金佛山地區(qū)三種升麻化學(xué)成分的初步研究

羅　川　章文偉　譚秋生　羅　舜　鄧才富重慶市藥物種植研究所，重慶　南川　408435

金佛山地區(qū)三種升麻化學(xué)成分的初步研究

羅川章文偉譚秋生羅舜鄧才富*
重慶市藥物種植研究所，重慶南川408435

【摘要】目的:對(duì)重慶金佛山地區(qū)升麻、小升麻和南川升麻三種升麻的化學(xué)成分進(jìn)行初步研究。方法:在三種升麻生物堿、皂苷、黃酮、有機(jī)酸存在判定基礎(chǔ)上，分別測(cè)定四種大類的含量。結(jié)果:三種升麻的生物堿與有機(jī)酸的含量呈明顯的負(fù)相關(guān)關(guān)系，金佛山地區(qū)三種升麻的生物堿、總皂苷和總黃酮含量分布一致，以南川升麻的含量最高。結(jié)論:研究結(jié)果可為南川升麻的保護(hù)性研究提供科學(xué)依據(jù)，對(duì)金佛山地區(qū)升麻藥材的野生撫育栽培提供支持。

【關(guān)鍵詞】升麻;小升麻;南川升麻;化學(xué)成分

升麻屬(Cimicifuga)植物為毛茛科(Ranunculaceae)多年生草本[1]，大多可作藥用。升麻始載于《名醫(yī)別錄》，是一味常用中藥。李時(shí)珍曰:“其葉似麻，其性上升，故名。”升麻性味甘、辛、微寒，入肺、脾、胃經(jīng)。升麻具有清熱解毒、升舉陽氣、發(fā)表透疹的功效，主治風(fēng)熱頭痛、齒痛、咽喉痛、子宮脫垂等癥[2]。藥理研究表明，升麻屬植物所含的異阿魏酸(IFA)和阿魏酸(FA)具有抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛、抗?jié)儭⒔祲骸㈡?zhèn)靜、解痙、抗驚厥、抑制核苷轉(zhuǎn)運(yùn)及抗病毒等作用[3－4]。其藥理活性成分主要分布大類為生物堿類、皂苷類、黃酮類、有機(jī)酸類[5]。

重慶市金佛山為國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)，是我國(guó)中亞熱帶常綠闊葉林森林生態(tài)系統(tǒng)保存最完好的地區(qū)之一，共有植物資源5000余種。有小升麻、短果升麻、升麻、南川升麻、單穗升麻等分布[6]，其中小升麻、升麻、南川升麻三個(gè)品種分布較為集中，在海拔1400～1800m區(qū)域相互交錯(cuò)。通過對(duì)金佛山幾種升麻主要化學(xué)成分的研究，為以后進(jìn)一步的研究工作打下基礎(chǔ)。

1　儀器與材料

1.1儀器梅特勒(上海)AL－104型分析天平; JA21002型上海越平電子天平;上海龍躍DHG－9623A型立式鼓風(fēng)干燥器;北京興時(shí)利和ZN－08中藥粉碎機(jī);上海摩爾MoLecuLar標(biāo)準(zhǔn)智能型純水機(jī); SmartTester CP－401型酸度計(jì);攪拌器;索氏提取器;抽濾器。

1.2材料藥材采自重慶金佛山北坡地區(qū)，經(jīng)項(xiàng)目組鄧才富副研究員鑒定分別為升麻C.foetida Linn、小升麻C.acerian(Sieb.Et Zucc.)Tanaka和南川升麻C.nanchuanensis Hsiao三種;所用試劑均為分析純;水為現(xiàn)制純水。

2　方法與結(jié)果

2.1生物堿的測(cè)定

2.1.1生物堿存在判定碘化鉍鉀試驗(yàn):取試樣的稀酸水溶液1ml，加碘化鉍鉀試劑1～2滴，顏色為棕黃色至棕紅色，屬陽性反應(yīng);碘液試驗(yàn):取樣品水溶液1ml，加碘－碘化鉀試劑1～2滴，生成沉淀為褐色或暗褐色，屬陽性反應(yīng);雷氏銨鹽試驗(yàn):取試樣的稀酸水溶液(pH3～4)1ml，加2%雷氏銨鹽試劑，生成沉淀為黃紅色，屬陽性反應(yīng);苦味酸試驗(yàn):取試樣的中性水溶液，加苦味酸飽和水溶液一滴，生成沉淀為黃色，屬陽性反應(yīng)。

2.1.2生物堿含量測(cè)定取樣品粉末50g，置于1000ml錐形瓶中，加入水約600ml，用20%鹽酸調(diào)至pH為2，浸泡過夜，尼龍布過濾，得濾液，用濃氨水調(diào)pH至8～9，然后迅速用氯仿萃取得到氯仿液，無水硫酸鈉干燥，回收氯仿至干，得總生物堿(油狀物)，同時(shí)做空白。

2.2有機(jī)酸的測(cè)定

2.2.1有機(jī)酸存在判定取粗粉5g，加10倍量水，回流提取2次，1h/次，過濾，合并提取濾液，取適量濾液，測(cè)其pH值，為弱酸性。

2.2.2有機(jī)酸含量測(cè)定分取樣品20g兩份，用索氏提取器，加10倍量95%甲醇，用水浴加熱回流提取2次，5h/次;將提取液轉(zhuǎn)移到500ml容量瓶中，用95%甲醇定容，用移液管準(zhǔn)確吸取50ml提取液于錐形瓶中;用NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定。同時(shí)做空白試驗(yàn)。

