非小細胞肺癌患者血清熱休克蛋白90α的臨床意義研究

董鵬飛，鄧曉明

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·中醫·中西醫結合研究·

非小細胞肺癌患者血清熱休克蛋白90α的臨床意義研究

董鵬飛，鄧曉明

目的 了解非小細胞肺癌(NSCLC)患者血清熱休克蛋白90α(HSP90α)的臨床意義。方法 選取2013年1月—2014年5月，在鄭州大學第一附屬醫院中西醫結合內科、胸外科及呼吸內科接受住院治療的NSCLC患者80例為肺癌組；另選取同時期在鄭州大學第一附屬醫院進行體檢的健康成年人30例為對照組。比較并分析兩組血清HSP90α水平；比較不同腫瘤分期(TNM分期)患者血清HSP90α水平，探討TNM分期與血清HSP90α水平的相關關系；根據中醫辨證結果對肺癌組進行中醫分型，比較不同中醫分型患者的血清HSP90α水平。結果 對照組與肺癌組血清HSP90α水平比較，差異有統計學意義(t=16.02，P<0.05)。不同TNM分期患者的血清HSP90α水平比較，差異有統計學意義(F=14.98，P=0.00)；Spearman秩相關分析顯示，TNM分期與血清HSP90α水平呈正相關(rs=0.42，P<0.01)。不同中醫分型患者的血清HSP90α水平比較，差異有統計學意義(F=4.22，P<0.01)。結論 NSCLC患者的血清HSP90α水平較健康成年人高，TNM分期較高的患者，其血清HSP90α水平也較高。血清HSP90α水平可以反映NSCLC患者正邪、虛實的轉變，有望成為其中醫辨證論治的客觀依據，可作為NSCLC患者的腫瘤標志物，在預測疾病的發生、發展方面具有較高的臨床意義。

癌，非小細胞肺；HSP90熱休克蛋白質類；腫瘤分期；辨證分型

董鵬飛，鄧曉明.非小細胞肺癌患者血清熱休克蛋白90α的臨床意義研究[J].中國全科醫學，2015，18(19)：2354-2356，2360.[www.chinagp.net]

Dong PF,Deng XM.Clinical significance of serum HSP90 α in patients with non-small-cell lung cancer[J].Chinese General Practice，2015，18(19)：2354-2356，2360.

熱休克蛋白(HSPs)是機體在應激反應中產生的一種蛋白質類物質[1]。熱休克蛋白90α(HSP90α)作為熱休克蛋白家族的一員，已經被證實在非小細胞肺癌(NSCLC)[2]、胃癌[3]、胰腺癌[4]、腦膠質瘤及腦膜瘤[5]等多種腫瘤組織細胞中含量增高。以往對HSP90α的研究多集中在腫瘤組織學方面，而對NSCLC患者血清HSP90α水平臨床意義的研究較少。目前，已經有許多研究表明，腫瘤患者(如肺癌、胃癌)血清HSP90α水平會特異性升高，且與腫瘤的發生、發展及預后有密切關系[6-7]。本研究對80例NSCLC患者和30例健康成年人的血清HSP90α水平進行分析，旨在探討NSCLC患者血清HSP90α水平的臨床意義。

1 對象與方法

1.2 研究方法 檢測肺癌組和對照組的血清HSP90α水平，并進行比較和分析；比較不同腫瘤分期(TNM分期)患者的血清HSP90α水平，探討TNM分期與血清HSP90α水平的相關關系；根據中醫辨證結果對肺癌組進行中醫分型，比較不同中醫分型患者的血清HSP90α水平。

1.2.1 HSP90α檢測方法 肺癌組和對照組均在清晨空腹狀態下抽取靜脈血3 ml；在4 ℃情況下進行離心處理，離心半徑=1 cm，3 000 r/min離心20 min，取上層血清1 ml；編號后，冷凍于-80 ℃冰箱中備用。由課題組采用雙抗夾心酶聯免疫吸附法進行HSP90α檢測，試劑為上海滬宇生物有限公司生產，測定儀為Multishannk 3型全自動酶免疫測定儀，操作過程嚴格按照試劑說明書進行。

