亞低溫治療缺氧缺血性腦病新生兒中基質金屬蛋白酶-9及行為神經評分的變化及意義

姚愛敏 夏麗娟 李建玲 司志梅 姚亮 楊紅靜 王葉青

亞低溫治療缺氧缺血性腦病新生兒中基質金屬蛋白酶-9及行為神經評分的變化及意義

姚愛敏 夏麗娟 李建玲 司志梅 姚亮 楊紅靜 王葉青

目的 觀察選擇性頭部亞低溫治療新生兒缺氧缺血性腦病(HIE)中水平基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)及行為神經評分(NBNA)的變化。方法 50例中重度HIE患兒, 隨機分為常規治療組和亞低溫治療組, 各25例, 分別在入院時和入院后3、14 d采集靜脈血, 收集血清應用ELISA法檢測MMP-9的水平；同時比較兩組患兒同時間點的NBNA評分。結果 入院時兩組MMP-9比較及NBNA評分比較差異無統計學意義(P＞0.05)；3 d后常規組MMP-9繼續升高而亞低溫組無明顯變化, 亞低溫組NBNA無明顯變化而常規組繼續降低；14 d后兩組MMP-9均下降, 但亞低溫組明顯低于常規組, 兩組NBNA評分均增加, 而亞低溫組明顯高于常規組；血清MMP-9水平與NBNA評分呈顯著負相關(r1=-0.825, r2=-0.846, r3=-0.857, P＜0.05)。結論 選擇性頭部亞低溫治療可通過抑制MMP-9的水平而有效降低缺氧缺血后腦損傷的程度, 進而改善患兒行為神經能力。

亞低溫治療；行為神經評分；基質金屬蛋白酶-9；新生兒；缺氧缺血性腦病

研究已證實亞低溫可抑制氧自由基的連鎖反應, 減少氧自由基的生成, 而MMP-9通過氧自由基等炎性介質激活, 本研究通過檢測MMP-9及行為神經評分在選擇性頭部亞低溫治療中的變化, 并比較二者的相關性, 探討局部亞低溫治療在治療缺氧缺血性腦病時對MMP-9及新生兒行為神經評分的影響［1-3］。

1 資料與方法

1.1 一般資料 實驗研究對象來源于2013年10月～2014年6月在保定市婦幼保健院新生兒重癥監護中心(NICU)收治的中重度HIE新生兒50例, 因重度窒息并發HIE于生后6 h內入院(生后5 min Apgar評分≤5分, 生后短時間內有臨床神經系統癥狀和體征)。隨機將患兒分成常規組和亞低溫組, 各25例；兩組間胎齡、體重、性別比例、Apgar評分、入院時血氣pH值等病例資料比較差異無統計學意義(P＞0.05), 具有可比性。見表1。排除標準：先天畸形、顱內出血、貧血、嚴重宮內、產時感染等。治療均經家屬同意,治療方案經保定市婦幼保健院倫理委員會批準。

1.2 方法 選擇性亞低溫治療組除按HIE常規治療外,在入院時采用選擇性頭部亞低溫治療, 應用半導體循環水降溫儀將降溫帽包裹于患兒頭部, 水溫控制在6～12℃, 將皮膚溫度探頭固定在前額正中, 使體表皮膚溫度維持在(33.5±0.5)℃, 肛溫(34.0±0.5)℃, 持續治療72 h, 停止亞低溫治療后自然復溫, 必要時遠紅外輻射臺復溫, 復溫速度0.2～0.5℃/h.24 h復溫至36.5℃左右。常規治療組除不予局部亞低溫治療外, 余治療與亞低溫組相同。所有患兒在入院時、第3 天(即亞低溫治療滿72 h)、第14天采集靜脈血1 ml, 注入普通試管.3 000 r/min離心10 min, 取血清置于-70℃冰箱保存, 應用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測血清中MMP-9的水平, 操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.3 試劑盒與儀器 MMP-9的ELISA試劑盒由北京博凌科為生物科技有限公司生產, 實驗儀器由河北大學職工醫學院實驗室提供。亞低溫治療儀系長春市長江科技中心生產。

