侵襲性真菌感染的實驗室診斷

杜 洋

（江蘇省徐州醫學院附屬第三醫院檢驗科，江蘇 徐州 221003）

侵襲性真菌感染的實驗室診斷

杜 洋

（江蘇省徐州醫學院附屬第三醫院檢驗科，江蘇 徐州 221003）

目的探討醫院侵襲性真菌感染的菌株分布特點。方法收集2012年1月至2013年12月，我院住院及門診送檢標本共計1000份，測定侵襲性真菌感染情況，并統計菌株種類分布、來源以及科室分布。結果 本組1000份標本，共檢出真菌249株（24.9%），其中，假絲酵母菌屬占93.6%，絲狀真菌占6.4%；檢出真菌主要分離自痰液（77.5%）、尿液（6.4%）和糞便（5.2%）標本；科室主要分布在呼吸科、心血管內科、ICU等。結論醫院侵襲性真菌感染主要是假絲酵母菌感染，感染流行病學呈現變性趨勢，曲霉菌屬以及非白色假絲酵母菌感染率呈上升趨勢。

侵襲性真菌感染；醫院感染；病原菌

醫院感染是影響臨床治療方法選擇以及治療效果的主要因素，目前，醫院感染控制已成為臨床工作的重點內容之一。近年來，隨著各類免疫抑制劑、糖皮質激素以及廣譜抗菌藥物在臨床中的廣泛應用，侵襲性真菌感染的發生率呈現逐漸上升趨勢，增加了臨床治療的難度［1］。本研究檢測分析了2012至2013年我院侵襲性真菌感染情況，并分析了其病原菌分布以及菌株來源，旨在為醫院感染控制以及臨床診療工作提供參考，報道如下。

1　材料與方法

1.1標本來源：收集2012年1月至2013年12月，我院住院及門診送檢標本共計1000份，其中，611份來自男性，389份來自女性，年齡在2～86歲，平均為（48.5±4.2）歲，其中，603例（60.3%）≥60歲。主要標本為痰液、尿液、糞便、血液、分泌物、咽拭子、引流液、胸腹水、膽汁、腦脊液，對于同一患者的同一標本經多次分離出相同菌株者，記錄為1株。

1.2儀器與試劑：檢測儀器均應用恒星科技血培養檢測儀，科瑪嘉假絲酵母菌屬顯色培養基以及薩布羅培養基均選自法國生物梅里埃公司。

1.3方法

1.3.1涂片鏡檢：標本均勻涂布在玻片上，滴加1滴10%的氫氧化鉀（KOH）溶液，然后蓋上蓋玻片，將其置于酒精燈火焰上進行微加熱，觀察到標本充分溶解以后，蓋上玻片，確保標本透明。然后鏡檢觀察是否存在菌絲以及孢子等。如果標本為陰道分泌物、痰液或者糞便時，應觀察是否存在菌絲，如有菌絲時方可判定為真菌增殖而誘發疾病的狀態。

1.3.2細菌培養與分離鑒定：標本接種在薩布羅培養基之上，并置于室溫或者37 ℃條件下進行培養，培養時間為24～48 h。如果待測菌株為假絲酵母菌屬，予以劃線接種在科瑪嘉假絲酵母菌屬顯色培養基之上，放置在35 ℃下進行培養48 h。然后每隔24～48 h觀察菌落的染色情況。參照試劑說明書提供的菌種鑒定標準進行鑒定。

2　結　果

2.1真菌檢出結果：本組1000份標本，共檢出真菌249株，檢出率為24.9%。其中，白色假絲酵母菌166株（66.7%），光滑假絲酵母菌24株（9.6%），葡萄牙假絲酵母菌4株（1.6%），克柔假絲酵母菌25株（10.0%），熱帶假絲酵母菌8株（3.2%），近平假絲酵母菌2株（0.8%），其他假絲酵母菌4株（1.6%），毛霉菌屬13株（5.2%），曲霉菌屬3株（1.2%）。假絲酵母菌屬占93.6%，絲狀真菌占6.4%。

2.2檢出真菌標本來源：本組檢出真菌249株，其中，193株（77.5%）源自痰液，16株（6.4%）源自尿液，13株（5.2%）糞便，10株（4.0%）分泌物，9株（3.6%）咽拭子，3株（1.2%）血液，3株（1.2%）引流液，1株（0.4%）胸腹水，1株（0.42%）膽汁。

