兒童急性白血病與TORCH和EB病毒感染

林 濤，陳煥輝，陳 翊，劉曉敏，鄺間玲，連廣琬,朱 冰

(廣州市婦女兒童醫療中心中心實驗室，廣東 廣州 510120)

兒童急性白血病與TORCH和EB病毒感染

林 濤，陳煥輝，陳 翊，劉曉敏，鄺間玲，連廣琬,朱 冰

(廣州市婦女兒童醫療中心中心實驗室，廣東 廣州 510120)

目的 了解兒童急性白血病(AL)患兒TORCH感染和EB病毒感染狀況。方法 選取經骨髓細胞形態檢測確診的120例新發急性淋巴細胞性白血病(ALL)和50例急性髓細胞白血病(AML)患兒為研究對象，收集患兒血清TORCH、EB病毒免疫球蛋白M(IgM)抗體檢測結果，和患兒外周血白細胞計數結果，分白血病類型及年齡組與正常對照組進行分析。結果 ALL患兒120例(70.59%)，AML患兒50例(29.41%)；AL患兒各年齡組患病比例：0～4歲組57.65%、5～9歲組30.00%、10～15歲組12.35%；ALL患兒巨細胞病毒(CMV)、風疹病毒(RV)、弓形蟲(TOX)、單純皰疹病毒(HSV)、EB病毒的感染率分別為：2.50%、3.33%、1.67%、18.33%、6.67%；ALL患兒CMV、RV、TOX、HSV的感染率分別為：12.00%、8.00%、10.00%、32.00%、4.00%；AL患兒TORCH和EB病毒感染率均高于正常兒童對照組(χ2值分別為4.111、42.69、7.202、20.884、1.035，均P<0.05)。患兒同時存在一種或以上病原體感染、白血病患兒是否感染病原體與外周血白細胞計數高低無差異(均P>0.05)。結論 兒童白血病的預防要從母體懷孕前做起。

兒童；急性白血病；TORCH；EB病毒；感染

白血病是兒童最常見的惡性腫瘤之一，也是兒童期主要死亡原因[1-2]。其致病因素及發病機制至今尚未完全清楚。病毒感染與人類腫瘤有密切的關系，但對于病毒感染可導致兒童白血病存在爭議[3]。TORCH是一組可引起孕婦宮內感染的微生物的總稱，包括巨細胞病毒(cytomegalo virus，CMV)、單純皰疹病毒(herpes simplex virus，HSV)、風疹病毒(rebulla virus，RV)、弓形蟲(toxoplasma，TOX)。EB病毒(Epstein-Barr virus，EBV)系皰疹病毒科嗜淋巴病毒屬，EBV具有感染人和某些靈長類動物B細胞的專一性，并能使受感染細胞轉化，無限傳代到“永生”。為了了解病原體感染與兒童白血病的關系，本研究收集了170例新發確診兒童急性白血病(acute leukemia，AL)病例的病原體感染結果進行分析，結果報告如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2011年至2013年期間在廣州市婦女兒童醫療中心經骨髓細胞形態檢測診斷，符合張之南血液病診治標準確診的AL病例。共選取120例新發急性淋巴細胞性白血病(acute lymphocytic leukemia，ALL)和50例急性髓細胞白血病(acute myeloid leukemia，AML)病例，患兒年齡最小10個月，最大15周歲。平均年齡4.91±2.98歲。將AL病例分為3個年齡組，分別是0～4歲組、5～9歲組和10～15歲組。正常兒童對照組在體檢兒童和擇期外科手術患兒中選取，年齡分布與病例組一致。其中TORCH正常兒童對照組857例，平均年齡4.09±4.09歲；EB病毒正常兒童對照組461例，平均年齡4.54±3.43歲。收集白血病患兒TORCH和EB病毒五類病原體血清IgM抗體數據和外周血常規白細胞計數數據。

1.2 病原體抗體檢測方法

病原體抗體采用間接酶聯免疫吸附法，TORCH特異性抗體IgM使用美國TRINTI的檢測試劑盒，EB病毒抗體IgM使用德國歐盟的檢測試劑盒，實驗過程嚴格按說明書操作，使用試劑盒配套質控品。結果按樣品的吸光度值與標準品吸光度值的比值判斷，比值<0.91為陰性，比值>1.1為可陽性。

1.3 外周血白細胞計數

采用SE2100血細胞分析儀檢測外周血白細胞(WBC)計數，WBC計數判斷標準為：白細胞減少(WBC<5×109/L) ；白細胞增高(WBC≥12×109/L)。

1.4 統計學方法

采用SPSS 17.0統計軟件對結果進行數據分析。比率比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兒童急性白血病的臨床分型及兩類白血病性別與年齡的分布

170例中，ALL120例(70.59%)，AML50例(29.41%)。發病率比較，男性高于女性，差異無統計學意義(χ2=0.781，P>0.05)，見表1。患病比例隨年齡增長有下降，0～4歲組兒童患病比例最高，各年齡組患病比率無差異(χ2=5.844，P>0.05)，見表2。

