黃連解毒湯藥理作用研究進(jìn)展

方雪琴

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院藥劑科，上海200032)

黃連解毒湯方出《肘后方》卷二，名見《外臺》卷一引《崔氏方》。其組成為黃連9 g，黃柏6 g，黃芩6 g，梔子14 枚。功效為泄火解毒，主治為一切實(shí)熱火毒之證，三焦熱盛。癥見大熱煩躁，口燥咽干，目赤睛痛，錯語不眠;或熱病吐血、衄血、便血，甚或發(fā)斑;外科癰疽瘡瘍。現(xiàn)亦用于膽道感染、膿皰瘡、濕疹等屬于實(shí)熱火毒壅盛者。近年來隨著醫(yī)藥科學(xué)的發(fā)展，人們對黃連解毒湯藥理的研究也越來越深入，其作用及臨床適應(yīng)證更為廣泛。

1 對心血管系統(tǒng)的作用

1.1 降血脂，抗動脈粥樣硬化 張揚(yáng)等［1］研究了黃連解毒湯對高脂血癥模型大鼠血脂指標(biāo)及氧自由基代謝的影響。將50 只SD 大鼠隨機(jī)分為正常對照組、模型組、立普妥組(0.2 mg/kg)，黃連解毒湯低、高劑量組(6、12 g/kg)，除正常對照組外，其他組大鼠喂飼高脂飼料建立高脂血癥模型，連續(xù)灌服8 周后，測定血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平，以及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化酶 (GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)水平，并觀察肝組織病理學(xué)改變。結(jié)果顯示各劑量組的黃連解毒湯能顯著降低實(shí)驗大鼠血清膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白以及丙二醛的水平，并且可顯著提高血清高密度脂蛋白水平和SOD、GSH-Px 活性，能減輕肝細(xì)胞脂肪變性。說明黃連解毒湯能有效調(diào)節(jié)高脂血癥大鼠血脂代謝，提高機(jī)體抗氧化能力，改善肝組織病理損害。

李國強(qiáng)等［2］探討黃連解毒湯對動脈粥樣硬化大鼠血清中細(xì)胞間黏附分子-1 (ICAM-1)和血管細(xì)胞黏附分子-1(VCAM-1)水平的影響及其作用機(jī)制。將雄性SD 大鼠分成正常對照組、模型對照組、黃連解毒湯低中高3 個劑量組及阿托伐他汀組，除正常對照組喂普通飼料外，其余喂以高脂飼料，同時定期灌服維生素D3(60 萬U/次，第2、4、6 周)造模8 周，從第6 周開始每天灌胃給藥1 次，黃連解毒湯低劑量組2.7 g/kg、中劑量組5.3 g/kg、高劑量組10.6 g/kg、阿托伐他汀鈣片組1.8 mg/kg，正常對照組灌服等量蒸餾水，連續(xù)4 周，結(jié)果黃連解毒湯中劑量組、高劑量組及阿托伐他汀組對ICAM-1、VCAM-1 表達(dá)均比模型對照組低(P ＜0.05)。說明黃連解毒湯對動脈粥樣硬化起到一定的預(yù)防和治療作用，作用機(jī)理可能與抑制炎癥反應(yīng)有關(guān)。付春生［3］研究認(rèn)為，黃連解毒湯對導(dǎo)管球囊損傷大耳白兔頸總動脈并喂飼高脂飼料的動脈粥樣硬化模型動物，可降低其血脂水平，并且顯著降低其血清和頸總動脈斑塊組織的超敏C 反應(yīng)蛋白(hs-CRP)水平，改善頸總動脈病理學(xué)形態(tài)。

