組織病理診斷中應用免疫組化技術的價值分析

【摘要】 目的 對組織病理診斷中應用免疫組化技術的應用價值進行探討分析。方法 將56例腫瘤患者隨機分為觀察組和對照組，對照組患者運用活檢穿刺法，觀察組患者運用免疫組化法，對比兩種方法陽性率。結果 觀察組的陽性率顯著高于對照組（P＜0.05）。結論 應用免疫組化技術進行組織病理診斷，能夠提高陽性率，可推廣。

【文獻標識碼】B

【文章編號】1674-9308（2015）05-0177-01

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2015.05.147

作者單位：130021長春，吉林省腫瘤醫院

通訊作者：吳巍，E-mail：wuwei123@163.com

Analysis on Using Immunohistochemistry Technique in Tissue Pathology Diagnosis

GUO Haiyan　GUO Lili　WANG Zhisheng WU Wei, The tumor hospital of Jilin Province, Changchun 130021, China

[Abstract] Objective　To explore the application value of analysis of histopathologic diagnosis in immunohistochemical technique. Methods 56 cases of tumor patients were randomly divided into observation group and control group, the control group patientsby biopsy method, the observation group patients using immunohistochemistry method, the positive rate of comparison of two methods. Results The positive rate of the observation group was significantly higher than that of the control group (P<0.05). Conclusion Immunohistochemical technique for histopathological diagnosis, can improve the positive rate, can be extended.

[Key words] Immunohistochemical technique, Pathological diagnosis, Positive rate

隨著各種抗體新用途的不斷增多以及新型抗體種類的不斷增加，在病理診斷中，免疫組化技術在對腫瘤進行診斷、鑒別、分類以及預后判斷等方面發揮著重要作用 [1]。但免疫組化技術具有一定局限性，為將免疫組化技術在組織病理診斷中的作用充分發揮出來，需要對免疫組化原理、技術進行深入研究。筆者對組織病理診斷中應用免疫組化技術的價值進行探討，報告如下：

1　資料與方法

1.1　一般資料

選取我院2010年2月～2013年2月收治的56例腫瘤患者作為研究對象，所有患者均符合WHO制定的診斷標準。隨機分為觀察組和對照組，每組各28例，其中，男36例，女20例，年齡24～62歲，平均年齡（41.1±3.6）歲；平均病程8個月；15例肝細胞肝癌，35例轉移性腫瘤，4例肝內膽管癌，2例血管瘤；兩組患者以上四項資料對比無顯著性差異（P＞0.05），具有可比性。

1.2　方法

對照組患者給予穿刺活檢；觀察組患者給予免疫組化技術，詳細步驟如下：

使用試劑主要包括10%中性緩沖甲醛固定液、透明液、脫水液、蒸餾水、浸蠟液、中性樹膠以及UltrasenSitiveTM SP試劑等。首先固定切片：每例患者取一塊規格為1 cm×2 cm×0.2 cm的組織，使用10%中性緩沖甲醛固定液固定2 h，使用透明液透明1 h，脫水液脫水1 h，浸蠟液1 h，然后使用石蠟包埋，運用常規切片法進行切片，厚度約為2 μm；免疫組化染色：固定好切片脫蠟處理后，使用3%雙氧水在室溫下孵育十分鐘，然后使用蒸餾水洗滌三分鐘，三次后，再使用高壓鍋修復兩分鐘，將高壓鍋溫度控制為110℃；使用PBS洗滌五分鐘，三次后，放置37℃室溫下孵育兩個小時，再次使用PBS進行洗滌，并加入UltrasenSitiveTM SP試劑；使用37℃孵育后，DAB顯色，運用蒸餾水進行沖洗；最后使用中性樹膠進行封固。

1.3　陽性診斷標準 [2]

陽性：免疫組化染色為棕黃色。

1.4　統計學分析

采用SPSS17.0軟件進行數據的統計與分析，計數資料采用χ 2檢驗，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2　結果

觀察組：經免疫組化染色后，患者細胞結構為變異型性，其中，24例患者AFP（α-Fetoprotein）和Glypican-3為陽性，陽性率為85.7%，同于手術檢查結果；對照組：14例患者AFP（α-Fetoprotein）和Glypican-3為陽性，陽性率為50.0%，觀察組的陽性率顯著高于對照組（P＜0.05）。

3　討論

在病理診斷中，免疫組織化學技術是其中的一種常用法，對各種腫瘤進行診斷的準確率較高。免疫組織化學染色為一種新型的病理技術，其操作受到環境因素影響較大，如易受到固定劑、抗原修復、切片、時間、溫度以及人為等方面因素影響，進而導致病理診斷結果出現誤診。因此，為有效提高診斷正確率，需要嚴格根據以下標準進行操作：（1）組織固定：在組織固定中，主要使用10%中性緩沖甲醛固定液，與甲醛固定液相比，其具有固定好、固定時間久的優點，且在三個月內，其陽性率較穩定；（2）烤片：適宜放置到60℃～68℃的恒溫箱內進行加熱，避免溫度過高；（3）抗原修復：時間控制到8分鐘內，噴汽后約兩分鐘，將鍋端開，使切片自然冷卻，開始染色；（4）染色：免疫組織化學染色時，需要對蘇木素進行復染，避免復染程度過深，如過深，會給染色比較淺的陽性細胞覆蓋，對正確診斷產生影響 [3]。

另外，免疫組化顯色屬于一種酶促反應，能夠與抗原抗體復合物的堿性磷酸酶、過氧化物酶和底物發生反應，形成有顏色復合物，在組織與細胞抗原位置進行沉淀。但由于組織標本來源不同，其抗原含量也不同，且細胞分化不同，顯色反應時間也不同，進行染色時，需要注意以下幾個方面：（1）染色過程中，要保持切片處于濕潤狀態；（2）孵育時，要合理控制孵育盒內蒸餾水量；（3）加抗體時主要選擇單克隆抗體；（4）進行孵育時，要保證孵育盒的平整，保證抗體液體的均勻性，防止抗體液體流入組織內，導致出現假陰性。

本組研究中，觀察組運用免疫組化法，對照組運用活檢穿刺法，結果表明，觀察組的陽性率顯著高于對照組（P＜0.05）。

綜上所述，在組織病理診斷中應用免疫組化技術，能夠有效提高陽性率，可在臨床中廣泛推廣。