指紋圖譜在中藥質量控制中的應用簡析

劉玉梅

(銅仁職業技術學院 藥學院，貴州 銅仁 554300)

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指紋圖譜在中藥質量控制中的應用簡析

劉玉梅

(銅仁職業技術學院 藥學院，貴州 銅仁 554300)

中藥要推向現代化、國際化，需解決中藥質量控制這一關鍵問題。中藥指紋圖譜是現階段公認的評價中藥品質最重要的方法之一。簡述近年來幾種主要指紋圖譜方法在中藥質量控制中的應用。

指紋圖譜；中藥；質量控制

中藥是華夏兒女在與病魔作斗爭的五千年歷史中凝煉出來的最具中國色彩的人類瑰寶之一，在中華文明的延續與傳承中起到了不可估量的作用。未來，其也將為中華之崛起貢獻偉大的力量。中藥的質量控制是中藥邁向國際化、現代化必需邁過的坎，而中藥指紋圖譜是目前公認的評價中藥質量最為有效的手段之一。本文綜述了近年來指紋圖譜在中藥質量控制中的應用。

中藥指紋圖譜是指某種(或某產地)中藥材經適當處理后，采用一定的分析手段得到的能夠標示該中藥材或中成藥特性的某類或數類成分的色譜或光譜圖譜[1]。指紋圖譜是一種綜合的、可量化的鑒別模式，與中藥的“整體性”“模糊性”兩大特性完美地契合，可有效對中藥及其產品的真實性、質量的一致性及穩定性進行檢測和控制。

1 薄層色譜指紋圖譜

薄層色譜具有分析速度快、操作簡便、經濟、結果直觀、色彩參數明確、應用范圍廣、可同時鑒別多個樣品等優點。近年來，各種掃描、數碼成像和數據處理技術應用到薄層色譜的處理中，加大了信息量，提高了其綜合分析能力，被廣泛應用于中藥指紋圖譜研究中。夏玉英等[1]應用薄層色譜方法建立了穿心蓮藥材的高效薄層色譜指紋圖譜，并應用該指紋圖譜對比了產自廣東、廣西穿心蓮藥材的品質，結果顯示此方法操作簡便、快速且具有較高的專屬性。肖宏華等[2]建立了升麻的薄層色譜指紋圖譜，從對譜圖數據的處理中發現，升麻正品和非正品之間存在明顯的差異，而不同來源的正品之間差異并不明顯，表明可以應用薄層色譜指紋圖譜來鑒定升麻品質的真偽。趙翡翠等[3]采集了新疆烏頭屬植物的薄層色譜圖，并應用相關數據分析方法對其相似度、親緣性進行了分析、評價，進而建立了新疆烏頭屬植物的薄層色譜指紋圖譜。丁平等[4]采用高效薄層色譜(HPTLC)指紋圖譜的方法將市售幾種靈芝的化學成分進行了比較，結果顯示該方法可以為靈芝藥材的真偽進行有效的鑒別。該方法簡單易操作，普通實驗室均可完成該實驗。石洋等[5]應用TLC方法對貴州產首烏質量異同性進行了評價，其研究結果顯示可以應用TLC指紋圖譜的方法對貴州產首烏的質量進行有效評價。

2 氣相色譜指紋圖譜

很多中藥都含有揮發油類成分，且該類成分在一定程度上決定了某些中藥材的品質，但由于揮發性成分往往組成復雜，常由十幾種乃至上百種化學成分組成，要評價其品質，普通分析方法顯得有些乏力。氣相色譜(GC)的應用解決了這一難題。目前，氣相色譜-質譜(GC-MS)聯用技術在含有揮發性成分的中藥質量控制中起著舉足輕重的作用。劉洪玲等[6]建立了川芎揮發油的GC-MS指紋圖譜，該譜圖具有較好的重復性、精密度和穩定性，可對川芎揮發油成分進行質量評價。張艷等[7]應用GC-MS結合中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(2004A)建立了山蒼子油的GC-MS指紋圖譜，該譜圖能較完整地展現山蒼子油化學成分的基本信息，對山蒼子油的質量評價做出了一定的貢獻。耿放等[8]采用GC-MS指紋圖譜方法對不同批次的五加生化膠囊的質量進行研究，結果顯示五加生化膠囊的GC-MS指紋圖譜特征性及專屬性強，可作為五加生化膠囊揮發性成分質量控制的穩定方法。

