吸收放散試驗在高效價冷凝集素導(dǎo)致的血型鑒定和交叉配血困難時的臨床應(yīng)用價值

【摘要】 目的 分析因高效價的冷凝集素導(dǎo)致的正反定型不符合和交叉配血困難時的解決方案。方法 選擇因高效價冷凝集素的存在而導(dǎo)致的交叉配血和血型鑒定異常的8例患者作為研究對象，對患者血漿采用吸收放散方法清除冷凝集素后再進(jìn)行血型鑒定和交叉配血。結(jié)果 運用吸收試驗和放散試驗可以有效的減少冷凝集素對實驗過程和結(jié)果的干擾。結(jié)論 吸收放散法可有效的減少甚至去除冷凝集素，使得檢驗結(jié)果真實可靠。

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B

【文章編號】1674-9308（2015）05-0171-02

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2015.05.143

作者單位：157000 黑龍江省牡丹江市腫瘤醫(yī)院

The Value of Absorption and Irradiation Test in Blood Group and Cross-matching Test out Caused by the High Titer of Cold Agglutinins in Clinical Application

KONG Xiuhong, Mudanjiang city tumor hospital, Mudanjiang 157000, China

[Abstract] Objective Analysis of the solution of blood group identification in discrepancy and blood cross-matching in difficulty due to the high titer of cold agglutinins. Methods Selection of the group identification and cross-matching test out caused by the high titer of cold agglutinins in 8 cases ofpatients as the research object. Use the Method of absorption and irradiation test to clear the cold agglutinin. Results Absorption and irradiation test can reduce the interference of cold agglutination on the experimental process and results. Conclusion Absorption and irradiation test can effectively reduce or even remove the cold agglutinin,which makes the test result is true and reliable.

[Key words] Cold agglutinin, Absorption and irradiation test, ABO blood group identification

冷凝集素為存在于人體體內(nèi)的少量的自身抗體，一般正常人的血清中有效價低于1∶16的冷凝集素，當(dāng)溫度達(dá)到20℃以上時凝集情況就會消失，在室溫的條件下，若冷凝集素效價大于1∶4則在輸血工作中有重要的意義 [1]。臨床上的一些常見疾病如感染性疾病、血液系統(tǒng)疾病、腫瘤性疾病、免疫系統(tǒng)性疾病和一些藥物影響等，可導(dǎo)致患者血清中冷凝集素效價增高 [2]。為了確保輸血過程和輸血治療的安全有效，若在給患者進(jìn)行配血和血型鑒定時出現(xiàn)高效價冷凝集素的干擾，需要進(jìn)行吸收放散試驗對檢驗結(jié)果進(jìn)行審查，確保實驗結(jié)果的真實可靠，確保輸血治療的安全有效，降低輸血過程中的風(fēng)險和隱患 [3]。本次研究課題通過對8例因疾病導(dǎo)致的冷凝集素效價較高而影響檢驗過程，導(dǎo)致患者與供血者血液交叉配血不相合和患者血型鑒定不符的情況進(jìn)行研究和討論，現(xiàn)進(jìn)行如下報道。

1　資料與方法

1.1　一般資料

按照本課題的研究需要選擇2011年6月～2014年6月，四年間確定的因冷凝激素的存在而導(dǎo)致的交叉配血和血型鑒定異常的8例患者的臨床資料作為研究對象。其中男性患者5例，女性患者3例，年齡范圍為18～56歲，平均年齡為40.1歲。患者患病情況：再生障礙性貧血患者1例、肺心病1例、淋巴細(xì)胞性白血病1例、肝癌2例、DIC患者1例、肺癌1例、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿1例。

1.2　試劑和儀器

ABO單克隆抗體（批號為2001008）、直接抗人球蛋白試劑、ABO標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞（批號為20001106）和抗體篩選細(xì)胞購自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司。0.9%生理鹽水和微柱凝膠購自瑞士達(dá)亞美公司，凝聚胺（Polyberne）試劑盒和離心機(jī)購自珠海貝索生物有限公司。水浴箱購自天津市泰斯特儀器有限公司。

