恩替卡韋分散片聯(lián)合促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素治療慢性重癥乙型肝炎

竇芊，杜敬佩，楊瑞，劉淑媛，李長(zhǎng)安，趙巍峰

（新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院感染科，河南 新鄉(xiāng) 453003）

恩替卡韋分散片聯(lián)合促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素治療慢性重癥乙型肝炎

竇芊，杜敬佩，楊瑞，劉淑媛，李長(zhǎng)安，趙巍峰

（新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院感染科，河南 新鄉(xiāng) 453003）

目的分析恩替卡韋聯(lián)合促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素治療慢性重癥乙型肝炎對(duì)血清乙肝病毒脫氧核糖核酸（HBV-DNA）載量、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）及免疫分子含量的影響。方法選擇在該院接受治療的慢性重癥乙型肝炎患者96例作為研究對(duì)象，按照隨機(jī)數(shù)表法分為兩組，對(duì)照組接受常規(guī)治療、觀察組接受恩替卡韋分散片聯(lián)合促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素治療。比較兩組患者的血清HBV-DNA載量、TGF-β1及免疫分子含量。結(jié)果 觀察組患者接受治療后的血清HBV-DNA載量及TGF-β1含量均明顯低于對(duì)照組患者。觀察組患者接受治療后的血清白細(xì)胞介素6（IL-6）水平低于對(duì)照組，干擾素-γ（IFN-γ）、C3及C4水平高于對(duì)照組患者。觀察組患者接受治療后的血清三基序蛋白5α（Trim5α）及細(xì)胞因子信號(hào)抑制因子1（SOCS1）水平高于對(duì)照組患者，可溶性程序性死亡分子1（sPD-1）水平低于對(duì)照組患者。結(jié)論恩替卡韋分散片聯(lián)合促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素可以有效降低重型肝炎患者的血清HBV-DNA載量及TGF-β1水平、提升自身免疫能力。

重型肝炎；恩替卡韋分散片；促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素

慢性重癥乙型肝炎的病理表現(xiàn)為大量肝細(xì)胞壞死，可在短時(shí)間內(nèi)引起肝衰竭甚至危及生命，目前乙型肝炎病毒感染是導(dǎo)致慢性重癥乙型肝炎的主要原因[1]。慢性重癥乙型肝炎發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，包括細(xì)胞損傷、功能障礙及細(xì)胞凋亡等，其中病毒感染導(dǎo)致的免疫反應(yīng)異常是其中重要的原因[2]。重型肝炎的治療原則是挽救和修復(fù)嚴(yán)重?fù)p害的肝細(xì)胞，故在營(yíng)養(yǎng)支持和蛋白供應(yīng)等基礎(chǔ)措施之上，應(yīng)加入抗病毒及促肝細(xì)胞再生的藥物。本研究主要分析恩替卡韋分散片聯(lián)合促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素治療重型肝炎對(duì)血清乙肝病毒脫氧核糖核酸（HBV-DNA）載量、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（transforming growth factor β1,TGF-β1）及免疫分子含量的影響。具體匯報(bào)如下：

1 資料與方法

1.1一般資料

選擇2012年10月-2014年1月在本院接受治療的重型肝炎患者96例作為研究對(duì)象，均經(jīng)臨床病理證實(shí)且排除伴冠心病或糖尿病等重大疾病患者。按照隨機(jī)數(shù)表法將所有入組患者分為：接受常規(guī)治療的對(duì)照組，接受恩替卡韋聯(lián)合促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素治療的觀察組，每組各48例。觀察組患者中，男性27例，女性21例；年齡45～76歲，平均（65.78± 8.05）歲。對(duì)照組患者中，男性26例，女性22例；年齡43～75歲，平均（67.21±8.17）歲。兩組患者的一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2治療方法

對(duì)照組患者接受慢性重癥乙型肝炎患者常規(guī)治療，包括囑患者臥床休息，保證熱量攝入、注意水電解質(zhì)平衡，給予甘草酸二胺注射液、門冬氨酸鉀鎂注射液、茵梔黃注射液、拉米夫定等護(hù)肝、降酶、退黃及抗病毒綜合治療。觀察組患者在常規(guī)治療基礎(chǔ)上加入恩替卡韋分散片（潤(rùn)眾）聯(lián)合促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素治療，具體如下：口服恩替卡韋分散片0.5 mg，1次/d，靜脈滴注促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素120 mg（溶于10%葡萄糖液250 ml中）1次/d，以14 d為1療程。

