高脂血癥伴牙周炎患者牙周臨床參數(shù)、血清CRP、IL-6水平的檢測分析

張　雪, 賈興亞, 張忠提, 劉小舟, 朱　侖, 張冬梅

(中國醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院, 1. 干診科; 2. 牙周科, 遼寧 沈陽, 110002)

高脂血癥伴牙周炎患者牙周臨床參數(shù)、血清CRP、IL-6水平的檢測分析

張雪, 賈興亞, 張忠提, 劉小舟, 朱侖, 張冬梅

(中國醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院, 1. 干診科; 2. 牙周科, 遼寧 沈陽, 110002)

摘要:目的探討高脂血癥伴牙周炎患者牙周臨床參數(shù)、血清中炎癥因子白介素-6(IL-6)和C反應(yīng)蛋白(CRP)水平變化。方法高脂血癥合并牙周炎患者32例為(H+P)組；牙周炎患者38例為P組；高脂血癥患者23例為H組；牙周健康且無全身系統(tǒng)性疾病的健康志愿者25例為N組。記錄簡化牙石指數(shù)、探診出血陽性率、探診深度、附著喪失。采用ELISA法檢測血清炎癥因子IL-6和CRP水平。結(jié)果(H+P)組牙周組織檢測指標(biāo)顯著高于P組、H組、N組(P<0.05); (H+P)組血清炎癥因子IL-6和CRP顯著高于N組、P組、H組(P<0.05)。結(jié)論較高的血脂水平與牙周炎的病變過程存在一定關(guān)聯(lián)。

關(guān)鍵詞:牙周炎; 高脂血癥; 白介素-6; C反應(yīng)蛋白

近年來高脂血癥和心血管疾病的發(fā)病率呈上升趨勢，高脂血癥可刺激促炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)，造成氧化應(yīng)激,并促進(jìn)中性粒細(xì)胞的聚集而加劇炎癥過程[1]。牙周炎是指發(fā)生在牙周支持組織的慢性炎癥性破壞性疾病，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，涉及細(xì)菌及其毒性產(chǎn)物引發(fā)的炎癥反應(yīng)及過度的宿主反應(yīng)造成的組織破壞，是成人失牙的主要原因。有研究[2]表明，血脂水平與牙周炎病變程度相關(guān)，牙周炎患者血清中的總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白水平較健康人高。高脂血癥與牙周炎二者之間關(guān)于炎癥的發(fā)生與促進(jìn)協(xié)同加劇的作用機(jī)制引起關(guān)注。本研究通過檢測、比較4組牙周組織及炎癥因子白介素-6(IL-6)和C反應(yīng)蛋白(CRP)的水平，為進(jìn)一步研究牙周疾病和高脂血癥之間雙向聯(lián)系奠定基礎(chǔ)。

1材料與方法

1.1　一般資料

選擇2012年4月—2014年5月就診于中國醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院牙周病患者70例，其中高脂血癥+牙周炎患者[(H+P)組]32例，男18例，女14例，年齡45～69歲；牙周炎患者(P組)38例，男21例，女17例，年齡28～69歲；高脂血癥患者(H組)23例，男14例，女9例，年齡36～69歲；另于體檢人群中選取牙周健康且無全身系統(tǒng)性疾病的健康志愿者(N組)25例，男12例，女13例，年齡28～55歲。參照《中國成人血脂異常防治指南》納入研究的高脂血癥患者符合以下條件：血清總膽固醇>5.72 mmol/L, 或血清甘油三酯含量>1.70 mmol/L, 或血清高密度脂蛋白含量<0.9 mmol/L, 或低密度脂蛋白含量>3.6 mmol/L, 上述4項(xiàng)符合其中1項(xiàng)即可診斷為高血脂；納入研究的慢性牙周炎患者參照1999年牙周病分類國際研討會(huì)制定的標(biāo)準(zhǔn)診斷為慢性牙周炎。所有受試者均填寫知情同意書。所有受試者排除糖尿病、腫瘤、其他部位嚴(yán)重感染、腎臟疾病、進(jìn)行性肝臟疾病、傳染性疾病，3個(gè)月內(nèi)進(jìn)行牙周治療、使用抗生素及抗凝藥物者。