1.2 保護(hù)心肌細(xì)胞，抗心律失常 付曉春等［4］通過實(shí)驗觀察黃連解毒湯對在體大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)心律失常的影響，并探討其作用機(jī)制。采用SD 大鼠心肌I/R 模型，將56 只SD 大鼠隨機(jī)等分為假手術(shù)組、心肌I/R 組、溶劑(1% CMC-Na)對照組、黃連解毒湯低劑量組、黃連解毒湯中劑量組、黃連解毒湯高劑量組、復(fù)方丹參組，連續(xù)給藥7 d，末次給藥24 h 后復(fù)制大鼠心肌I/R 損傷模型(開胸結(jié)扎左冠狀動脈前降支30 min，再灌注40 min)。觀察缺血/再灌注后實(shí)驗動物室性心動過速 (VT)、室顫(VF)的發(fā)生率和死亡率;同時測定左心室心肌組織SOD及MDA 水平。結(jié)果再灌注40 min 后，實(shí)驗組較I/R 組VT及VF 發(fā)生率及死亡率均明顯降低(P ＜0.01);實(shí)驗組L/R 組的SOD 活力提高(P ＜0.05)，而MDA 生成量明顯減少(P ＜0.01)。說明心肌I/R 可導(dǎo)致缺血心肌進(jìn)一步損傷，黃連解毒湯具有抗大鼠I/R 心律失常作用，可能與抑制I/R 氧自由基的產(chǎn)生有關(guān);進(jìn)一步研究認(rèn)為［5-6］，黃連解毒湯可以明顯降低I/R 模型大鼠心肌細(xì)胞的TNF-α、IL-1β、CK、NF-κB 水平，梗死范圍明顯縮小。

1.3 降血壓作用 張志偉等［7］觀察黃連解毒湯對自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneously hypertensive rats，SHR)血栓前狀態(tài)(prothrombotic state，PTS)的影響。將24 只12 周齡雄性SHR 隨機(jī)分為黃連解毒湯組(15 g/kg)、卡托普利組(0.017 5 g/kg)和模型組3 組，8 只同齡雄性Wistar-Kyoto(WKY)大鼠為空白對照組，通過BP-6 動物無創(chuàng)血壓測試儀測定各組治療前血壓，連續(xù)灌胃給藥6 周，每日1 次，第1、2、4、6 周的第7 天下午定時測量各組血壓，6 周后由腹主動脈取血，檢測血清血栓素A2(TXA2)、6-酮前列環(huán)素(6-K-PG)、一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素-1 (ET-1)、纖溶系統(tǒng)激活劑(t-PA)、纖溶系統(tǒng)抑制因子(PAI-1)、同型半胱氨酸(Hcy)和血管性血友病因子(vWF)。結(jié)果顯示黃連解毒湯可控制SHR 血壓，降低TXA2、ET-1、Hcy 和vWF (P ＜0.05 或P ＜0.01)，增加6-K-PG 和NO (P ＜0.05 或P ＜0.01)。說明黃連解毒湯可降低SHR 的血壓，改善其PTS。張楠、高藝文等［8-9］的研究認(rèn)為給予幼齡的自發(fā)性高血壓大鼠灌服5.4 g/kg 的黃連解毒湯，連續(xù)6 周，可使SHR 大鼠胸主動脈血管內(nèi)皮超微結(jié)構(gòu)得以顯著改善，并且使血清NO 濃度下降，上調(diào)動脈血管eNOS mRNA 表達(dá)，起到擴(kuò)血管作用。

1.4 抗血栓作用 付曉春等［10］以450、900、1 800 mg/kg劑量的黃連解毒湯提取物，連續(xù)對小鼠灌胃3 d，末次給藥1 h 后能顯著延長小鼠體外凝血時間。家兔灌胃150、300、600 mg/kg 劑量的黃連解毒湯，連續(xù)給藥3 d，末次給藥1 h后能明顯延長實(shí)驗動物凝血酶時間、血漿凝血酶原時間、白陶土活化部分凝血活酶時間，并顯著抑制ADP 所致的血小板聚集。實(shí)驗結(jié)果顯示黃連解毒湯具有對抗血栓形成的作用。

