高效液相色譜法對飲用水中農藥殘留的檢測分析研究

【摘要】目的　建立一種固相膜萃取-高效液相色譜法，測定飲用水中12種氨基甲酸酯類農藥殘余量。方法　采用高效液相色譜測定法：將濾水樣真空后，使用乙酸乙酯洗脫濾膜，最后甲醇溶解和氮氣吹干洗脫液。結果 6次重復性試驗后，結果表明濃度0.05～12.5 mg/L甲萘威，以及濃度0.1～25 mg/L其他幾種物質，其線性關系良好，相關系數r均≥0.999。最低檢測濃度：S/N＝11時對應的樣品濃度，檢出限：S/N＝4。平均回收率在56.3%～96.4%，精密度＜7.6%。結論 根據本文所提出的方法，分離效果好，樣品前處理便捷，檢測靈敏度較高，并且能減少有機試劑的用量。

doi：10.3969/j.issn.1674-9316.2015.24.009

作者單位：154007 佳木斯疾病預防控制中心

Determination of Pesticide Residues in Drinking Water by High Performance Liquid Chromatography

SONG Yanjia Disease Prevention and Control Center of Jiamusi City，Jiamusi 154007，China

【Abstract】

Objective To establish a Solid Phase Extraction-High Performance Liquid Chromatography to test drinking water 12 carbamate pesticide for residualamount. Methods HPLC methods: the sample after vacuum filtration using ethyl acetate membrane，and finally dissolved in methanol and nitrogen blow eluent. Results After 6 repeated tests，it showed that the concentration of 0.05 mg / L～12.5 mg / L carbaryl，and the concentration of 0.1 mg / L～25 mg / L several other substances，a good linear correlation coefficient，r≥0.999. Minimum detectable concentration: S / N=11 corresponding sample concentration，detection limit: S / N=4. The average recovery rate was 56.3% ～96.4%，and accuracy＜7.6%. Conclusion According to the proposed method，it has good separation，sample pretreatment convenient，high sensitivity，and can reduce the amount of organic reagents.

【Key words】　HPLC，Solid phase extraction，Water，Carbamate

化學農藥是保障農業的重要手段，全世界每年應用農藥挽回的損失占全部收成的15%以上，如果不使用農藥，農作物會減產30%，而產品的價格會上漲70%。根據農藥組成原料的來源分為：有機農藥、無機農藥、微生物農藥和植物性農藥。氨基甲酸酯是具有NH（CO）O-官能團的有機化合物，由于其具有光譜、高效、分解快、對人畜低毒等優點，成為應用較廣的新開發農藥。而該類農藥的廣泛應用，造成了地下水和其他飲用水源的污染，導致飲水安全隱患，因此對飲用水中氨基酸甲酯殘留檢測非常必要。 固相膜萃取技術（SPE）是在液相色譜分離基礎上產生的新型樣品檢測方法 ［1］，本研究應用固相膜萃取法處理生活飲用水樣后，對飲用水中氨基甲酸酯類農藥的殘留進行高效液相色譜法檢測。

1　試驗材料與方法

1.1　儀器及試劑

所采用的儀器有：（1）渦旋混勻器：IKAvortexgenius 3型，德國生產；（2）固相萃取膜：ENVI-18DSK 47 mm型，美國supelco公司生產；（3）氮吹儀：N-EVAP 111型，美國Organomation Associates公司生產；（4）高效液相色譜儀：Agilent 1200，美國生產（配DAD檢測器）；（5）超純水系統：美國MillIPore 公司生產。

制備標準的儲備液：稱取250 mg標準物質，用甲醇溶解，將容量固定至25 ml，得到濃度為1 000 mg/L的貯備液，放置在4℃條件下保存。試驗所用的甲醇為HPLC級別，水樣為超純水，標準物質指的是氨基酸甲酯類物質，包括速滅威、滅多威、抗芽威、殺蟲威、異丙威、涕滅威、殘滅威、甲萘威、呋喃丹等，純度均大于99.5%。