1.2　牙周臨床指標(biāo)檢查

牙周臨床指標(biāo)檢查包括如下幾點(diǎn)：根據(jù)Greene和Vermillion提出的4級(jí)記分標(biāo)準(zhǔn)，只檢查6個(gè)牙(16、11、26、31的唇頰面和36、46的舌面)檢查并記錄簡化牙石指數(shù)(CI-S):0=齦上、齦下無牙石; 1=齦上牙石覆蓋牙面積占牙面1/3以下; 2=齦上牙石覆蓋牙面積占牙面1/3～2/3; 3=齦上牙石覆蓋牙面積占牙面2/3以上；探診出血(BOP); 牙周探診深度(PD); 附著喪失(AL)，所有檢查由同一名醫(yī)生完成。

1.3　標(biāo)本采集

所有受試者采集清晨空腹靜脈血10 mL, 3 800 r/min離心10 min分離血清，收集血清于無菌試管中，密封，-70 ℃冰箱保存待測。

1.4　血脂測定

用全自動(dòng)生化儀以酶法試劑盒測定總膽固醇(TC), 甘油三酯(TG), 直接法測定高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C),低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)。

1.5　血清炎癥因子IL-6和CRP檢測

室溫復(fù)融血清樣本，用IL-6酶聯(lián)免疫檢測試劑盒，按說明書實(shí)際操作步驟操作，酶聯(lián)反應(yīng)終止后，在30 min內(nèi)使用酶標(biāo)儀在450 nm下讀取OD值，以標(biāo)準(zhǔn)品在半對(duì)數(shù)表上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品值在該曲線圖上查出相應(yīng)的血清IL-6含量。CRP檢測用ELISA法，原理與步驟同上。

1.6　統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，測量值以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，建立數(shù)據(jù)庫，各組牙石指數(shù)比較采用秩和檢驗(yàn)；PD,AL的比較用t檢驗(yàn)；BOP的組間比較采用卡方檢驗(yàn)；4組間TC、TG、HDL-C、LDL-C、IL-6、CRP水平的比較采用單因素方差分析和最小顯著法多重比較。檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。

2結(jié)果

2.1　簡化牙石指數(shù)比較

(H+P)組、P組簡化牙石指數(shù)顯著高于N組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1　各組簡化牙石指數(shù)(CI-S)比較

與N組比較，*P<0.05。

2.2　其他牙周參數(shù)比較

BOP陽性率方面，(H+P)組、P組、H組均高于N組(P<0.05); PD、AL比較，(H+P)組的PD、AL均顯著高于其他3組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

與其他3組比較, *P<0.05，#P<0.05, △P<0.05，▲P<0.05。

2.3　血清炎癥因子含量比較

4組IL-6和CRP含量比較，H組、P組、(H+P)組血清炎癥因子含量顯著高于N組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); (H+P)組血清炎癥因子含量顯著高于H組、P組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); H組與P組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

表3　各組IL-6和CRP含量的比較

與N組比較，*P<0.05; 與(H+P)組比較，#P<0.05。

2.4　血清炎癥因子IL-6、CRP與血脂水平的Pearson相關(guān)性分析結(jié)果

血清炎癥因子IL-6與血脂TG、TC、LDL水平呈正相關(guān)(γ=0.849、0.732、0.693,P<0.05), 與血脂HDL水平呈極弱相關(guān)或無相關(guān)。血清炎癥因子CRP與血脂TG、TC、LDL水平呈正相關(guān)(γ=0.736、0.756、0.731,P<0.05), 與血脂HDL水平呈極弱相關(guān)或無相關(guān)。