1.3觀察指標(biāo)

1.3.1血清HBVDNA載量及TGF-β1含量患者接受治療前后，采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),多聚酶鏈反應(yīng)（PCR）法結(jié)合熒光探針的體外擴(kuò)增技術(shù)測(cè)定血清HBV-DNA載量，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清TGF-β1含量。

1.3.2Th1/Th2細(xì)胞因子含量及補(bǔ)體水平患者接受治療前后，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清中的干擾素-γ（interferon-γ,IFN-γ）、白細(xì)胞介素6（interleukin-6,IL-6）、補(bǔ)體C3和C4的含量。

1.3.3血清TRIM5α、sPD-1及SOCS-1水平患者接受治療前后，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清三基序蛋白5α（tripartite-motif protein 5α，Trim 5α）、細(xì)胞因子信號(hào)抑制因子1（suppressors of cytokine signaling 1，SOCS1）及可溶性程序性死亡分子1（soluble programmed death 1，sPD-1）水平差異。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本研究采用SPSS 18.0軟件對(duì)上述數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s），兩兩比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料的比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1血清HBV-DNA載量及TGF-β1含量

治療前兩組患者的血清HBV-DNA載量及TGF-β1含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），觀察組患者接受治療后的血清HBV-DNA載量及TGF-β1含量均明顯低于對(duì)照組患者（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者接受不同治療前后的血清HBVDNA載量及TGF-β1含量比較（±s）

組別TGF-β1/（mg/L）觀察組6.02±0.53253.18±23.643.11±0.43209.37±21.37對(duì)照組5.98±0.67258.02±25.134.86±0.67246.15±26.29 t值0.520.486.267.18 P值0.6360.6620.0080.005治療前治療后HBV DNA載量/（lgcopies/ml）TGF-β1/（mg/L）HBV DNA載量/（lgcopies/ml）

2.2Th1/Th2細(xì)胞因子含量及補(bǔ)體水平

治療前兩組患者的血清Th1/Th2細(xì)胞因子含量及補(bǔ)體水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），觀察組患者接受治療后的血清IL-6水平低于對(duì)照組，IFN-γ、C3及C4水平高于對(duì)照組患者（P＜0.05），見表2。

2.3血清TRIM5α、sPD-1及SOCS-1水平

治療前兩組患者的血清TRIM5α、sPD-1及SOCS-1水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），觀察組患者接受治療后的血清TRIM5α及SOCS-1水平高于對(duì)照組患者，sPD-1水平低于對(duì)照組患者（P＜0.05），見表3。

表2 兩組患者接受不同治療前后的Th1/Th2細(xì)胞因子含量及補(bǔ)體水平比較（±s）

組別治療前治療后IFN-γ/（ng/L）IL-6/（ng/L）C3/（g/L）IFN-γ/（ng/L）IL-6/（ng/L）C3/（g/L）C4/（g/L）觀察組27.73±3.94144.62±21.810.54±0.080.13±0.0341.28±6.3589.81±7.911.01±0.180.27±0.07對(duì)照組27.65±3.83143.57±25.660.53±0.090.14±0.0230.78±3.61116.38±13.250.67±0.090.19±0.03 t值0.370.470.380.276.277.165.895.38 P值0.7340.6690.7270.8010.0080.0050.0090.012 C4/（g/L）

表3 兩組患者接受不同治療前后的血清TRIM5α、Spd-1及SOCS-1水平比較（ng/ml±s）

組別治療前治療后TRIM5αsPD-1TRIM5αsPD-1SOCS-1觀察組0.83±0.071.72±0.451.02±0.151.27±0.290.89±0.112.17±0.38對(duì)照組0.81±0.081.70±0.431.05±0.130.92±0.121.51±0.321.23±0.21 t值0.370.270.325.846.497.04 P值0.7330.8040.7690.0100.0070.006 SOCS-1

3 討論

慢性重癥乙型肝炎為臨床致死性疾病，常規(guī)治療包括抗病毒、補(bǔ)充蛋白及血漿等雖可獲得一定療效，但是無法逆轉(zhuǎn)患者病情及疾病走勢(shì)。恩替卡韋聯(lián)合促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素是目前治療慢性重癥乙型肝炎的新方案，恩替卡韋分散片是強(qiáng)烈抑制乙肝病毒復(fù)制的核苷類藥物，可組織肝功能進(jìn)一步損害。促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素可以刺激肝細(xì)胞DNA合成，顯著促進(jìn)壞死肝細(xì)胞再生、恢復(fù)部分肝功能。恩替卡韋分散片與促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素聯(lián)合應(yīng)用已經(jīng)在個(gè)別慢性重癥乙型肝炎患者中取得良好效果，但是關(guān)于其系統(tǒng)性臨床研究報(bào)道仍較少，其療效發(fā)揮的具體機(jī)制也不明朗[3-4]。

