畜產(chǎn)品安全評估工作中抗生素使用的評估與抽樣介紹

畜產(chǎn)品安全評估工作中抗生素使用的評估與抽樣介紹

劉中成

(哈爾濱市獸藥飼料監(jiān)察所150070)

畜產(chǎn)品安全評估可分為違禁藥物評估、抗生素殘留評估、甾體化合物殘留評估等，其中抗生素殘留評估畜產(chǎn)品安全評估的關(guān)鍵?？股卦谛竽翗I(yè)的使用常常披著合法的外衣，因?yàn)轲B(yǎng)殖業(yè)的防病、治病以及提高產(chǎn)量離不開抗生素，所以抗生素的使用常常被人們接受，其危害也常常被忽略，或認(rèn)為是小概率的問題，或被歸結(jié)其他原因，例如食物的腸道過敏反應(yīng)，常常被歸結(jié)為食物變質(zhì)或食物過敏，其實(shí)有很多是抗生素的腸道過敏反應(yīng)。

1　全球各國畜牧業(yè)使用抗生素概況

1.1　我國是濫用抗生素極為嚴(yán)重的國家

2014年4月30日，世界衛(wèi)生組織發(fā)布的《抗菌素耐藥：全球監(jiān)測報(bào)告》指出，抗生素耐藥的嚴(yán)重威脅不再是未來的一種預(yù)測。中國是濫用抗生素極為嚴(yán)重的國家，不僅濫用于人體，還濫用于畜牧養(yǎng)殖業(yè)。一個(gè)普遍引用的數(shù)據(jù)是，中國每年生產(chǎn)抗生素原料大約21萬t，其中9.7萬t用于畜牧養(yǎng)殖業(yè)，占年總產(chǎn)量的46.1%。不久前，一篇由華東理工大學(xué)、同濟(jì)大學(xué)和清華大學(xué)的研究機(jī)構(gòu)共同完成、發(fā)表在國內(nèi)學(xué)術(shù)期刊《科學(xué)通報(bào)》的論文稱，我國地表水中含有68種抗生素，一些抗生素在珠江、黃浦江等地的檢出頻率高達(dá)100%，有些抗生素檢出的濃度高達(dá)每升幾百鈉克，工業(yè)發(fā)達(dá)的國家則小于20ng。造成這種現(xiàn)象主要是，人們?yōu)樽非箴B(yǎng)殖速度，濫用抗生素，結(jié)果就影響到水體。

1.2　歐洲國家不斷有抗生素種類被禁用

歐美國家養(yǎng)殖業(yè)是從上世紀(jì)40年代開始,嘗試將抗生素加入飼料中喂豬，結(jié)果發(fā)現(xiàn)對豬的生長速度和抗病力有較好提升。于是，從上世紀(jì)50年代開始，抗生素用于養(yǎng)殖業(yè)逐漸合法化，此后，為世界各國所仿效。 但是，隨著抗生素大量使用，帶來了越來越明顯的副作用，產(chǎn)生了耐藥性、藥物殘留過高、部分消費(fèi)者出現(xiàn)過敏中毒反應(yīng)等一系列問題。從上世紀(jì)80年代開始，歐美國家轉(zhuǎn)而對飼料添加抗生素的使用作了種種規(guī)定。最先禁用飼用抗生素的國家是瑞典。1986年，瑞典宣布全面禁止抗生素用于飼料添加劑，以緩解消費(fèi)者對肉品藥物殘留和耐藥性產(chǎn)生的恐懼心理。英國因發(fā)現(xiàn)阿伏霉素在飼養(yǎng)動(dòng)物體內(nèi)出現(xiàn)耐藥性，于1993年禁止使用阿伏霉素作為抗生素飼料添加劑。丹麥緊跟在英國之后，于1995年禁止在飼料中使用阿伏霉素。到1997年，瑞典加入歐盟，歐盟委員會(huì)宣布在所有歐盟成員國中禁止使用阿伏霉素做飼料添加劑。歐洲更多的禁用飼用抗生素措施接踵而至。1998年，丹麥禁止使用抗生素飼料添加劑維吉尼亞霉素。1998年，荷蘭停止在動(dòng)物飼料中添加奧拉喹多。1999年，歐盟委員會(huì)對泰樂菌素、螺旋霉素、桿菌肽和維吉尼亞霉素這幾種抗生素飼料添加劑下了禁令。1999年，丹麥養(yǎng)豬業(yè)自愿表態(tài)，停止給體重35kg以下的豬使用抗生素飼料添加劑。從2000年起，丹麥規(guī)定，用于治療飼養(yǎng)動(dòng)物疾病的抗生素一律要憑獸醫(yī)的處方購買。從2006年起，歐盟成員國全面停止使用所有抗生素生長促進(jìn)劑，包括離子載體類抗生素。2011年，歐盟委員會(huì)宣布了“反病菌抗藥性五年行動(dòng)計(jì)劃”，目的是確保人與牲畜正確使用抗生素，完善對獸用抗生素的監(jiān)控。另外，歐洲藥品管理局于2013年提出建議，對使用了50年的一種老抗生素粘菌素采用禁令，禁止將粘菌素作為牲畜預(yù)防性用藥。