1.2.2 NSCLC患者的中醫辨證分型 中醫分型標準參照《中藥新藥臨床研究指導原則》，具體分型標準和結果見表1。

表1 NSCLC患者的中醫辨證分型

2 結果

2.1 肺癌組和對照組血清HSP90α水平比較 對照組的血清HSP90α水平為(61.8±30.8)μg/L，肺癌組的血清HSP90α水平為(385.4±173.5)μg/L。兩組血清HSP90α水平比較，差異有統計學意義(t=16.02，P<0.05)。

2.2 血清HSP90α水平與TNM分期關系 肺癌組中TNM分期為Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期的患者數分別為26、32、22例，其血清HSP90α水平分別為(324.0±180.0)、(394.9±184.2)、(444.3±127.3)μg/L。不同TNM分期患者的血清HSP90α水平比較，差異有統計學意義(F=14.98，P=0.00)。對TNM分期和血清HSP90α水平做Spearman秩相關分析，結果顯示兩者呈正相關(rs=0.42,P<0.01)。

2.3 不同中醫分型患者血清HSP90α水平比較 中醫分型為氣虛痰濕證、氣滯血瘀證、陰虛毒熱證及氣陰兩虛證的患者數分別為17、23、19、21例，其平均血清HSP90α水平分別為(301.4±153.2)、(408.9±150.5)、(479.5±194.4)、(342.6±155.5)μg/L。不同中醫分型患者的血清HSP90α水平比較，差異有統計學意義(F=4.22，P<0.01)。陰虛毒熱證患者與氣虛痰濕證和氣陰兩虛證患者的血清HSP90α水平比較，差異有統計學意義(P<0.05)。氣虛痰濕證患者與氣滯血瘀證患者的血清HSP90α水平比較，差異有統計學意義(P<0.05)。

3 討論

HSP90是腫瘤組織中最為活躍的分子伴侶之一，可以比正常細胞高出2～10倍[8]，主要以HSP90α為主，而HSP90 β保持不變[9-10]。現在認為腫瘤細胞內HSP90α占細胞總蛋白含量的3%～7%[11]。到目前為止，已經證明的HSP90α受體蛋白有100多種，如蛋白激酶B、人類表皮生長因子受體2(Her-2)、低氧誘導因子-1α(HIF-1α)、bcr-abl融合基因、Raf-1蛋白激酶及p53突變體，這些受體蛋白是重要的信號轉導和細胞周期調控遞質，涉及腫瘤細胞的發生和發展[11]。

腫瘤細胞中的HSP90α，不僅存在于細胞內，更重要的是可以被腫瘤細胞主動分泌到細胞外發揮作用[12-13]。主要表現在兩個方面：(1)細胞外的HSP90α同細胞內的HSP90α一樣，發揮分子伴侶作用；(2)細胞外的HSP90α可以促進腫瘤細胞的浸潤和轉移[14-18]。如細胞外的HSP90α可以通過作用于細胞表面的原癌基因Her-2[19]和金屬基質蛋白酶2，促進腫瘤細胞的浸潤和轉移[15-16，20-21]。還有研究發現，細胞外的HSP90α可激活血纖維蛋白溶酶原，后者具有促進腫瘤細胞轉移的作用[22]。不僅如此，肺癌組織細胞中的HSP90α蛋白表達與 HIF-1α蛋白表達呈正相關[2]，二者的高表達可能參與了肺癌血管生成，細胞增殖、轉移、侵襲等活動。HSP90α的這些生物學特點也為腫瘤的治療提供了新的切入點，如17-烯丙胺-17-去甲氧基格爾德霉素等HSP90抑制劑的應運而生[21]。近期有研究表明，他汀類物質(3-羥基-3-戊二輔酶 A 還原酶抑制劑)通過抑制HSP90α來增強貝伐單抗在腸癌中的抗腫瘤作用[23]。

本研究對NSCLC患者和健康成年人的血清HSP90α水平進行了比較和分析，發現NSCLC患者的血清HSP90α水平較健康成年人高。不同TNM分期患者的血清HSP90α水平比較，差異有統計學意義。且TNM分期與血清HSP90α水平呈正相關，分期較高的患者，其血清HSP90α水平也較高。