血清中HBV-DNA定量是病毒復(fù)制最直接及可靠的指標(biāo)，其含量可以直接反映患者病毒血癥的水平，也是評(píng)價(jià)一種治療方式有效與否的最客觀標(biāo)準(zhǔn)[5]。本研究結(jié)果顯示觀察組患者的治療后血清HBV-DNA載量更低，提示恩替卡韋分散片聯(lián)合促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素可以較常規(guī)治療取得更好的臨床效果[6]。肝纖維化是肝炎病毒引起肝臟損害的常見表現(xiàn)，肝細(xì)胞破壞及肝組織炎癥反應(yīng)則是造成肝纖維化的內(nèi)因，其中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）是肝纖維化進(jìn)程中的關(guān)鍵因子，也是啟動(dòng)靜息狀態(tài)肝星狀細(xì)胞活化及轉(zhuǎn)化的初始信號(hào)之一[7]。較多臨床研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)TGF-β1水平與肝纖維化程度具有直接聯(lián)系，當(dāng)肝細(xì)胞壞死嚴(yán)重、肝組織炎癥明顯時(shí)，分泌的細(xì)胞因子TGF-β1顯著增加，可能與肝炎病毒感染后機(jī)體免疫功能異常所致。本研究觀察組患者的治療后血清TGF-β1水平較低，提示恩替卡韋聯(lián)合促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素可以有效阻礙肝細(xì)胞進(jìn)一步破壞導(dǎo)致的肝纖維化進(jìn)程。

慢性重癥乙型肝炎患者當(dāng)HBV感染外周血單核細(xì)胞后，可導(dǎo)致輔助性T細(xì)胞1（Th1）及輔助性T細(xì)胞2（Th2）的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)失去平衡，影響機(jī)體正常的免疫功能，使單核細(xì)胞中的HBV無法得到及時(shí)有效的清除，進(jìn)一步加重肝組織損傷、加重肝臟炎癥反應(yīng)、激活枯否細(xì)胞釋放炎癥因子，增加了慢性重癥乙型肝炎的治療難度[8]。而肝臟為合成補(bǔ)體的重要器官，慢性重癥乙型肝炎造成的肝臟功能損傷及病毒復(fù)制過程均可消耗大了補(bǔ)體C3、C4，補(bǔ)體含量不足將導(dǎo)致病毒無法及時(shí)清除。本研究發(fā)現(xiàn)觀察組患者的治療后血清IL-6水平低于對(duì)照組，IFN-γ、C3及C4水平高于對(duì)照組，提示恩替卡韋分散片聯(lián)合促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素有助于優(yōu)化Th1/Th2細(xì)胞功能平衡，并減少補(bǔ)體消耗以保護(hù)機(jī)體免疫功能。

固有免疫分子TRIM5α近年來發(fā)現(xiàn)在抗病毒免疫中發(fā)揮重要作用，其具有廣泛的抗逆轉(zhuǎn)錄病毒作用。可溶性程序性死亡1（sPD-1）是重要的T、B細(xì)胞活化的負(fù)性調(diào)控分子，通過與其配體介個(gè)發(fā)揮免疫抑制或負(fù)調(diào)控，對(duì)維持機(jī)體的免疫耐受發(fā)揮著重要的作用。外周血細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)抑制因子-1（SOCS-1）是重要的肝臟炎癥性抑制因子，通過調(diào)節(jié)細(xì)胞因子抑制肝臟炎癥，具有抑制Janus激酶-信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子與轉(zhuǎn)錄激活子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的作用，可以抑制B細(xì)胞的活化與增值，當(dāng)SOCS-1缺失時(shí)體內(nèi)B淋巴細(xì)胞胞體異常增大并產(chǎn)生自身反應(yīng)性抗體[9]。本研究發(fā)現(xiàn)觀察組患者的治療后血清TRIM5α、SOCS-1水平高于對(duì)照組患者，sPD-1水平低于對(duì)照組患者，提示恩替卡韋分散片聯(lián)合促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素治療可以優(yōu)化免疫分子的表達(dá)，最終發(fā)揮刺激機(jī)體抗病毒、抗炎癥免疫反應(yīng)。

本研究認(rèn)為恩替卡韋分散片聯(lián)合促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素可以有效降低慢性重癥乙型肝炎患者的血清HBV-DNA載量及TGF-β1水平、提升自身免疫能力，值得在日后臨床實(shí)踐中推廣應(yīng)用。

[1]OKAGAWA Y,TAKADA K,HISAIH,et al.Successful treatment with entecavir for reactivation of hepatitis B virus following systemic chemotherapy in a hepatitis B surface antigen-negative patient with colorectal cancer[J].Intern Med,2014,53(16):1759-1762.

