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)特征進(jìn)行回顧性分析。

1　資料與方法

1.1一般資料：收集本院2012年1月至2014年12月的確診MDS病例49例，其中，男性28例，女性21例；年齡32～85歲，中位年齡58.5歲。依據(jù)2008年WHO診斷分型標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行分型。

1.2方法

1.2.1細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查方法：所有病例均選擇合適的骨髓涂片與外周血涂片，進(jìn)行Wright-Giemsa染色，骨髓片分類500個(gè)有核細(xì)胞，外周血分類100個(gè)有核細(xì)胞，計(jì)算各系細(xì)胞的比例，進(jìn)行形態(tài)學(xué)分析。根據(jù)WHO腫瘤分類及診斷標(biāo)準(zhǔn)，各系細(xì)胞有病態(tài)改變的定量標(biāo)準(zhǔn)為形態(tài)異常的細(xì)胞數(shù)≥該系細(xì)胞總數(shù)的10%。

1.2.2染色體制備及分析方法：MDS患者核型應(yīng)用骨髓細(xì)胞短期培養(yǎng)法和R顯帶技術(shù)，參照《人類細(xì)胞遺傳學(xué)國際命名體制（ISCN1995）》進(jìn)行核型描述，至少2個(gè)細(xì)胞具有同樣的染色體增加或結(jié)構(gòu)重排，或者3個(gè)細(xì)胞有同樣的染色體丟失方可確認(rèn)為一個(gè)異常克隆。

1.3分型：根據(jù)2008年WHO診斷分型標(biāo)準(zhǔn)，各亞型分布情況，難治性貧血（RA）12例（14.2）；難治性貧血伴環(huán)狀鐵粒幼細(xì)胞（RAS）6例（12.7）；難治性血細(xì)胞減少伴有多系發(fā)育異常（RCMD）7例，難治性貧血伴原始細(xì)胞過多-I型（RAEB-I）12例，難治性貧血伴原始細(xì)胞過多-Ⅱ型（RAEB-II）9例，MDS伴有單純del（5q）3例。

2　結(jié) 果

2.l 血細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察：外周血涂片中找到幼稚粒細(xì)胞37例，有核紅細(xì)胞19例，細(xì)胞的病態(tài)改變：粒細(xì)胞可見Pelger-Huet畸形、成熟粒細(xì)胞胞質(zhì)顆粒減少或增粗以及過多分葉現(xiàn)象，可見巨大血小板，成熟紅細(xì)胞中可見大紅細(xì)胞及嗜多色性紅細(xì)胞。

2.2骨髓象：骨髓涂片中增生明顯活躍和活躍40例（81.6%），減低9例（18.4%）。粒/紅比正常10例（20.4%），減低19例（38.8%），增高20例（40.8%）；一系病態(tài)造血10例（20.4%），二系病態(tài)造血22例（44.9%），三系病態(tài)造血17例（34.7%）。其中粒系可見中晚幼粒以下階段細(xì)胞核漿發(fā)育不平衡、胞質(zhì)顆粒粗大或明顯減少、缺如，出現(xiàn)內(nèi)外漿，有“黃沙土”樣改變。可見Pelger-Huet畸形核異常或分葉過多，大多有核左移，41例（83.7%）可見雙核粒細(xì)胞。12例（24.5%）有Auer小體，在RAEB（Ⅰ和（Ⅱ）病例的髓象中大多可見原始細(xì)胞“簇”的現(xiàn)象。紅系可見類巨幼樣變、奇數(shù)核、花瓣紅、豪周氏小體、點(diǎn)彩晚幼紅，14例（28.6%）可見巨大的成熟紅細(xì)胞}，49例患者全部行鐵染色外鐵大多為++～+++，內(nèi)鐵陽性率明顯增高，平均鐵粒幼細(xì)胞陽性率68.5%，11例有環(huán)鐵，其中6例RAS鐵粒幼細(xì)胞環(huán)鐵>15，；巨核系可見增生程度不等，可見核多分葉，單圓、多圓核巨核細(xì)胞以及小巨核細(xì)胞，血小板大多散在或偶見，可見巨大血小板。

2.3細(xì)胞遺傳學(xué)：在49例患者中，我們對(duì)可供檢測的31例MDS患者進(jìn)行染色體核型分析，發(fā)現(xiàn)染色體核型異常檢出率為51.6%（15/31），其中單一異常53.3%（8/31），兩種異常33.3%（5/31），復(fù)雜異常13.3%（2/31），最常見的克隆性異常是+8其余依次為-7/del（7q），5q-/del（5）（q13），，5q-/del（5）（q22q35），5q-/del（5）（q11q15），del（20）（q11），del（18）（q21），+16（q24），-6，-15，-17，+21（p11）。