1.3　實驗操作方法

1.3.1　ABO血型鑒定 抽取患者靜脈血液3 ml于EDTA-K2抗凝管中，離心后配制成濃度為3%～5%的紅細(xì)胞懸液用于正定型，吸取上清血漿用于反定型。當(dāng)對患者進(jìn)行ABO血型鑒定時，可見正定型和反定型的血型結(jié)果不相符，正定型采用患者紅細(xì)胞和抗A和抗B單克隆血清做凝集試驗，可見兩管中紅細(xì)胞均凝集，血型應(yīng)為AB型。反向定型采用患者血漿與標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞做凝集試驗，可見兩管中紅細(xì)胞也凝集，血型則為O型。自身對照管也可見凝集，表示患者血清中有高效價的冷凝集素或自身抗體存在。

1.3.2　交叉配血試驗 在室溫條件下患者血漿分別與A、B、AB、O型供血者紅細(xì)胞及自身紅細(xì)胞均呈現(xiàn)3+～4+凝集，在37℃條件下呈2+凝集，患者次側(cè)配血亦然。

1.3.3　放散試驗 取濃度為0.9%生理鹽水100 ml，置于37℃水浴箱中溫育20～30 min，待生理鹽水溫度達(dá)37℃后取8 ml于試管中，加入患者紅細(xì)胞0.5 ml，混勻，3 000 r/min離心2～5 min，去上清液，如此操作反復(fù)洗滌6～8次，直至顯微鏡下觀察患者紅細(xì)胞無凝集狀態(tài)時作ABO正定型鑒定患者血型。

1.3.4　吸收試驗 取標(biāo)準(zhǔn)的O型紅細(xì)胞配制成濃度為2%紅細(xì)胞懸液，加入等量的患者血漿后置于4℃冰箱中1 h（目的為吸收血漿中的冷凝集素）， 最后3 000 r/min離心5 min取上清液。若1次吸收不完全，可重復(fù)此操作再吸收1次。取上清液作反定型、不規(guī)則抗體篩查和交叉配血。

1.3.5　冷凝集效價測定 取患者血清0.2 ml作倍比稀釋，每管中加入濃度為2%的標(biāo)準(zhǔn)O型紅細(xì)胞0.2 ml，置4℃冰箱中1 h后取出，經(jīng)3 000 r/min離心1 min，觀察結(jié)果，以最高稀釋倍數(shù)肉眼觀察可見凝集者為其冷凝集素的測定效價。

2　結(jié)果

2.1　冷凝集效價測定

受檢的8例患者中冷凝集素效價最低為32，冷凝集素效價最高可達(dá)1 024，導(dǎo)致在使用ABO單克隆抗體測定患者紅細(xì)胞表面抗原和使用ABO標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞檢測患者血漿中的抗體時均發(fā)生凝集現(xiàn)象。

2.2　吸收試驗

取上清液作反定型可得到患者準(zhǔn)確血型結(jié)果。取上清液作交叉配血可見不論是在鹽水介質(zhì)、抗球蛋白介質(zhì)或者聚凝胺此試驗結(jié)果均不出現(xiàn)凝集，交叉配血結(jié)果為相合。

2.3　放散試驗

取放散試驗后的患者紅細(xì)胞做血型正定型鑒定可得到患者準(zhǔn)確的血型結(jié)果。最終可見患者正反定型相符合，可排除有亞型的存在。

3　結(jié)論

吸收放散試驗是臨床上常用的、實用的、可靠的減少患者血漿中冷凝集素的血清學(xué)方法。吸收試驗通過在適宜的環(huán)境中利用標(biāo)準(zhǔn)的O型紅細(xì)胞吸收患者血漿中的抗體。放散試驗通過在適宜環(huán)境的條件下利用化學(xué)和物理原理將患者紅細(xì)胞上的冷凝集素洗脫下來。吸收和放散過程不僅將患者的紅細(xì)胞和血漿中影響因素（冷凝集素）濃縮提煉了出來，而且保證了血型鑒定和交叉配血結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。綜上所述，吸收放散法可有效的減少甚至去除冷凝集素，為臨床輸血治療的安全性和有效性奠定基礎(chǔ)。