[2]OZARAS R,METE B,CEYLANB,et al.First-line monotherapies of tenofovir and entecavir have comparable efficacies in hepatitis B treatment[J].Eur J Gastroenterol Hepatol.2014,26 (7):774-780.

[3]SHOUVALD.The pros and cons of lamivudine vs.entecavir in decompensated or severe acute exacerbation of chronic hepatitis B[J].J Hepatol,2014,60(6):1108-1109.

[4]TSAI WL,CHIANG PH,CHAN HH,et al.Early entecavir treatment for chronic hepatitis B with severe acute exacerbation [J].Antimicrob Agents Chemother,2014,58(4):1918-1921.

[5]MIQUEL M,NU?EZó,TRAPERO-MARUGANM,et al.Efficacy and safety of entecavir and/or tenofovir in hepatitis B compensated and decompensated cirrhotic patients in clinical practice[J]. Ann Hepatol,2013,12(2):205-212.

[6]肖寒,馬陳斌,張利霞.恩替卡韋對(duì)慢性乙型肝炎患者血清中HBVDNA載量與TGF-β1的影響[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2012, 32(4):589-591.

[7]TANAKA H,SAKUMA I,HASHIMOTO S,et al.Hepatitis B reactivation in a multiple myeloma patient with resolved hepatitis B infection during bortezomib therapy:case report[J].J Clin Exp Hematop,2012,52(1):67-69.

[8]AOUDJANE S,CHAPONDA M,GONZ？LEZ DEL CASTILLO AA,et al.Hepatitis B virus sub-genotype A1 infection is characterized by high replication levels and rapid emergence of drug resistance in HIV-positive adults receiving first-line antiretroviral therapy in malawi[J].Clin Infect Dis,2014,59(11):1618-1626.

[9]MCMAHON BJ,BULKOW L,SIMONS B,et al.Relationship between level of hepatitis B virus DNA and liver disease:a population-based study of hepatitis B e antigen-negative persons with hepatitis B[J].ClinGastroenterol Hepatol,2014,12(4):701-706.

Efficacy analysis of Entecavir dispersible tablets combined with hepatocyte growth-promoting factors in treating chronic severe hepatitis B

Qian DOU,Jing-pei DU,Rui YANG,Shu-yuan LIU,Chang-an LI,Wei-feng ZHAO
(Department of Infectious Diseases,the Third Affiliated Hospital of Xinxiang Medical College, Xinxiang,Henan 453003,P.R.China)

【Objective】To study the efficacy of Entecavir dispersible tablets combined with hepatocyte growthpromoting factors on serum HBV-DNA load,TGF-β1(Transforming growth factor β1)of chronic severe hepatitis B.【Methods】96 cases of severe hepatitis patients received treatment in our hospital were enrolled and divided into two group according to random number table method,control group received conventional treatment,observation group received Entecavir dispersible tablets combined with hepatocyte growth-promoting factors.Then serum HBV DNA load,TGF-β1and immune molecules contents were compared.【Results】Serum HBV DNA loads and TGF-β1 contents of observation group after treatment were lower than those of control group.Serum Interleukin-6(IL-6)level of observation group after treatment were lower than that of control group;Interferon-γ(IFN-γ),C3 and C4 levels were higher than those of control group patients.Serum tripartite-motif protein5α(Trim5α),suppressors of cytokine signaling 1(SOCS1)levels of observation group were higher than those of control group patients;soluble programmed death 1(sPD-1)level was lower than that of control group patients.【Conclusion】Entecavir dispersible tablets combined with hepatocyte growth-promoting factors treatment can effectively reduce serum HBV DNA load and TGF-β1 level of severe hepatitis patients and improve immune ability.

severe hepatitis;Entecavir dispersible tablets;hepatocyte growth-promoting factors

R575.1

B

2

1005-8982（2015）28-0066-04

2015-04-06