3討論

本實(shí)驗(yàn)中牙周檢測指標(biāo)在N組、H組、P組、(H+P)組間依次呈升高趨勢。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，牙周炎合并高脂血癥患者牙周組織的病變程度嚴(yán)重于牙周炎組、高脂血癥組。有研究[3]表明，血脂水平與牙周病的患病率之間有關(guān)聯(lián)。Culter等[4]將一組成年牙周炎患者和與之年齡相匹配的牙周健康的對(duì)照組進(jìn)行比較，認(rèn)為牙周炎與高膽固醇(TC)、高甘油三酯(TG)相關(guān)聯(lián)。國內(nèi)王巖等[5]的橫斷面調(diào)查研究認(rèn)為，總膽固醇、甘油三酯均與牙周炎的患病率相關(guān)。另有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[6]表明，較高的血脂水平影響骨密度，加重了骨質(zhì)疏松；在高脂血癥與牙周炎關(guān)系的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，對(duì)牙槽骨的密度進(jìn)行Micro-CT檢測，附著喪失(AL)在高脂血癥合并牙周炎組最高，提示較高的血脂水平與牙槽骨的喪失存在關(guān)聯(lián)，進(jìn)一步證實(shí)了高血脂加重牙槽骨喪失[7-8]。

高脂血癥伴牙周炎患者血清中IL-6、CRP的含量顯著高于H組、P組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。白介素-6(IL-6)具有免疫調(diào)節(jié)和免疫刺激作用，參與炎癥、免疫反應(yīng)以及脂類物質(zhì)代謝，在高脂血癥存在的條件下，血清中IL-6含量增加[9-10]。本研究進(jìn)一步證實(shí)，在牙周炎與高脂血癥并存的情況下IL-6顯著增高，(H+P)組IL-6含量明顯高于P組、H組，較高的血脂水平為炎癥的存在提供了條件。本實(shí)驗(yàn)中H組IL-6水平與N組相比有顯著差異，提示高脂血癥患者已處于炎癥狀態(tài)。IL-6與牙周炎癥的相互關(guān)系影響: ① IL-6可以促進(jìn)牙槽骨的吸收:IL-6通過誘導(dǎo)成骨細(xì)胞產(chǎn)生破骨細(xì)胞分化因子可以誘導(dǎo)破骨細(xì)胞前體轉(zhuǎn)化為成熟的破骨細(xì)胞[11]; ② 由IL-6誘導(dǎo)產(chǎn)生的基質(zhì)金屬蛋白酶可以促進(jìn)骨基質(zhì)的降解，并且IL-6具有抑制成骨作用[12]; 能輕度抑制成骨細(xì)胞堿性磷酸酶的活性和膠原的合成，從而抑制牙槽骨吸收后新骨的形成[13]; ③ IL-6可以抑制牙周膜的修復(fù):成纖維細(xì)胞雖是IL-6的主要來源細(xì)胞，但亦能抑制成纖維細(xì)胞、膠原細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞等牙周膜細(xì)胞的生長，并降低成纖維細(xì)胞的附著，從而導(dǎo)致牙周膜修復(fù)能力的減弱、牙周附著的喪失，形成深牙周袋[14]; ④ IL-6參與牙周炎的炎癥反應(yīng)：調(diào)節(jié)急性期蛋白的產(chǎn)生 ，促進(jìn)炎癥細(xì)胞的聚集、活化并促進(jìn)炎癥介質(zhì)的釋放[15]。高血脂可參與影響中性粒細(xì)胞的功能，刺激促炎細(xì)胞因子的表達(dá)，造成氧化應(yīng)激，并促進(jìn)中性粒細(xì)胞的聚集而加劇炎癥過程，從而對(duì)牙周疾病的病變過程造成影響[16]。