2.3皂甙的測(cè)定

2.3.1皂甙存在判定取藥材粗粉5g，加10倍量水，回流提取2次，1h/次，過濾，合并提取濾液，振搖后生成的氣泡在15min內(nèi)不消失，屬陽性反應(yīng)。

2.3.2皂苷含量測(cè)定取兩份樣品各20g，先用石油醚脫脂;將水液倒入索氏提取器，加入95%乙醇200ml，水浴加熱回流2次，5h/次;將提取液濃縮后加入丙酮，進(jìn)行過濾(以100ml為量，反復(fù)多次加入，以不再產(chǎn)生沉淀為止);干燥沉淀，稱量得總皂苷。

2.4黃酮的測(cè)定

2.4.1黃酮存在判定取樣品粗粉10g，加5倍95%乙醇及60%乙醇在水浴上分別回流2次，1h/次，過濾，合并提取濾液，(取濾液濃縮成浸膏)加少量1～2%鹽酸溶液過濾，附在濾紙上的殘?jiān)陨倭恳掖既芙猓靡掖家?取乙醇液適量置試管中，加少許鎂粉振搖，再滴加幾滴濃鹽酸，水浴上加熱1～2min，觀察顏色有明顯變化，屬陽性反應(yīng);取乙醇液適量滴于濾紙上，與1%三氯化鋁乙醇液紙斑反應(yīng)后，置于紫外燈下觀察，有明顯熒光，屬陽性反應(yīng)。

2.4.2黃酮含量測(cè)定稱取1.5g的石灰粉(CaO)，置于干凈的小研缽中，加入10ml水后研成乳液備用;將樣品20g置于500ml燒杯中，加水300ml，在攪拌下加入上述制備的石灰乳，調(diào)節(jié)pH值至8～9，加熱至微沸，維持pH值至30min，趁熱抽濾;棄去濾渣，冷至60～70℃，用濃HCL調(diào)節(jié)pH至4～5，靜置1h，析出粗制蘆丁，抽濾，棄去濾液，收集粗制蘆丁;將粗制蘆丁懸浮于蒸餾水中，加熱煮沸15min，然后趁熱過濾，棄去不溶物，充分靜置，過濾，收集蘆丁結(jié)晶，在60～70℃條件下干燥，得精制蘆丁。

2.5不同品種升麻的化學(xué)成分含量不同品種升麻四類化學(xué)成分差異較大。生物堿含量與有機(jī)酸呈明顯的負(fù)相關(guān)關(guān)系，結(jié)果見表1。

3　結(jié)論與討論

研究對(duì)金佛山地區(qū)在海拔1400～1800 m區(qū)域分布較為集中的升麻、小升麻和南川升麻三個(gè)品種的生物堿、有機(jī)酸、總皂苷和總黃酮含量進(jìn)行了初步研究，從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，除生物堿與有機(jī)酸的含量呈明顯的負(fù)相關(guān)關(guān)系外，金佛山地區(qū)三種升麻的生物堿、總皂苷和總黃酮含量分布一致，都以南川升麻的含量最高，其中南川升麻的生物堿含量是小升麻的2.5倍左右，是升麻的4倍多，優(yōu)勢(shì)明顯。

南川升麻為金佛山地區(qū)的特有種，只在金佛山北坡海拔1700m以上的地區(qū)有少量分布[7]。本研究的結(jié)果可以為南川升麻的保護(hù)性研究提供科學(xué)依據(jù)，同時(shí)對(duì)金佛山地區(qū)升麻藥材的野生撫育栽培提供支持。

參考文獻(xiàn)

[1]中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì)．中國(guó)植物志(第27卷)[M]．北京:科學(xué)出版社，1979: 93－103．

[2]潘瑞樂，陳迪華，斯建勇．升麻地上部分化學(xué)成分研究[J]．藥學(xué)學(xué)報(bào)，2003，38(4): 272．

[3]國(guó)家藥典委員會(huì)．中華人民共和國(guó)藥典(一部)[M]．北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010: 50．

[4]《全國(guó)中草藥匯編》編寫組．全國(guó)中草藥匯編(上冊(cè))[M]．北京:人民衛(wèi)生出版社，1979: 220．

[5]劉穎，張小茜．升麻質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究[J]．中草藥，2005，36(9): 1402－1404．

[6]劉正宇．重慶金佛山生物資源名錄[M]．重慶:西南師范大學(xué)出版社，2007: 70．

[7]羅川，鄧才富，劉開陽，等．南川升麻化學(xué)成分的初步研究[J]．現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐，2010，24(5): 38－39．

收稿日期:( 2014.10.27)

通信作者:鄧才富，副研究員，E－mail: dcf0509@126.com

作者簡(jiǎn)介:羅川(1982－)，男，重慶南川人，助理研究員，主要從事中藥化學(xué)質(zhì)量研究。

基金項(xiàng)目:重慶市科委基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)資助。

【文章編號(hào)】1007－8517(2015)03－0023－02

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

【中圖分類號(hào)】R284.1