中醫認為正虛是肺癌發生的病機，痰瘀毒結是其主要病理表現，正虛邪實是其發病的根本原因，也是復發和轉移的關鍵。患者正氣不足，氣血陰陽失調，臟腑經絡功能紊亂，導致邪氣趁虛而入，體內水濕停滯，聚集成痰，或熱毒灼津，煎液成痰；氣血運行不暢，血流淤滯，瘀血內?；蛱禎駜韧?，痰濕血瘀互結于肺而形成肺癌。到腫瘤晚期，因耗傷精氣、邪毒亢進，多表現為全身正氣虛衰、局部邪實，患者虛實并重，腫瘤細胞極速擴散、轉移，負荷較大，HSP90α大量分泌。研究過程中課題組觀察到NSCLC患者在初期正虛和邪實都比較弱，多表現為氣短乏力、咳嗽少痰、自汗盜汗，隨著痰濁、瘀血互結逐漸加重，病情逐漸向邪實方向發展，出現煩躁不安、氣短乏力、咳嗽、痰黏色黃、氣喘息粗及其他虛實夾雜表現。本研究結果顯示，陰虛毒熱證患者的血清HSP90α水平較氣虛痰濕證和氣陰兩虛證患者高，氣虛痰濕證患者的血清HSP90α水平較氣滯血瘀證患者低，提示HSP90α水平變化與中醫證型變化之間可能存在一定規律。

目前，中醫治療肺癌的準則主要有兩種，以辨證論治為主和辨證與辨病相結合。但中醫辨證論治在腫瘤疾病的應用難以全面反映出多數群體病例的共同診治規律。甚至存在無證可辨，有證可辨但辨而有誤等現象?，F代循證醫學的發展為中醫辨證論治提供了很好的發展模式，在搜集四診資料的同時，結合現代實驗室檢查(如腫瘤標志物、免疫學指標等)進行中醫辨證論治，是有益的嘗試和探索[24]。本研究樣本量較小，各證型患者較少，故血清HSP90α水平與中醫證型的關系有待進一步的研究。另外，血清HSP90α與其他腫瘤標志物聯合應用，以提高中醫辨證客觀性和準確性的研究方向也具有較高臨床價值。

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(本文編輯：王鳳微)

Clinical Significance of Serum HSP90 α in Patients With Non-small-cell Lung Cancer

DONGPeng-fei,DENGXiao-ming.

DepartmentofIntegrativeChineseandWesternMedicine,theFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China

Objective To investigate the clinical significance of serum HSP90 α in patients with non-small-cell lung cancer.Methods We enrolled 80 patients with NSCLC who were admitted into TCM and WM internal medicine department,chest surgery department and respiratory department of the First Affiliated Hospital of Zhengzhou University and assigned them into lung cancer group.And another 30 healthy adults were enrolled in the same hospital and time period as the control group.Serum HSP90 α was compared between the two groups and among patients in different TNM stages.The correlativity between TNM staging and serum HSP90 α were investigated.The subjects of lung cancer group were classified according to TCM classification standards,and patients of different TCM types were compared by serum HSP90 α level.Results Control group and lung cancer group were significantly different(t=16.02,P<0.05) in serum HSP90 α.Patients in different TNM stages were significantly different(F=14.98,P=0.00)in serum HSP90 α.The Spearman rank sum test showed that TNM staging and serum HSP90 α level were positively correlated(rs=0.42,P<0.01) with each other.Patients with different TCM types were significantly different(F=4.22,P<0.01) in serum HSP90 α level.Conclusion NSCLC patients are higher than healthy adults in serum HSP90 α level.Higher TNM staging causes higher serum HSP90 α level.Since serum HSP90 α level can be an indicator of the change between vital energy and evil qi and between deficiency and excess,it is expected to be an objective basis of TCM treatment based on syndrome differentiation and be taken as a marker of tumor in NSCLC patients.Serum HSP90 α level has a great clinical importance in the prediction of the occurrence and development of NSCLC.

Carcinoma,non-small-cell lung;HSP90 heat-shock proteins;Neoplasm staging;Syndrome differ classification

450052 河南省鄭州市，鄭州大學第一附屬醫院中西醫結合內科

鄧曉明，450002 河南省鄭州市，鄭州大學第一附屬醫院中西醫結合內科；E-mail：hndengxiaoming@126.com

R 730.26

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2015.19.026

2015-03-02；

2015-05-05)