C反應(yīng)蛋白(CRP)是反映機(jī)體炎癥狀態(tài)的一個(gè)敏感而可靠的指標(biāo), CRP是一種由肝臟合成的急性時(shí)相蛋白，系炎性細(xì)胞激活后產(chǎn)生IL-6等細(xì)胞因子刺激肝臟合成，能激活補(bǔ)體系統(tǒng)、參與炎癥反應(yīng)，是經(jīng)典的炎癥標(biāo)志物[17]; CRP可激活血管內(nèi)皮細(xì)胞表面黏附因子的表達(dá)，促進(jìn)單核細(xì)胞趨化蛋白分泌，導(dǎo)致炎癥細(xì)胞聚集[18]; 也有研究[19]顯示，牙周感染可能通過其產(chǎn)生的炎癥介質(zhì)刺激肝臟合成并分泌CRP, 使循環(huán)中的CRP水平升高并引發(fā)全身慢性炎癥反應(yīng); CRP影響血脂水平凝集血細(xì)胞激活血小板，從而促進(jìn)血栓形成并影響血脂水平的變化[20]。本研究中CRP在P組、H組均較N組升高，提示H組人群已處于炎癥狀態(tài)。有研究[21]證實(shí)在正常人群和高脂血癥人群中，隨著血脂水平的升高，炎癥因子CRP、IL-6也同時(shí)升高，提示高脂血癥人群已處于炎癥狀態(tài)。在(H+P)組CRP含量顯著高于僅存一種疾病的P組、H組，提示高脂血癥和牙周炎兩種疾病同時(shí)作用下CRP的含量增高。通過對(duì)血清炎癥因子IL-6、CRP與血脂水平的Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，TG、TC、LDL水平與炎癥因子IL-6、CRP呈強(qiáng)直線相關(guān)性。

綜上所述，較高的血脂水平與牙周炎的病變過程存在一定關(guān)聯(lián)。本實(shí)驗(yàn)是臨床研究，病例選擇受患者群影響，H組樣本選擇尚有不足之處，H組的CI-S指數(shù)為1的占15例，H組的牙周組織只是相對(duì)于(H+P)組較健康，在納入樣本檢查時(shí)已有附著喪失約1 mm，并且本研究沒有對(duì)牙周炎進(jìn)行分型和分度，只是對(duì)高脂血癥與牙周炎間聯(lián)系的初步臨床探索。明確牙周炎和血脂水平之間相互作用的機(jī)制，將為較高血脂水平牙周炎患者的防治及治療工作實(shí)行更加合理的治療，二者之間的相互作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

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Detections of periodontal indexes, serum C-reactive

protein and interleukin-6 levels in patients with

hyperlipidemia and periodontitis

ZHANG Xue, JIA Xingya, ZHANG Zhongti, LIU Xiaozhou, ZHU Lun, ZHANG Dongmei

(1.DepartmentofVIP; 2.DepartmentofPeriodontology,SchoolofStomatologyofChina

MedicalUniversity,Shenyang,Liaoning, 110002)

ABSTRACT:ObjectiveTo explore the change of serum C-reactive protein( CRP) and interleukin-6 ( IL- 6)levels and periodontal indexes in patients with hyperlipidemia and periodontitis. MethodsA total of 32 patients with hyperlipidemia and periodontitis were selected as group (H+P), 38 patients with periodontitis were selected as group P, 23 patients with hyperlipidemia were selected as group H and 25 healthy volunteers were selected as group N. The calculus index-simplified, bleeding on probing, probing depth and attachment loss were recorded. Enzyme-Linked Immuno-sorbent Assay (ELISA) was used to measure the levels of IL-6 and CRP. ResultsThe values of periodontal indexes in the group (H+P) were significantly higher than those in the group P, the group H and the group N (P<0.05). Levels of IL-6 and CRP in the group (H+P) were significantly higher than those in the group P, the group H and the group N (P<0.05).ConclusionThere is a certain correlation between hyperlipidemia and pathological process of periodontitis.

KEYWORDS:periodontitis; hyperlipidemia; interleukin-6; C-reactive protein

通訊作者:賈興亞, E-mail: jia.xing.ya@tom.com

基金項(xiàng)目:遼寧省醫(yī)學(xué)高峰建設(shè)工程重點(diǎn)科研項(xiàng)目(200909)

收稿日期:2014-12-26

中圖分類號(hào):R 781.4

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

文章編號(hào):1672-2353(2015)11-078-04

DOI:10.7619/jcmp.201511023