3　討 論

MDS是多種病因所致的一組表現(xiàn)多樣、轉(zhuǎn)歸不一的臨床血液學(xué)綜合征，全血細(xì)胞減少是MDS患者最普遍、最基本的表現(xiàn)，在診斷時(shí)需結(jié)合患者的病史、血細(xì)胞形態(tài)和骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)等，特別是結(jié)合細(xì)胞遺傳學(xué)檢測結(jié)果進(jìn)行分析。在MDS患者中，半數(shù)以上患者骨髓及外周血中可出現(xiàn)原始細(xì)胞，絕大多數(shù)患者的細(xì)胞形態(tài)存在明顯的病態(tài)改變，并根據(jù)病情的進(jìn)展病態(tài)細(xì)胞增多，病態(tài)細(xì)胞累及紅系、粒系、以及巨核系的細(xì)胞，但有少數(shù)患者在初診時(shí)骨髓與外周血中未出現(xiàn)原始細(xì)胞，且細(xì)胞病態(tài)改變不明顯，這時(shí)在技術(shù)人員對(duì)細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行仔細(xì)辨認(rèn)和分類計(jì)數(shù)的同時(shí)，需要結(jié)合細(xì)胞遺傳學(xué)方法，檢測出染色體的異常，以便進(jìn)一步診斷，大約半數(shù)的MDS患者在初診時(shí)即可檢測出染色體的異常，隨著病程的進(jìn)展可高達(dá)80%，克隆性的染色體核型異常是最主要的克隆性造血證據(jù)，是MDS的確診條件之一，同時(shí)，也是判斷預(yù)后以及治療策略制定的主要依據(jù)。通過研究，在MDS中已發(fā)現(xiàn)數(shù)百種重現(xiàn)性細(xì)胞遺傳學(xué)異常。在WHO（2008）標(biāo)準(zhǔn)中明確了MDS的重現(xiàn)染色體異常：①非平衡異常包括+8，-7或del（7q），-5或del（5q），del（20q），-Y，i（17q）或t（17p），-13或del（13q），del（1lq），del（12p），或t（12p），del（9q），idic（X）（q13），其中+8，del（20q）和一Y，在不符合形態(tài)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)的情況下不能作為MDS的確診依據(jù)；②平衡異常包括t（1l；16）（q23；p13.3），t（3；21）（q26.2；q22.1），t（1；3）（p36.3；q21.1），t（2；11）（p21；q23），inv（3）（q21q26.2），t（6；9）（p23；q34）。我們對(duì)染色體核型可供分析的31例MDS患者的分析發(fā)現(xiàn)，非平衡異常占到總的染色體異常的90%左右，符合國內(nèi)[3-4]報(bào)道的平衡異常僅占不到10%，常見染色體數(shù)目及染色體臂的異常頻次與西方國家的-5/5q-、-7/7q-、+8、-20/20q-也有所不同，可能是源于人種和地域的差異。盡管MDS中的細(xì)胞遺傳學(xué)異常與AML中的異常一樣重要，但二者之間不同在于AML中細(xì)胞遺傳學(xué)異常的特點(diǎn)是平衡易位，可以通過熒光原位雜交（FISH）和其他方法來確定特異性基因重排；而在MDS中，細(xì)胞遺傳學(xué)異常主要表現(xiàn)為不同斷裂點(diǎn)的染色體缺失和數(shù)條染色體的異常，因此在大多數(shù)情況下并不清楚哪些特定基因?qū)Ρ硇推饹Q定作用。

[1] Update on developments in the diagnosis and prognostic evaluation of patients with myelodysplastic syndromes(MDS):consensus statements and report from an expert workshop[J].Leuk Res,2012,36(2):264-270.

[2] Cogle CR,Craig BM,Rollison DE,et al.Incidence of the myelodysplastic syndromes using a novel claims-based algorithm: high number of uncaptured cases by cancer registries[J].Blood,2011,117(16):7121–7125.

[3] 張之南.血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)[M].3版.北京:科學(xué)技術(shù)出版社, 1998.

[4] 肖志堅(jiān).骨髓增生異常綜合征的細(xì)胞形態(tài)學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)[J].臨床血液學(xué)雜志,2014,27(1):8-10.

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1671-8194（2015）32-0187-02