2 保護(hù)腦神經(jīng)元作用

錢智磊等［11］研究黃連解毒湯中指標(biāo)性成分在火熱證腦缺血損傷模型大鼠的時量關(guān)系與抗火熱證腦缺血效應(yīng)的相關(guān)性。以火熱證電凝法建立局灶性腦缺血模型、給藥組、假手術(shù)組。給藥組大鼠復(fù)制火熱證腦缺血模型成功后灌胃給予黃連解毒湯，按0.083、0.25、0.5、0.75、1、2、3、4、6、8、12、24 h 時間點(diǎn)取血，測定各指標(biāo)性成分在大鼠體內(nèi)的藥時變化，繪制藥-時曲線;取模型組、給藥組、假手術(shù)組0.083、0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、12、24 h時間點(diǎn)的腦組織，測定腦組織中自細(xì)胞介素(IL-6)，腫瘤壞死因子(TNF-α)的變化，繪制時-效曲線;藥效實(shí)驗表明3 種指標(biāo)性成分的起效時間不同，持續(xù)時間亦不相同;上述實(shí)驗結(jié)果說明黃連解毒湯全方能對火熱證缺血性腦損傷模型發(fā)揮保護(hù)作用，其作用的強(qiáng)弱與方中主要指標(biāo)性成分的血藥濃度呈正相關(guān)，且各主要指標(biāo)性成分發(fā)揮效應(yīng)的時效存在差異。黃連解毒湯對火熱證腦缺血模型的保護(hù)作用機(jī)制可能與其抗炎作用有關(guān)，這一點(diǎn)與傳統(tǒng)中醫(yī)認(rèn)為的黃連解毒湯有清熱解毒功效相一致。

方青等［12］對黃連解毒湯治療老年性癡呆(AD)及其對細(xì)胞因子水平的影響進(jìn)行藥效學(xué)研究。對注射β-淀粉蛋白(Aβ)誘導(dǎo)的AD 大鼠模型，進(jìn)行水迷宮實(shí)驗以測試實(shí)驗動物的學(xué)習(xí)記憶能力;并檢測實(shí)驗動物的TNF-α、干擾素-γ (INF-γ)、白介素-2 (IL-2)等實(shí)驗指標(biāo)的變化。結(jié)果顯示給予黃連解毒湯后，動物逃避的平均潛伏期縮短，進(jìn)入盲端的錯誤次數(shù)減少，學(xué)習(xí)記憶能力顯著改善(P ＜0.01);并且TNF-α、INF-γ、IL-2 水平也明顯降低(P ＜0.01)。說明黃連解毒湯能通過調(diào)整老年癡呆癥模型大鼠的免疫功能、抗炎作用而提高其學(xué)習(xí)記憶能力。

劉曉強(qiáng)等［13］采用免疫組織化學(xué)SP 法對正常大鼠、感染大腸埃希菌大鼠和黃連解毒湯預(yù)防大鼠腦組織中的Toll樣受體9 (TLR9)表達(dá)及相關(guān)因子的動態(tài)變化進(jìn)行了研究，以闡明TLR9 及相關(guān)炎癥因子在腦損傷中的調(diào)節(jié)機(jī)制。正常對照組大鼠腹腔注射生理鹽水0.5 mL/只，試驗組大鼠腹腔注射大腸埃希菌菌液0.5 mL/只(2.4 ×109CFU/mL)，12.6 mL/kg 劑量的黃連解毒湯預(yù)防組大鼠每只按提前6 d 灌服黃連解毒湯，處理當(dāng)天再分別腹腔注射大腸埃希菌菌液0.5 mL/只(2.4 ×109CFU/mL)。分別于處理后的3、6、9、12、18、24 h 對各組動物進(jìn)行免疫組化指標(biāo)檢測，觀察腦組織TLR9 及相關(guān)因子的表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在大鼠正常生理狀態(tài)下TLR9 有少量表達(dá)，感染大腸埃希菌后，TLR9 表達(dá)則出現(xiàn)顯著變化，且這種變化隨著時間的推移而更加明顯。在感染后3 h 時TLR9 表達(dá)量較正常生理狀態(tài)下顯著增加(P ＜0.05)，在6 h 時開始增加更明顯，12 h 時達(dá)到高峰;與正常對照組和試驗組相比，均有極顯著差異(P ＜0.01)。預(yù)防組與正常對照組比較則無統(tǒng)計學(xué)意義(P ＞0.05)。該研究結(jié)果顯示黃連解毒湯可通過抑制腦組織TLR9 的表達(dá)而保護(hù)由細(xì)菌所致的腦損傷。