1.3　美國抗生素逐漸退出畜牧養(yǎng)殖業(yè)

早在1977年，美國食品與藥物管理局就發(fā)現(xiàn)，飼養(yǎng)動(dòng)物長期使用低劑量青霉素和四環(huán)素會(huì)促進(jìn)抗藥性產(chǎn)生，但當(dāng)時(shí)并沒有采取禁令。到1996年，美國開始采取行動(dòng)，由食品與藥物管理局等部門協(xié)作成立了美國國家抗生素抗藥性檢控體系，提出一旦發(fā)現(xiàn)飼養(yǎng)動(dòng)物耐藥性產(chǎn)生，就啟動(dòng)相應(yīng)法律，包括收回某種抗生素藥物使用許可證。然而，公眾對禁用飼養(yǎng)動(dòng)物抗生素有更迫切的要求。2012年3月23日，美國紐約曼哈頓聯(lián)邦法院西奧多·卡茨法官做出判決，下令美國食品與藥物管理局采取措施，禁止在動(dòng)物飼料中使用常用抗生素。2012年1月4日，美國食品與藥物管理局重新推出這項(xiàng)禁令，被禁用該類抗生素的動(dòng)物包括牛、豬、雞以及火雞，執(zhí)行時(shí)間自4月5日起開始。然而，調(diào)查表明，美國境內(nèi)出售的抗生素80%用于禽畜。美國疾病控制和預(yù)防中心曾發(fā)布報(bào)告稱，對抗生素具有抗藥性的細(xì)菌每年導(dǎo)致2.3萬名美國人死亡。迫于公眾壓力，2013年，美國食品與藥物管理局公布了一份行業(yè)指導(dǎo)性文件，計(jì)劃從2014年起，用3年時(shí)間禁止在牲畜飼料中使用預(yù)防性抗生素，最大限度地減少食用牲畜帶給消費(fèi)者抗生素耐藥性問題。

2　畜產(chǎn)品抗生素殘留的評估方法

2.1　掌握評估區(qū)域抗生素的使用種類

確定評估區(qū)域抗生素的使用種類是畜產(chǎn)品安全評估的基礎(chǔ)，例如黑龍江地區(qū)四季分明，夏季重點(diǎn)評估腸道抗菌藥物，冬季重點(diǎn)評估呼吸道抗菌藥物，春秋時(shí)節(jié)重點(diǎn)評估抗真菌及腸道原蟲藥物，蚊蟲孽生的季節(jié)重點(diǎn)評估抗血液原蟲藥物的殘留。確定評估區(qū)域抗生素的使用種類可以最大限度地發(fā)揮評估機(jī)構(gòu)的作用，節(jié)約檢測資源。

2.2　確立評估抽樣方法

2.2.1簡單隨機(jī)抽樣

簡單隨機(jī)抽樣是最基本的抽樣方法。分為重復(fù)抽樣和不重復(fù)抽樣。在重復(fù)抽樣中，每次抽中的單位仍放回總體，樣本中的單位可能不止一次被抽中。不重復(fù)抽樣中，抽中的單位不再放回總體，樣本中的單位只能抽中一次。畜產(chǎn)品安全評估抽樣采用不重復(fù)抽樣。簡單隨機(jī)抽樣的具體作法有：①抽簽法。將總體的全部單位逐一作簽，攪拌均勻后進(jìn)行抽取。②隨機(jī)數(shù)字表法。將總體所有單位編號，然后從隨機(jī)數(shù)字表中一個(gè)隨機(jī)起點(diǎn)(任一排或一列)，開始從左向右或從右向左、向上或向下抽取，直到達(dá)到所需的樣本容量為止。簡單隨機(jī)抽樣必須有一個(gè)完整的抽樣框，即總體各單位的清單?？傮w太大時(shí)，制作這樣的抽樣框工作量巨大，加之有許多情況，使總體名單根本無法得到。故在畜產(chǎn)品安全評估抽樣是由于樣品數(shù)量過大采取隨機(jī)隨時(shí)抽樣的方式常常是不可能的事情。

2.2.2等距抽樣

等距抽樣方式相對于簡單隨機(jī)抽樣方式最主要的優(yōu)勢就是經(jīng)濟(jì)性。等距抽樣方式比簡單隨機(jī)抽樣更為簡單，花的時(shí)間更少，并且花費(fèi)也少。使用等距抽樣方式最大的缺陷在于總體單位的排列上。一些總體單位數(shù)可能包含隱蔽的形態(tài)或者是“不合格樣本”，調(diào)查者可能疏忽，把它們抽選為樣本。由此可見，只要抽樣者對總體結(jié)構(gòu)有一定了解時(shí)，充分利用已有信息對總體單位進(jìn)行排隊(duì)后再抽樣，則可提高抽樣效率。等距抽樣要防止周期性偏差，因?yàn)樗鼤?huì)降低樣本的代表性。畜產(chǎn)品安全評估抽樣要根據(jù)評估種類確立抽樣范圍，對樣品范圍進(jìn)行整體規(guī)劃，進(jìn)行有效排隊(duì)，確立風(fēng)險(xiǎn)較大的區(qū)域，提高抽樣效率。