1.2　試驗方法

1.2.1　樣品前處理 將C 18固相萃取膜裝入過濾器中，分別用10 ml乙酸乙酯、15 ml pH3及5 ml甲醇進行水活化，應用真空泵抽濾，液面恰好覆蓋薄膜表面為佳。 最后用15 ml乙酸乙酯分成三次洗脫，用20 ml離心管收集洗脫液，瓶壁殘留物質用5 ml乙酸乙酯清洗。

1.2.2　測定標準曲線 提取50 ml/L的氨基甲酸酯標準溶液，使用7：3甲醇-水對其加以稀釋， 配成濃度不等的標準系列（0.1～25 mg/L），采用0.45μm針頭進行過濾，結果表明12種氨基甲酸酯在該區間內具備良好的線性關系，其中相關系數r≥0.999。

2　結果與分析

2.1　色譜條件的優化

色譜柱的確定。結果表明，分離12種氨基甲酸酯的效果，AgilentHC-C8較AgilentHC-C18優秀；洗脫程序 ：經過預先的試驗，流動相只需要使用甲醇-水即可獲得良好的色譜波峰； 確定DAD檢測波長： 對氨基甲酸酯混合標準溶液在不同范圍波長下進行光譜監測分析，發現最優響應效果的波長為210 nm；柱溫：我們分別采用40℃、35℃和30℃的不同柱溫進行試驗，結果表明不同柱溫的波峰面積和出現波峰的時間無明顯差異，考慮到使用壽命的問題，本文采取30℃的柱溫。

2.2　樣品前處理條件優化

洗脫劑：采用0.1 mg/L的樣品，分別對乙酸乙酯、二氯甲烷、乙酸乙酯–二氯甲烷的洗脫效果進行對比，結果顯示乙酸乙酯的效果最佳。 洗脫劑劑量：加標樣品的加標濃度為0.1 mg/L， 分別選取20 ml、15 ml和10 ml乙酸乙酯進行洗脫效果對比，結果表明15 ml乙酸乙酯時即可達到效果。

2.3　方法評價

最低檢測濃度、線性范圍及檢出限：6次重復性試驗后，結果表明濃度0.05～12.5 mg/L甲萘威，以及濃度0.1～25 mg/L的其他幾種物質，其線性關系良好，相關系數r≥0.999。最低檢測濃度：S/N＝11時對應的樣品濃度，檢出限：S/N＝4。

2.4　精密度試驗、回收率試驗

精密度試驗：分別將濃度為0.1 mg/L、0.05 mg/L、0.01 mg/L的混合標準溶液加入水樣中，6次重復性測定結果表明：待測物質對應的上下限分別為7.6%、0.7%?；厥章试囼灒喝◇w積為200 ml的4份水樣，一份作空白樣，余三份試樣中加入濃度分別為0.1 mg/L、0.05 mg/L、0.01 mg/L混標溶液，結果表明12種組分回收率為56.3%～96.4%。

2.5　測定實際樣品

采用本文的試驗方法，對自來水末梢水進行氨基酸脂類農藥殘留測定，結果表明每份水樣中農藥殘余量均＜0.005 mg/L。

3　討論

多數的農藥殘留均屬于有毒有害的物質，它們廣泛存在水體、土壤、植物、大氣等我們的日常生活環境中，這種有害物質通過不同的途徑進入人體中，對我們的身體健康產生極大的危害 ［2-3］。本研究采用高效液相色譜法檢測生活飲用水中殘留的農藥，具有堵塞少、有機溶劑用量低、富集程度高以及萃取速度快等特點，能夠測定飲用水中氨基甲酸酯類的農藥殘留量，同時因為它能夠滿足水中氨基甲酸酯類農藥殘留的常規性檢測，是一種較新的檢測方法，能夠為飲用水中農藥殘留的檢測提供理論依據，簡單可行。