給永久性大腦中動脈栓塞模型大鼠灌服黃連解毒湯水提取物(800 mg/kg)、總生物堿(44 mg/kg)、總黃酮(50 mg/kg)、總環(huán)烯醚萜(80 mg/kg)等有效部位，連續(xù)7 d，黃連解毒湯水提取物及3 個有效部位均可增加腦缺血大鼠缺血半暗帶區(qū)神經(jīng)元數(shù)目，降低缺血半暗帶區(qū)GFAP、Cx43 基因和蛋白的表達(dá)［14］;黃連解毒湯水提取物和總黃酮可提高海馬神經(jīng)元NeuN 表達(dá)，總黃酮、總生物堿和總環(huán)烯醚萜可增強(qiáng)大鼠海馬CA1 區(qū)VEGF 表達(dá)，總黃酮還可顯著上調(diào)尾殼核VEGF 表達(dá)［15］。對大腦中動脈梗塞模型的大鼠灌服5.39 g 生藥/kg、10.78 g 生藥/kg 劑量的黃連解毒湯，可顯著降低腦梗塞急性期模型大鼠第4、第7 天血漿胃動素、血管活性腸肽的水平，且效應(yīng)與劑量有關(guān)［16］。

3 對肝臟的保護(hù)作用

馬雅鑾等［17］觀察黃連解毒湯對高脂飲食導(dǎo)致的載脂蛋白E (apolipoprotein E，ApoE)基因敲除(ApoE-/-)小鼠肝臟損傷的保護(hù)作用。野生型小鼠分為野生普食組、野生高脂組，ApoE-/-小鼠分為ApoE-/-普食組、ApoE-/-高脂組、ApoE-/-高脂加黃連解毒湯組，分別給予普食和高脂飲食，連續(xù)4 周，ApoE-/-高脂加黃連解毒湯組同時給予黃連解毒湯5 g/(kg·d)灌胃。檢測小鼠血漿TC、TG 和LDL-C 水平，HE 染色觀察肝臟病理組織變化，流式細(xì)胞儀檢測實(shí)驗動物肝臟巨噬細(xì)胞及其亞型比例和巨噬細(xì)胞表面受體CD36、CD206 的表達(dá)水平。結(jié)果ApoE-/-高脂組小鼠肝臟組織呈典型單純性脂肪肝病理變化，TC、TG、LDL-C 升高，巨噬細(xì)胞比例增多，巨噬細(xì)胞表面受體CD206 表達(dá)水平降低，與ApoE-/-普食組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P ＜0.01、P ＜0.05);CD206 +替代活化型(alternatively activated macrophages，M2 型)巨噬細(xì)胞比例較野生普食組顯著減少(P ＜0.05);CD36 表達(dá)水平無明顯變化。黃連解毒湯干預(yù)4 周后血脂無明顯改善，但肝臟CD206 +M2 型巨噬細(xì)胞比例較ApoE-/-高脂組顯著提高(P ＜0.05)，肝臟脂肪肝病理變化顯著減輕。說明黃連解毒湯的肝臟保護(hù)功能可能與M2 型巨噬細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)、修復(fù)損傷組織有關(guān)，其免疫調(diào)節(jié)作用和肝臟保護(hù)作用獨(dú)立于降脂作用。黃琳等［18］研究黃連解毒湯對胰島素抵抗大鼠氧自由基所致肝臟線粒體損傷的保護(hù)作用，并探討其作用機(jī)制。以高脂飼料喂養(yǎng)Wistar 大鼠，建立胰島素抵抗模型;造模成功后隨機(jī)分為黃連解毒湯組、小檗堿組、硫辛酸組和模型組，各組以相應(yīng)的藥物干預(yù)6 周;測定肝臟線粒體ATP 酶、琥珀酸脫氫酶(SDH)、細(xì)胞色素C 氧化酶(CCO)活性及ATP 水平以觀察線粒體功能及能量代謝活性;測定SOD、GSH-Px 活性及MDA 水平以觀察線粒體抗氧化能力。黃連解毒湯能提高胰島素抵抗大鼠肝臟線粒體中GSH-Px、SOD、ATP 酶活力，抑制MDA 生成，促進(jìn)能量生成代謝，增強(qiáng)SDH 和CCO 活力。說明黃連解毒湯可以改善線粒體功能及能量代謝，增強(qiáng)線粒體抗氧化能力，對胰島素抵抗大鼠肝臟線粒體損傷有明顯保護(hù)作用，其機(jī)制可能與清除氧自由基、抑制脂質(zhì)過氧化有關(guān)。對酒精性肝損傷模型小鼠灌胃給予0.61、1.22、2.44 g 生藥/kg 的黃連解毒湯，6 周后可顯著改善模型動物的體質(zhì)量、肝臟指數(shù)，降低血清血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性和TG 水平，并且可減輕肝臟細(xì)胞病變，降低腸黏膜通透性［19］。周海云等［20］采用腹腔注射氯化鋰-匹羅卡品制備癲癇大鼠模型。比較未用藥、單用SVA 及聯(lián)合用藥對大鼠行為學(xué)，ALT、AST，GSH-Px 活性和MDA 水平以及肝臟組織學(xué)變化的影響，同時監(jiān)測SVA 血藥濃度。結(jié)果SVA 聯(lián)合黃連解毒湯能減少大鼠的癲癇行為，拮抗癲癇大鼠服用SVA 導(dǎo)致的ALT、AST 活性升高(P ＜0.01)、GSH-Px 活性下降(P ＜0.01)和肝組織病理改變，并同時降低SVA 血藥濃度(P ＜0.01)。說明黃連解毒湯能增強(qiáng)SVA 的抗癲癇作用，并降低其肝毒性。