2.2 兒童急性白血病病原體感染情況

兩類AL患兒有不同比例的病原體感染，見表3；檢出有一種病原體感染者37例(21.76%)，其中CMV 2例，HSV 24例，RV 4例，TOXO 1例，EB病毒6例。兩種或以上病原體混合感染者16例(9.41%)，混合感染組合有：CMV+HSV 3例，CMV+RV 1例，CMV+EB病毒1例，HSV+TOX 5例，HSV+RV 2例，HSV+EB病毒2例，CMV+HSV+EB病毒1例，CMV+TOX+RV+HSV 1例。白血病組與正常對照組5類病原體感染率比較有差異(P<0.05)，見表4。

表1 不同性別ALL和AML發病率比較

Table 1 Comparison of morbidity of ALL and AML between different genders

表2 年齡與AL的發病分布

Table 2 Occurrence of AL among children in different age groups

注：*指TOUCH組857例；EB病毒組461例。

2.3 各年齡組病毒感染情況

CMV和EB病毒感染主要在0～4歲組；HSV感染主要在9歲以下各年齡；RV感染率在5～9歲組高于低年齡組；TOX在各年齡組均有感染，感染率與年齡成正比，見表5。

2.4 兩類白血病病例外周血白細胞計數結果

新發白血病患兒外周血白細胞計數大部分異常，兩類AL外周血白細胞計數以升高為主。其中ALL患兒外周血白細胞計數增高61例(51.1%)，其中感染病原體16例(26.2%)，平均白細胞97.85×109/L；白細胞計數降低31例(25.8%)，其中感染病原體12例(38.7%)，平均白細胞3.33×109/L；白細胞計數正常28例(23.3%)，其中感染病原體4例(14.3%)，平均白細胞7.68×109/L。AML患兒外周血白細胞計數增高30例(60.0%)，其中感染病原體12例(40.0%)，平均白細胞37.18×109/L；白細胞計數降低12例(24.0%)，其中感染病原體7例(53.8%)，平均白細胞2.70×109/L； 白細胞計數正常8例(16.0%)，其中感染病原體2例(25.0%)，平均白細胞9.04×109/L。兩類白血病患兒白細胞數量高低與患兒是否感染5類病原體比較差異均無統計學意義(均P>0.05)，見表6。

表6 兩組患兒白細胞情況比較

Table 6 Comparison of WBC between two groups

3 討論

3.1 170例新發白血病病例病原體感染現狀

本研究收集了170例確診新發AL患兒，其中ALL(120例，70.59%)高于兒童AML(50例，29.41%)；男性兒童患病比例高于女性兒童，性別比為2.4:1；高發年齡段在0～4歲(57.65%)，隨年齡的增長，AL患兒發病比例下降，結果顯示與國內外報道一致[4-5]，兩類AL患兒在各年齡組的發病比例無顯著性差異。

各類病原體感染特異性IgM抗體在疾病發作初期即升高，1～4周內達到最高峰，由于IgM抗體早出現和相對較短的半衰期，因此可允許在急性感染期采用單個血清標本作為診斷。本研究所顯示170例AL患兒五類病原體感染率均高于正常兒童對照組，有統計學差異。170例新發AL患兒均在確診發病期同時檢測五類病原體特異性IgM抗體和外周血白細胞計數，病原體IgM抗體作為相應的病原體感染指標。兩類AL均存在不同比例的病原體感染，HSV在兩類AL患兒中的陽性率最高(22.35%)，共有38例感染，其他病原體的陽性檢測率依次是：EB5.88%、CMV5.29%、RV4.71%、TOX4.12%；單獨感染HSV有24例，EB病毒6例，RV4例，CMV2例，TOX1例；并存在同時兩類以上病原體混合感染；CMV和TOX兩種病原體陽性率在兩類AL患兒中比較有差異。各年齡組病原體感染除TOX外，主要發生在9歲以下各年齡。AL發病期，外周血白細胞計數以異常為主，主要是白細胞計數升高。

3.2 病原體感染與白血病的發生

感染一直被懷疑和癌癥密切相關，反復發生的炎癥作用和慢性感染會大大提高癌癥的發病率。人類T淋巴細胞白血病病毒I型(HTLV-1)與成人白血病發病的關系已得到證實[6]，由此亦引起學者們對病毒感染在兒童急性淋巴細胞白血病發病過程中作用的關注。Greaves(1988年)和Smith等(1997年)研究提出部分AL的發生起源于子宮內感染，尤其是急性淋巴細胞白血病，由此可發現母親孕期的感染與其子女發生白血病有關，同時推測出生后的感染對白血病的發病是必需的條件。