2.3檢出真菌標本科室分布：本組檢出249株真菌，其中，105株（42.2%）來自呼吸科，31株（12.4%）心血管內科，27株（10.8%）泌尿外科，12株（4.8%）ICU，11株（4.4%）內分泌科，9株（3.67%）普外科，8株（3.2%）婦科，7株（2.8%）骨科，6株（2.4%）神經內科，6株（2.4%）腎內科，5株（2.0%）消化內科，5株（2.0%）神經外科，4株（1.6%）胸外科，3株（1.2%）血液科，3株（1.2%）兒科，7株（2.8%）其他科室。

3　討　論

侵襲性真菌感染主要是指致病性真菌侵犯機體皮下組織、黏膜以及內臟所致真菌感染。近年來，侵襲性真菌感染率呈現逐年上升趨勢，且隨著經驗性抗白色假絲酵母菌用藥的增加，侵襲性真菌感染出現了流行病學性狀變化，這給醫院感染控制以及臨床治療帶來了較大的困難。

從本研究結果顯示，1000份標本中，侵襲性真菌檢出率達24.9%。真菌分離情況顯示，菌株主要為假絲酵母菌屬，占93.6%，位于前3位的菌株為白色假絲酵母菌（66.7%）、光滑假絲酵母菌（9.6%）以及克柔假絲酵母菌（10.0%），以白色假絲酵母菌占主要地位，這與國內外大部分研究報道一致。其中，光滑假絲酵母菌是近年來新興的一種條件致病菌。駱雪萍等［2］研究資料顯示，由光滑假絲酵母菌所引起的假絲酵母菌菌血癥的發生率呈現逐年上升趨勢。由此可見，醫院侵襲性真菌感染仍然以假絲酵母菌，尤其是白色假絲酵母菌為主，而其他假絲酵母菌，例如光滑假絲酵母菌以及克柔假絲酵母菌等表現出上升趨勢。這與臨床預防性地應用唑類抗真菌藥物，例如氟康唑等，導致白色假絲酵母菌以及熱帶假絲酵母菌的感染率降低，進而引起光滑假絲酵母菌以及克柔假絲酵母菌感染率升高。此外，毛霉菌屬（5.2%）以及曲霉菌屬（1.2%）的檢出率相比既往報道有所增加，而由毛霉菌屬所致肺部感染具有病情危重、發展迅速、臨床預后差以及病死率高等特點，應引起高度重視。

從菌株標本來源統計顯示看，痰液標本中真菌的檢出率占77.5%，占首要地位，但仍較既往報道有降低趨勢。而尿液、糞便、分泌物以及咽拭子等的檢出率則有所增加。由此可見，侵襲性真菌感染部位也發生了多元化變化。同時，血液標本的侵襲性真菌感染率占1.2%，相比于王鎮山等［3］報道有所升高，提示真菌血癥發生率有增高趨勢。但腦脊液標本中并未分離出侵襲性真菌，可能是由于腦脊液中的真菌含量比較少，加之培養時間較長等所致。從菌株分布科室發現，侵襲性真菌多分布在呼吸科、心血管內科、ICU等科室。主要是由于這些科室的患者多存在嚴重基礎疾病，或者大量應用抗菌藥物、合并低蛋白血癥、應用激素治療、化療以及侵襲性操作等，導致體內正常菌群失調以及屏障功能被破壞等，從而引起真菌移位、定植以及感染等。此外，因真菌感染多具有多樣性、復雜性的臨床表現，極易被原發基礎疾病的表現所掩蓋，往往導致誤診、漏診等，延誤臨床治療。故在臨床病原菌檢測中，應多次進行真菌培養，全面加強院內真菌感染監測，合理地予以預防性抗菌藥物治療，及早根據菌株培養鑒定結果以及藥敏結果合理選擇藥物控制感染。

綜上所述，侵襲性真菌感染的菌株構成具有多樣化，科室分布廣泛，早期積極開展病原學檢測，及早診斷和治療對于控制侵襲性真菌感染具有重要意義。

［1］孫獻梅，任香娣.NICU早產兒侵襲性真菌感染情況調查與防控對策［J］.護士進修雜志，2013，28（9）：820-822.

［2］駱雪萍.重癥監護病房侵襲性真菌感染特點及診斷［J］.重慶醫學，2010，39（17）：2389-2391.

［3］王鎮山.侵襲性肺真菌病的病原學及其流行趨勢［J］.臨床內科雜志，2008，25（4）：224-229.

R446.1

B

1671-8194（2015）11-0062-02