4 降血糖，改善糖尿病并發(fā)癥

肖雁凌等［21］觀察了黃連解毒湯對Ⅱ型糖尿病大鼠血管內(nèi)皮功能的影響，以及對Ⅱ型糖尿病模型動物血管并發(fā)癥的防治及其作用機(jī)制。對大鼠尾靜脈注射小劑量鏈脲佐菌聯(lián)合高糖高熱量飼料喂養(yǎng)的方法建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型，連續(xù)給藥9 周后，各組動物進(jìn)行糖耐量檢測(OGTT);10周后，測定各組動物體質(zhì)量變化情況并檢測各組動物的空腹血糖 (FBG)、TC、TG、HDL-C、空腹血清胰島素(FINS)值及血清NO、血漿內(nèi)皮素(ET)、血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)水平，以及vWF 的表達(dá)水平。結(jié)果黃連解毒湯組的OGTT 得以顯著改善，動物體質(zhì)量、血清TC、TG、ET值均低于模型組(P ＜0.05)，HDL-C 和NO 值高于模型組(P ＜0.05);FBG、FINS、AngⅡ、vWF 值均顯著低于模型組(P ＜0.01);與陽性藥物阿司匹林相比，黃連解毒湯降低FBG 作用更顯著 (P ＜0.05)，對TG、HDL-C、NO、AngⅡ、vWF 的改善情況也優(yōu)于阿司匹林，但無顯著性差異(P ＞0.05)。說明黃連解毒湯能保護(hù)Ⅱ型糖尿病模型動物早期出現(xiàn)的血管內(nèi)皮損傷，作用機(jī)理與黃連解毒湯具有降血糖、降血脂、抗炎、改善胰島素抵抗及內(nèi)皮依賴性的舒張血管等作用有關(guān)。

冷三華等［22］探討黃連解毒湯對實(shí)驗性Ⅱ型糖尿病大鼠的血糖、血脂代謝的影響，并探討其作用機(jī)理。觀察黃連解毒湯對實(shí)驗性2 型糖尿病大鼠TC、TG、HDL-C、載脂蛋白AI (APOA I)、載脂蛋白B (APOB)、OGTT、FBG、血清INS、進(jìn)食及體質(zhì)量的影響。結(jié)果，黃連解毒湯能降低Ⅱ型糖尿病模型大鼠的血清TC、TG、APOB、FBG 水平，HDL-C、APOA I 水平則顯著增高，OGTT 得以改善，動物體質(zhì)量有所減輕。說明黃連解毒湯具有降糖、降脂等作用，其作用機(jī)理可能與增強(qiáng)胰島素敏感性及促進(jìn)胰島素釋放等環(huán)節(jié)密切相關(guān)。灌胃給予5.4 g/kg 劑量的黃連解毒湯，連續(xù)6 周，可顯著改善Ⅱ型糖尿病模型大鼠腹主動脈內(nèi)皮血管形態(tài)，并且腹主動脈HIF-1α 陽性細(xì)胞表達(dá)明顯降低［23］。

楊永霞等［24］采用核磁共振氫譜(1H-NMR)代謝組學(xué)的方法研究黃連解毒湯對高果糖誘導(dǎo)的胰島素抵抗模型大鼠的作用，對大鼠棕色脂肪組織提取液進(jìn)行PCA 分析，黃連解毒湯可降低乳酸、膽堿、磷脂膽堿/甘油磷脂膽堿、肌酸/肌酸酐、牛磺酸和肌苷的水平，且升高肌醇水平。