TORCH相關病原體感染可使孕婦癥狀輕微或無明顯癥狀，卻可使胎兒受到不同程度的損害，導致出生后明顯或隱形的缺陷。HSV有1型和2型，l型多見于原發感染，主要引起頭面部皮膚、黏膜感染，2型多見于繼發性感染，主要感染生殖器和腰以下皮膚，以性接觸為主要傳播途徑，HSV主要經產道上行感染胎兒。CMV是皰疹病毒科中基因組最大的一種，在全世界不同種族人群尤其在亞洲和非洲人群中血清抗體陽性率可達90%～100%，CMV在人群中普遍易感，一般在童年獲得，免疫力正常者多為隱性感染，可終身攜帶病毒，感染無癥狀，孕期感染可導致新生兒明顯或遲發性的先天性不正常。TOX是一種雙孢子球蟲寄生蟲，人可從多種途徑感染，TOX感染可致的人畜共患的寄生蟲病，呈世界性分布。RV系披膜病毒科RV屬的惟一成員，其長期存在于感染細胞內，是造成先天性RV感染嚴重后果的重要原因，通常引起兒童或青少年不明顯或緩和的癥狀。EB病毒屬于皰疹病毒科γ 亞科，在人群中廣泛傳播，90%以上的成人血清EBV抗體陽性[7]。6歲以下兒童原發性EB感染大多表現為無癥狀感染或僅表現為上呼吸道癥狀等非特異性表現。Lehtinen等(2003年)報道對芬蘭和冰島兩國550 000位母親進行病例對照巢式隊列研究，檢測其巨細胞病毒、EB病毒、人類皰疹病毒6的抗體以及EB病毒的DNA，并對其后代追蹤15年，結果發現，EBV IgG和IgM同時陽性的母親，是ALL的危險因素(OR=2.9，95%CI：1.5～5.8)，表明母親EBV感染與兒童白血病有關。另有文獻報道EBV病毒感染與單體染色體7相關，并致急性白血病預后較差[8]。盧愿等[9]研究所得結論ALL患兒EB病毒感染率高于正常對照組，與本研究結論相同。

3.3 建議

白血病發病前的臨床癥狀大部分是感染或貧血，且在診斷前幾周才出現臨床癥狀，本研究收集的病例是排除了因AL治療期間患兒免疫系統損傷，導致的繼發性病毒感染，但不排除發病前相關病原體的重復感染。本研究顯示AL患兒五類病原體感染除弓形蟲外均以低年齡組感染為主，患兒存在不同比例的TORCH相關病原體和EB病毒的單獨或混合感染，TORCH感染在急性髓系細胞白血病比率高于ALL，EB病毒感染率則相反。AL患兒是否感染五類病原體與白血病發病期的外周血白細胞數量并無相關。

白血病的發病機制十分復雜，本研究所做分析得出的結論在白血病患兒感染TORCH和EB病毒均高于對照組兒童，幼兒更易受病原體感染。從病毒感染方面預防白血病的發生除提高兒童抵抗外界病原體感染外，還要從母親懷孕前期就要關注。

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[4]曹卡加,劉奕龍,馬國勝.廣州市城區2000～2004年兒童惡性腫瘤發病和死亡率分析[J].癌癥,2010,29(3):359-362.

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[9]盧愿,孫立榮,仲仁,等.急性淋巴細胞白血病并EB病毒感染的臨床分析[J].實用兒科臨床雜志,2011,26(3):180-182182,224.

[專業責任編輯：潘凱麗]

Research on infection of TORCH and EBV in children with acute leukemia

LIN Tao, CHEN Huan-hui, CHEN Yi, LIU Xiao-min, KUANG Jian-ling, LIAN Guang-wan，ZHU Bing

(GuangzhouWomenandChildren’sMedicalCenter,GuangdongGuangzhou510120,China)

Objective To understand the infection with TORCH and EB virus in children with acute leukemia (AL). Methods Totally 120 newly-onset cases diagnosed with acute lymphocytic leukemia (ALL) confirmed by bone marrow cell morphology test were selected, and 50 cases of acute myeloid leukemia (AML) were recruited in the study. Serum specific immunoglobulin M (IgM) antibody was detected with ELISA for EB virus and TORCH (cytomegalo virus (CMV), herpes simplex virus (HSV), rubella virus (RV) and toxoplasma (TOXO)), and WBC of peripheral blood was tested for analysis in terms of AL type and age with normal control groups. Results There were 120 cases of ALL (70.59%) and 50 cases of AML (29.41%). Among cases of AL, 57.65% were children aged 0-4 years, 30.00% were children aged 5-9 years and 12.35% were children aged 10-15 years. The infection rate of CMV, RV, TOXO, HSV and EBV among ALL cases was 2.50%, 3.33%, 1.67%, 18.33% and 6.67%, respectively, while it was 12.00%, 8.00%, 10.00%, 32.00% and 4.00% among AML cases, respectively. Children were infected with one or more virus. Whether children with AL was infected was not correlated with peripheral WBC (bothP>0.05). The infection rates of TORCH and EB among AL cases were higher than those among normal controls (χ2value was 4.111, 42.69, 7.202, 20.884 and 1.035, respectively, allP<0.05), and the proportion of cases infected with TORCH and EB was different. Conclusion The preventive measures for AL should be taken before pregnancy.

children; acute leukemia (AL); TORCH; Epstein-Barr virus (EBV); infection

2014-11-13

林 濤(1974-)，女，主管技師，主要從事病毒學研究。

朱 冰，主任醫師。

10.3969/j.issn.1673-5293.2015.06.031

R725

A

1673-5293(2015)06-1207-04