3 液相色譜指紋圖譜的應用

高效液相色譜(HPLC)因其具有如下優點而在中藥指紋圖譜中得到非常廣泛的應用：分辨率高、速度快、重復性高、可自動化操作、分析精確度高、可檢測的化合物種類廣泛。特別是MS與HPLC聯用技術的廣泛應用，不僅可以采集并建立中藥的指紋圖譜，還可以進一步通過MS來確定中藥中主要成分的化學結構，為闡釋中藥關鍵化學成分提供有效依據。鞠建明等[9]應用HPLC-DAD(二極管陣列檢測器)方法建立了不同樹齡的邳州銀杏葉在不同采收期的指紋圖譜，為邳州銀杏葉的最佳采集時間提供了參考，同時，為銀杏葉的質量標準建立提供了依據。劉云飛等[10]采用HPLC-TOF-MS技術，建立了續斷的指紋圖譜，并采用高分辨質譜鑒定了續斷中的15個化學成分，使指紋圖譜的特征性更強，為續斷的質量控制提供了一個準確可靠的方法。鄧仕任等[11]應用HPLC-DAD方法建立不同批次芫花藥材的HPLC指紋圖譜，并用 HPLC-ESI-MS技術對指紋圖譜中的部分共有峰進行了歸屬，初步確定其中10個共有峰的化學成分，為芫花的質量控制提供了科學依據。

4 其他指紋圖譜的應用

4.1 毛細管電泳

近年來，以電場為驅動力的毛細管電泳技術(PCE)幾乎能夠對分析化學中所有的分離對象——小到無機離子, 大到蛋白質和高分子聚合物進行分析[12]。其分離原理是毛細管為分離通道，依據樣品中各組分淌度和分配行為上的差異而實現分離。其具有所需樣品量少、溶劑消耗少、抗污染能力強、可直接分析水溶液等優點。許靖等[13]建立了金錢白花蛇藥材的毛細管電泳指紋圖譜，確定9個共有峰。根據其HPCE指紋圖譜可將金錢白花蛇與蘄蛇和烏梢蛇區別開來，可以作為其質量控制的方法。吳浩等[14]應用高效毛細管電泳的方法建立了續斷的指紋圖譜，確認了14個共有峰，并應用聚類分析、相似度分析方法對所得指紋圖譜進行分析，結果顯示高效毛細管電泳指紋圖譜可對續斷的品質進行初步判斷。

4.2 紅外光譜

由于紅外光譜的高度專屬性，在藥品檢驗中，紅外光譜法常與其他理化方法聯合使用，用作有機藥品重要的鑒別方法。基于紅外光譜法的優點，其在中藥材質量控制方面也有較好的應用前景。其圖譜能給出樣品中所有化學成分的結構信息，且能與特定中藥材一一對應，成為中藥材質量控制的有效方法。同時，該方法還具有檢測速度快、操作簡單、適宜過程控制等優點。李超等[15]建立了通關藤的傅里葉變換紅外光譜指紋圖譜，并應用不同分析方法對該指紋圖譜進行相關分析，建立了快速鑒別不同產地通關藤的方法。徐海星等[16]利用傅立葉紅外光譜技術建立了不同產地10 批次蒼耳子藥材的紅外光譜指紋圖譜，并應用化學模式識別及相似度計算對所得指紋圖譜進行分析，為蒼耳子藥材的質量控制了提供一定的科學依據。張桂芝等[17]建立了姜科中藥材揮發油成分的紅外光譜指紋圖譜。該方法操作簡便，靈敏度高，專屬性強，重復性好，可對姜科藥材的質量進行評價。

4.3 核磁共振(NMR)

隨著NMR技術在代謝組學中的應用越來越成熟，其高度的重現性、特征性、易于解析和進一步研究的特性被越來越多的國內外中藥及分析化學家所重視。NMR方法由于具有需要樣品量少、樣品預處理簡單、提供信息量大等優點，適合于研究化學成分復雜的中藥材。楊應文等[18]利用1H-NMR技術建立了不同生長期當歸的指紋圖譜，并用主成分分析對所得譜圖進行分析，找到了當歸在生長過程中變化較為明顯的活性成分，為確定當歸的最佳采收時機提供了一定的科學依據。沈莉等[19]應用1H-NMR指紋圖譜-模式識別方法建立了不同品種升麻的鑒別方法。該方法吸取了1H-NMR在代謝組學中的主要優點，能快速對不同品種升麻樣品進行鑒別，是一種很有前景的控制中藥材質量的方法。姜苗苗等[20]建立了銀翹解毒液1H-NMR指紋圖譜，該圖譜專屬性、重現性強，操作簡便，能全面、快速、客觀地反映銀翹解毒液的質量，是一種有效的銀翹解毒口服液類中藥復方制劑的質量評價方法。

5 討論

目前中藥指紋圖譜的研究主要側重于化學成分及其比例，而對于不同來源、化學成分存在差異的同一藥材的藥理作用差異性研究還較少。如將此兩項研究結合起來，對于評價中藥材的品質將會起到很大的積極作用，這也是中藥現代化必需克服的一大難題。

[1] 夏玉英,寧娛,林朝展,等.穿心蓮藥材的高效薄層色譜指紋圖譜研究[J].華西藥學雜志,2014,29(1):63-65.