5 抗炎作用

馬雅鑾等［25］觀察黃連解毒湯對高脂飲食喂養(yǎng)的apoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠全身和主動脈血管局部免疫反應(yīng)的影響，以8 只野生型C57BL6 小鼠為野生普食組，24 只ApoE-/-小鼠隨機(jī)分為ApoE-/-普食組、ApoE-/-高脂組、ApoE-/-高脂加黃連解毒湯組，普食組與高脂組分別給予普食和高脂飲食，連續(xù)4 周，ApoE-/-高脂加中藥組同時給予黃連解毒湯5 g/(kg·d)灌胃，其他小鼠采用等量純凈水灌胃，4 周后檢測血脂水平、外周血單核細(xì)胞比例及其表面Toll 樣受體4 (Toll-like receptor 4，TLR4)和清道夫受體CD36 的表達(dá)，檢測主動脈病理變化和主動脈血管局部細(xì)胞因子表達(dá)水平，進(jìn)一步采用脂多糖 (Lipopolysaccharide，LPS)刺激檢測血漿細(xì)胞因子的水平。結(jié)果:(1)與野生普食組比較，ApoE-/-普食組血漿TC、TG 和LDL 白水平顯著升高 (P ＜0.05、P ＜0.01);與ApoE-/-普食組比較，ApoE-/-高脂組血漿TC 和LDL 水平也顯著增高(P ＜0.05);ApoE-/-高脂組與ApoE-/-高脂加黃連解毒湯組各項血脂水平指標(biāo)比較，無統(tǒng)計學(xué)差異(P ＞0.05);(2)與野生普食組比較，ApoE-/-普食組外周血單核細(xì)胞百分比無明顯變化，但TLR4 表達(dá)水平顯著增多(P ＜0.05);與ApoE-/-普食組比較，ApoE-/-高脂組小鼠外周血單核細(xì)胞百分比及TLR4表達(dá)水平均顯著增多(P ＜0.05);與ApoE-/-高脂組比較，ApoE-/-高脂加黃連解毒湯組外周血單核細(xì)胞百分比及其表面TLR4 表達(dá)顯著降低，CD36 表達(dá)水平亦顯著降低(P ＜0.05);(3)給予脂多糖刺激3 h 后，與野生普食組比較，ApoE-/-普食組血漿IL-10 和TNF-α 水平顯著提高(P ＜0.05);與ApoE-/-普食組比較，ApoE-/-高脂組小鼠血漿IL-10、IL-12、TNF-α 和MCP-1 水平有所增加，但無統(tǒng)計學(xué)差異(P ＞0.05);給予黃連解毒湯4 周后，與ApoE-/-高脂組比較，ApoE-/-高脂加黃連解毒湯組MCP-1 表達(dá)下調(diào)明顯，而IL-10 水平則顯著上升(P ＜0.05);(4)與野生普食組比較，ApoE-/-普食組主動脈血管壁炎癥因子IFN -γ、MCP-1、TNF-α 和IL-1β mRNA 水平顯著升高，抑炎因子IL-10 亦顯著升高(P ＜0.05，P ＜0.01);與ApoE-/-普食組比較，ApoE-/-高脂組主動脈血管壁不僅IL -1β、IFN -γ、MCP-1 和TNF-α 水平升高，且抑炎因子IL-10、IL -12 和TGF-β 水平亦顯著升高(P ＜0.05、P ＜0.01);給予黃連解毒湯4 周后，與ApoE-/-高脂組比較，ApoE-/-高脂加黃連解毒湯組主動脈血管壁炎癥因子IL -12、IL -1β、MCP-1和TNF-α 顯著降低(P ＜0.05、P ＜0.01)。高脂飲食可引發(fā)ApoE-/-小鼠全身性炎癥反應(yīng)和血管局部炎癥反應(yīng)，血管局部炎癥反應(yīng)程度超過全身性炎癥反應(yīng)，黃連解毒湯干預(yù)后能夠減輕炎癥反應(yīng)，并且對血管局部的作用更為顯著，同時增強(qiáng)全身抗炎反應(yīng)。