2.2.3雙重抽樣

雙重抽樣的主要作用是提高抽樣效率、節(jié)約調(diào)查經(jīng)費(fèi)。首先抽取一個(gè)初步樣本，并搜取一些簡單項(xiàng)目以獲得有關(guān)總體的信息；然后，在此基礎(chǔ)上再進(jìn)行深入抽樣。在實(shí)際運(yùn)用中，雙重抽樣可以推廣為多重抽樣。其步驟是：做一次隨機(jī)抽樣，調(diào)查y 和x兩種性狀，從中求出y 依x 的回歸方程。這個(gè)樣本容量n 不一定很大，但希望x 和y 有較大的幅度。如：若所要調(diào)查的性狀y是不易觀察測定，甚至對觀察材料要破壞后方能測定的，而試驗(yàn)又不容許將材料破壞，這時(shí)可以利用和所要調(diào)查的性狀有密切相關(guān)關(guān)系的另一便于測定的性狀x進(jìn)行間接的抽樣調(diào)查，按確定的相關(guān)關(guān)系從x的調(diào)查結(jié)果推算y 的結(jié)果。用雙重抽樣法，必須注意 y 和 x 兩性狀間不但要有顯著相關(guān)，而且須有高程度顯著相關(guān)，才能獲得比較準(zhǔn)確的結(jié)果，所以在建立回歸方程時(shí)要檢驗(yàn)其相關(guān)系數(shù)的大小及顯著性。例如，對于一個(gè)畜產(chǎn)品評估樣品中評估分析磺胺類藥物的同時(shí)，可以分析氟苯尼考的危險(xiǎn)趨向性，并根據(jù)分析評估兩種藥物同時(shí)使用的幾率，以期評估分析氟苯尼考使用時(shí)導(dǎo)出磺胺類藥物的使用概率。

2.2.4整群抽樣

又稱聚類抽樣。先將總體按照某種標(biāo)準(zhǔn)分群，每個(gè)群為一個(gè)抽樣單位，用隨機(jī)的方法從中抽取若干群，抽中的樣本群中所有單位都要進(jìn)行調(diào)查。與分層抽樣相反,整群抽樣的分類原則是使群間異質(zhì)性小,群內(nèi)異質(zhì)性大。分層抽樣時(shí)各群(層)都有樣本，整群抽樣時(shí)只有部分群有樣本。整群抽樣只需列出入樣群的單位，因此可節(jié)約大量財(cái)力、人力。整群抽樣的代表性低于簡單隨機(jī)抽樣。聚類隨機(jī)抽樣的優(yōu)點(diǎn)是，它適用于總體單位數(shù)量較多、內(nèi)部差異較大的調(diào)查對象。與簡單隨機(jī)抽樣和等距隨機(jī)抽樣相比較，在樣本數(shù)量相同時(shí)，它的抽樣誤差較??；在抽樣誤差的要求相同時(shí)，它所需的樣本數(shù)量較少。類型隨機(jī)抽樣的缺點(diǎn)是，必須對總體各單位的情況有較多的了解，否則無法作出科學(xué)的分類。而這一點(diǎn)在實(shí)際調(diào)查之前又往往難以做到。例如評估某種藥物殘留在畜產(chǎn)品中殘留，可以按家畜家禽種類進(jìn)行整體抽樣，理清不是使用對象的家畜家禽，針對使用對象擴(kuò)大抽樣程度。

2.2.5多級抽樣

又稱多階段抽樣。前 4種抽樣方法均為一次性直接從總體中抽出樣本，稱為單階段抽樣。多階段抽樣則是將抽樣過程分為幾個(gè)階段，結(jié)合使用上述方法中的兩種或數(shù)種。當(dāng)研究總體廣泛且分散時(shí)，多采用多階段抽樣，以降低調(diào)查費(fèi)用。但由于每級抽樣都會(huì)產(chǎn)生誤差，經(jīng)過多級抽樣產(chǎn)生的樣本，誤差也相應(yīng)增大。

2.2.6序貫抽樣

序貫抽樣方案是指在抽樣時(shí)，不事先規(guī)定總的抽樣個(gè)數(shù)(觀測或?qū)嶒?yàn)次數(shù)),而是先抽少量樣本，根據(jù)其結(jié)果，再?zèng)Q定停止抽樣或繼續(xù)抽樣、抽多少，這樣下去，直至決定停止抽樣為止。反之，事先確定抽樣個(gè)數(shù)的那種抽樣方案，稱為固定抽樣方案。這是畜產(chǎn)品安全評估的常用方法，因?yàn)槌闃颖旧沓３Ｊ侨蝿?wù)性的，并且要有足夠的樣品數(shù)量，當(dāng)?shù)竭_(dá)預(yù)期目的時(shí)才能停下。

可見，對畜產(chǎn)品安全評估關(guān)鍵點(diǎn)有效掌握可很大程度節(jié)約檢測資源，最快、最準(zhǔn)確提供評估結(jié)果。