[2] 肖宏華,孫磊,金紅宇,等.5種升麻中有機酸色原酮和三萜皂苷的薄層色譜指紋圖譜分析[J].藥物分析雜志,2014,34(3):547-553.

[3] 趙翡翠,李杰,劉淑敏,等.新疆烏頭屬植物高效薄層色譜指紋圖譜研究[J].中國藥學雜志,2013,48(7):512-517.

[4] 丁平,余瓊希,梁英嬌,等.靈芝及其近緣種高效薄層色譜指紋圖譜的研究[J].中國藥學雜志,2009,44(24):1854-1857.

[5] 石洋,王慧娟,趙致,等.貴州不同產地何首烏薄層色譜指紋圖譜研究[J].山地農業生物學報,2013,32(1):75-77.

[6] 劉洪玲,于良生,紀恒勝,等.川芎揮發油的GC-MS指紋圖譜研究[J].中國藥房,2012,23(43):4101-4103.

[7] 張艷,金波,李金鳳,等.山蒼子油GC-MS指紋圖譜研究[J].中成藥,2013,35(11): 2452-2456.

[8] 耿放,王發善,朱魁元,等.五加生化膠囊的GC-MS指紋圖譜研究[J]. 中國實驗方劑學雜志,2012,18(16):89-92.

[9] 鞠建明,段金廒,錢大瑋,等.不同樹齡邳州銀杏葉在不同采收期指紋圖譜比較[J].中草藥,36(9):1388-1391.

[10] 劉云飛,季德,張春鳳,等.HPLC-TOF-MS歸屬續斷指紋圖譜中的化學成分[J].中國野生植物資源,2012,31(3):22-25.

[11] 鄧仕任,夏林波,董倩,等.芫花藥材的HPLC指紋圖譜及ESI-MS分析[J]. 中國實驗方劑學雜志,2011,12(24):32-35.

[12] 王天松.毛細管電泳與中草藥指紋圖譜[J].中成藥,2000,22(6):397-3991.

[13] 許靖,王成芳,杜樹山,等.金錢白花蛇商品藥材的高效毛細管電泳指紋圖譜研究[J].中成藥,2014,36(3):563-566.

[14] 吳浩,顧曉風,辛妮,等.續斷高效毛細管電泳指紋圖譜研究[J].藥物分析雜志,2012,32(7):1259-1263.

[15] 李超,楊生超,郭巧生,等.中藥通關藤紅外指紋圖譜研究[J].中國中藥雜志,2014,39(17):3311-3315.

[16] 徐海星,陳慧,許沛虎,等.不同產地蒼耳子紅外指紋圖譜鑒別[J].中藥材, 2014,37(6):971-973.

[17] 張桂芝,孟慶華.四種姜科中藥揮發油的紅外指紋圖譜研究[J].現代中藥研究與實踐,2014,28(4):14-16.

[18] 楊應文,王亞麗,薩日娜,等.不同生長期當歸H NMR指紋圖譜的研究[J].波譜學雜志,2013,30(1):69-79.

[19] 沈莉,趙燕燕,謝洪平,等.升麻的1H-NMR指紋圖譜-模式識別研究[J].中國中藥雜志,2013,38(2):217-222.

[20] 姜苗苗,張宇,馮毅凡.銀翹解毒液1H-NMR指紋圖譜研究[J].中成藥, 2012, 34(4):589-592.

(責任編輯：魏 曉)

Application of Fingerprint in the Quality Control of Traditional Chinese Medicine

Liu Yumei

(Department of Pharmacy, Tongren Polytechnic College, Tongren, Guizhou 554300)

Quality control is the key issue to push Traditional Chinese Medicine's (TCM) modernization and internationalization. The TCM fingerprint is one of the strategic subjects for TCM quality control. The article introduced the application in TCM quality control of several kinds of fingerprint.

Fingerprint; TCM; Quality Control

2015-02-09

劉玉梅(1981-)，女，銅仁職業技術學院副教授，研究方向為中藥質量控制。

R28

A

1673-2197(2015)13-0056-02

10.11954/ytctyy.201513022