朱小明等［26］研究黃連解毒湯抗銅綠假單胞菌牛物被膜及與阿奇霉素協(xié)同抗菌作用。以微量倍比稀釋法測定黃連解毒湯對銅綠假單胞菌的最小抑菌濃度(MIC)，棋盤稀釋法測定黃連解毒湯和阿奇霉素協(xié)同抗菌作用，MTT 法測定黃連解毒湯對銅綠假單胞菌生物被膜的最小抑膜濃度(SMIC)，同時顯微鏡下觀察黃連解毒湯對生物膜形態(tài)的影響。結(jié)果顯示黃連解毒湯對銅綠假單胞菌的MIC 100 g/L，阿奇霉素200 mg/L，兩藥聯(lián)合后MIC 分別為25 g/L 和25 mg/L，抑菌分級指數(shù)(FIC)為0.187 5，提示黃連解毒湯和阿奇霉素聯(lián)合使用，具有協(xié)同抑制銅綠假單胞菌的作用。黃連解毒湯對銅綠假單胞菌生物被膜的SMIC501，3 d 為15.6 g/L，7 d 為31.25 g/L;SMIC801，3、7 d 均為250 g/L，形態(tài)觀察提示黃連解毒湯SMIC80 濃度對銅綠假單胞菌生物被膜的抑制作用明顯。說明黃連解毒湯具有抗銅綠假單胞菌生物被膜作用，與阿奇霉素有協(xié)同抗菌作用。

李永偉等［27］采用紙片法篩選產(chǎn)超廣譜β -內(nèi)酰胺酶大腸桿菌，確定黃連解毒湯的最低抑菌質(zhì)量濃度，選取低于最低抑菌濃度的黃連解毒湯培養(yǎng)超廣譜β -內(nèi)酰胺酶大腸桿菌，以確定最佳逆轉(zhuǎn)效果的培養(yǎng)時間和藥物濃度，并測定逆轉(zhuǎn)率。檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，黃連解毒湯對ATCC8099 型大腸桿菌的最低抑菌濃度為0.6 g/L，逆轉(zhuǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸桿菌的最佳培養(yǎng)時間為30 h，最佳質(zhì)量濃度為0.3 g/L，對氨芐西林藥敏逆轉(zhuǎn)率為60.0%、頭孢他啶藥敏逆轉(zhuǎn)率為66.7%、頭孢美唑藥敏逆轉(zhuǎn)率為75.0%，頭孢曲松藥敏逆轉(zhuǎn)率為66.7%，說明黃連解毒湯對耐藥性大腸桿菌逆轉(zhuǎn)作用確切，可作為逆轉(zhuǎn)耐藥性大腸桿菌一種途徑。趙保勝等［28］以傷寒-副傷寒甲-副傷寒乙三聯(lián)菌苗制備家兔發(fā)熱模型，觀察黃連解毒湯對發(fā)熱家兔體溫的影響，觀察該方對葡萄球菌致小鼠死亡率的影響以及觀察該方對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響。黃連解毒湯可顯著降低由傷寒-副傷寒甲-副傷寒乙三聯(lián)菌苗所致發(fā)熱家兔的體溫，對抗金黃色葡萄球菌引起的小鼠感染;抑制二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹。說明黃連解毒湯具有較好的解熱、抗菌、抗炎作用，與傳統(tǒng)中醫(yī)藥對黃連解毒湯的論述相符，并且也為其現(xiàn)代臨床治療感染性疾病提供了實(shí)驗依據(jù)。