1.4 觀察指標 檢測血清MMP-9水平及NBNA評分：在室溫(25～27℃)、半暗的安靜環境中, 由1名經過訓練的新生兒科醫師采用鮑秀蘭制定的20項新生兒行為神經測查法對所有入選患兒于入院時和治療3、14 d后進行NBNA評分。

1. 5 統計學方法 采用SPSS13.0統計學軟件進行統計分析。計量資料以均數±標準差(±s)表示, 采用t檢驗。指標的相關性分析采用直線相關分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

入院時兩組MMP-9比較及NBNA評分比較差異無統計學意義(P＞0.05)；3 d后常規組MMP-9繼續升高而亞低溫組無明顯變化, 亞低溫組NBNA無明顯變化而常規組繼續降低；14 d后兩組MMP-9均下降, 但亞低溫組明顯低于常規組, 兩組NBNA評分均增加, 而亞低溫組明顯高于常規組；血清MMP-9水平與NBNA評分呈顯著負相關(r1=-0.825, r2= -0.846, r3=-0.857, P＜0.05)。

3 討論

HIE是由于圍生期窒息導致的腦部缺氧缺血性損害, 發病機制復雜, 病理過程包括原發性損傷和再灌注損傷。而自由基連鎖反應是腦缺血再灌注損傷的核心環節。近來研究表明, 腦缺血再灌注后, 氧自由基及炎性介質產生增多, 激活MMP-9, 對細胞外基質造成不良影響, 從而破壞血腦屏障的完整性, 導致神經元及腦細胞方面的損傷 。

目前認為NBNA評分在早期發現新生兒腦損傷及預測后遺癥方面具有良好的敏感性及特異性［3］, 目前規定NBNA滿分40分, ≥35分為正常, ＜35分為異常。本文兩組新生兒入院時NBNA評分比較差異無統計學意義(P＞0.05)；治療3 d后常規治療組NBNA評分較前繼續降低, 而亞低溫治療組較前無明顯變化；治療14 d后兩組NBNA評分均上升, 但與常規治療組比較亞低溫治療組上升幅度明顯, 差異有統計學意義(P＜0.05)。研究進一步將NSE與NBNA評分進行相關性分析,結果顯示NSE水平變化與NBNA評分呈明顯負相關(r1=-0.825, r2=-0.846, r3=-0.857, P＜0.05)。

綜上所述, 結果提示局部亞低溫治療具有神經保護作用, 對腦功能恢復有促進作用, 且在觀察時間段內MMP-9與NBNA評分呈明顯負相關性, 支持MMP-9的水平變化可以反應亞低溫治療的療效。研究中發現兩組患兒NBNA評分均值仍低于35分, 說明對于中、重度HIE患兒仍需進行后期康復訓練指導, 這對于減輕和預防HIE后遺癥, 提高患兒生存質量有積極作用, 值得臨床推廣。

［1］ 孫夢思, 趙玲. 亞低溫治療新生兒缺氧缺血性腦損傷的研究進展.江西醫學院學報.2003.143(2):123-125.

［2］ 毛玲, 查運紅, 梅元武.基質金屬蛋白酶-9與腦缺血血腦屏障損傷的關系.國際神經病學神經外科學雜志.2006.33(1):96-97.

［3］ 崔彥存, 劉翠青, 李莉, 等.頭部亞低溫對新生兒缺氧缺血性腦病氧化應激損傷和行為神經評分的影響.中國新生兒科雜志.2012.27(3):153-156.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.06.062

2014-10-29］

071000 保定市婦幼保健院新生兒科(姚愛敏

李建玲 司志梅 姚亮 王葉青)；易縣疾病控制中心(夏麗娟)；曲陽縣人民醫院兒科(楊紅靜)