6 抗氧化作用

宋玨等［29］研究黃連解毒湯及其單味藥對細(xì)胞氧化損傷保護(hù)作用的藥效動力學(xué)，并對其血清藥理學(xué)方法進(jìn)行探討。對實(shí)驗動物灌服黃芩、黃連、黃連解毒湯等受試藥物以分別制得含藥血清，檢測含藥血清對由H2O2所致PC12 細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷保護(hù)作用的時間-效應(yīng)關(guān)系;并研究黃芩、黃連、黃連解毒湯提取物和黃芩苷、小檗堿純品對氧化損傷保護(hù)作用的量效關(guān)系。結(jié)果顯示各單味藥以及黃連解毒湯的含藥血清均可對抗細(xì)胞氧化損傷，黃連解毒湯作用最強(qiáng)，黃芩和黃芩苷次之，黃連最弱，在試驗濃度范圍內(nèi)，黃連解毒湯和黃芩提取物對氧化損傷細(xì)胞的保護(hù)作用呈劑量依賴性關(guān)系，而黃連沒有保護(hù)作用;在0.15 ～10 μg/mL 濃度范圍內(nèi)，黃芩苷對細(xì)胞模型有保護(hù)作用，且呈劑量依賴性。0.15 ～10 μg/mL 濃度范圍內(nèi)，小檗堿則沒有明顯的保護(hù)作用。說明黃連解毒湯抗氧化作用強(qiáng)于各單味藥;黃芩苷可能是黃芩及其含藥血清中的抗氧化成份之一，而小檗堿與含藥血清的抗氧化作用無關(guān)。黃連解毒湯及其組方中各單味藥含藥血清保護(hù)細(xì)胞氧化應(yīng)激的作用呈時間和劑量的依賴關(guān)系。

王利津等［30］以紅細(xì)胞溶血、肝勻漿MDA 生成及羥自由基生成等方法造成體外氧化損傷模型，體外給予黃連解毒湯后能明顯抑制紅細(xì)胞自氧化及H2O2所致的紅細(xì)胞溶血，并抑制小鼠肝勻漿自發(fā)性或Fe2+-VitC 誘發(fā)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)。直接清除由H2O2所誘導(dǎo)的羥自由基產(chǎn)生。說明黃連解毒湯對血細(xì)胞和組織細(xì)胞具有膜保護(hù)作用。

7. 抗腫瘤作用

孫燕等［31］研究黃連解毒湯體內(nèi)抗腫瘤作用，對小鼠灌服22.0、11.0、5.5 g/kg 劑量的黃連解毒湯，對S180 肉瘤模型小鼠，22.0 g/kg 劑量的黃連解毒湯可顯著抑制小鼠腫瘤的生長(P ＜0.05)，延長荷瘤小鼠壽命，改善生存質(zhì)量，但各劑量的黃連解毒湯對動物脾臟、胸腺指數(shù)無顯著影響。細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察顯示各劑量的黃連解毒湯可使腫瘤細(xì)胞明顯變形，22.0、11.0 g/kg 劑量組小鼠生存率明顯高于對照組。孫健等［32］采用HPLC 梯度洗脫的研究方法分析對比黃連解毒湯及其含藥血清中有效成分的共同性和差異性，并以MTT 方法檢測比較黃連解毒湯及其含藥血清對人肝癌Bel-7402、人小細(xì)胞肺癌NCI-H446 2 種瘤株的抑制作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)10 個來源于黃連解毒湯復(fù)方的原型成分，若干個代謝產(chǎn)物，同時發(fā)現(xiàn)一些原復(fù)方中的主要化學(xué)成分并未在血清中測得。黃連解毒湯及其含藥血清對2 種瘤株都有顯著的抑制增殖作用，并呈量效依賴關(guān)系，但抑制程度有所差異。黃連解毒湯對抗人肝癌Bel-7402 細(xì)胞增殖作用相對更敏感(Bel-7402 的IC50為185.34 mg/L，NCI-H446的IC50為264.68 mg/L)，黃連解毒湯含藥血清各劑量組對2 種瘤株的抑制程度非常相似。說明黃連解毒湯及其含藥血清對2 種瘤株抑制程度變化的原因可能是黃連解毒湯中各有效或指標(biāo)成分吸收進(jìn)入血液循環(huán)后其水平發(fā)生了變化的結(jié)果，黃連解毒湯進(jìn)一步的藥代動力學(xué)研究，也有助于闡明黃連解毒湯抗腫瘤的有效成分及作用機(jī)制。

8 小結(jié)

綜上可知，黃連解毒湯除了抗炎作用，現(xiàn)代在心血管系統(tǒng)，保護(hù)腦神經(jīng)，保護(hù)肝臟，抗氧化，抗血栓，降血糖，降血脂，降血壓，抗腫瘤等方面都應(yīng)用廣泛。隨著對黃連解毒湯的研究不斷深入，越來越多的功能被人們所發(fā)現(xiàn)，在臨床上的應(yīng)用也越來越多。但其有效性、安全性的研究還很落后，相應(yīng)的毒理研究亦很少，有待于進(jìn)一步深化。

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