HC2-HPV-DNA檢測聯(lián)合液基細(xì)胞學(xué)在宮頸癌及癌前病變篩查診斷中的應(yīng)用

HC2-HPV-DNA檢測聯(lián)合液基細(xì)胞學(xué)在宮頸癌及癌前病變篩查診斷中的應(yīng)用

徐蘭云

(江蘇省泰興市婦幼保健所, 江蘇 泰興, 225400)

關(guān)鍵詞:人乳頭瘤病毒; 液基細(xì)胞學(xué); 宮頸癌前病變

宮頸癌是女性生殖道常見的惡性腫瘤之一,嚴(yán)重威脅著女性的生命健康。宮頸癌病理進(jìn)展漫長，一般需要經(jīng)過10～15年的時間，如能早期確診、及時治療，則可以完全治愈[1]。近年來，其發(fā)病率呈上升趨勢，且發(fā)病年齡也趨于年輕化[2]。因此早期發(fā)現(xiàn)，早期診斷及治療癌前病變有著重要的意義。作者采用宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查、HC2-HPV-DNA檢測配合陰道鏡檢查，對早期宮頸病變進(jìn)行篩查，取得了較滿意的結(jié)果，報告如下。

1資料與方法

1.1　一般資料

選取2011年7月—2014年6月在本所婦科門診就診的TCT檢測提示陽性婦女246例，年齡 28～65歲，知情同意，進(jìn)一步行HC2-HPV-DNA檢測、陰道鏡檢查、并在陰道鏡下進(jìn)行宮頸活組織檢查，以病理為金標(biāo)準(zhǔn)，對子宮頸癌及癌前病變?nèi)N篩查方法進(jìn)行分析及評價。

1.2　方法

1.2.1液基細(xì)胞學(xué)標(biāo)本采集及處理:用無菌專用細(xì)胞刷插入宮頸管內(nèi)旋轉(zhuǎn)3～5周收集宮頸外口和宮頸管的脫落細(xì)胞標(biāo)本，然后將宮頸刷放入專用的細(xì)胞標(biāo)本保存液中進(jìn)行液基細(xì)胞學(xué)檢測，采用2001年國際癌癥協(xié)會推薦的TBS分級診斷標(biāo)準(zhǔn)閱片。病例分為以下幾類: ① 無上皮內(nèi)病變或惡性病變(NILM); ② 鱗狀上皮異常 ASCUS及不除外高度鱗狀上皮內(nèi)病變的不典型鱗狀上皮細(xì)胞(ASC-H)，宮頸上皮內(nèi)瘤病變Ⅰ級(CINⅠ)，宮頸上皮內(nèi)瘤病變Ⅱ級(CINⅡ), 宮頸上皮內(nèi)瘤病變Ⅲ級(CINⅢ)，宮頸癌; ③ 腺上皮異常：非典型腺細(xì)胞(AGC); 原位腺癌(AIS)和腺癌(AC)。細(xì)胞學(xué)異常(陽性者)包括ASCUS及以上病變。

1.2.2高危型人乳頭瘤病毒(HC2)進(jìn)行第二代雜交捕獲實(shí)驗(yàn)檢測：用專用小刷置于宮頸口與黏膜交界處逆時針輕輕旋轉(zhuǎn)3圈，停留10 s; 將收集分泌物及小刷保存于專用試管中。采用HC2檢測系統(tǒng)和HR—HPV-DNA試劑盒，同時檢測(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68)共13種HPV亞型。結(jié)果判定：熒光讀數(shù)與陰性測定值比值(RLU/CO)≥1.0時為陽性。

1.2.3陰道鏡下宮頸活組織病理學(xué)檢查:對 TCT≥ASCUS提示陽性的246例患者，進(jìn)一步行HC2-HPV-DNA檢測和陰道鏡檢查，對陰道鏡下可疑部位行活檢，對未見明顯異常的病例常規(guī)行3、6、9、12多點(diǎn)活檢及宮頸管搔刮術(shù)，送組織病理學(xué)檢查。診斷標(biāo)準(zhǔn)：炎性改變、宮頸上皮內(nèi)瘤病變Ⅰ級(CINⅠ)、宮頸上皮內(nèi)瘤病變Ⅱ級(CINⅡ)、宮頸上皮內(nèi)瘤病變Ⅲ級(CINⅢ)、宮頸癌。組織病理學(xué)診斷陽性為CINⅠ級及以上病變, CINⅡ、Ⅲ級與宮頸癌合計為宮頸高度病變。以組織病理學(xué)檢查結(jié)果作為確診標(biāo)準(zhǔn)。

2結(jié)果

2.1　TCT診斷結(jié)果與組織病理學(xué)結(jié)果

組織病理學(xué)檢查結(jié)果：炎性改變119例(48.4%), CINⅠ級 77例(31.3%), 宮頸高度病變 50例(20.3%)。見表1。TCT檢查陽性者與宮頸活檢病理符合率為51.6%(127/246), TCT診斷陽性與組織病理學(xué)確診為宮頸高度病變一致率20.3%(50/246), TCT診斷宮頸高度病變與組織病理學(xué)一致率為76.9%(20/26)。LSIL組與HSIL組宮頸高度病變檢出率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=11.29,P<0.01)。

2.2　HPV檢測結(jié)果與組織病理學(xué)結(jié)果

宮頸癌中HC2檢測陽性率為100%。HC2-HPV-DNA與TCT檢查均為陽性組與組織病理學(xué)確診為宮頸高度病變一致率為19.5%(48/197)。HC2陽性組宮頸高度病變檢出率高于陰性組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=20.05,P<0.01)。見表2。

表1　TCT 診斷結(jié)果與組織病理學(xué)結(jié)果比較[n(%)]

表2　HPV檢測與組織病理學(xué)結(jié)果比較[n(%)]

將HPV負(fù)荷載量分成三階段1～10, 10～100和100以上，發(fā)現(xiàn)病毒載量越高，宮頸病變級別越高。見表3。說明HPV DNA負(fù)荷量與宮頸疾病程度的增加有相關(guān)性，可作為判斷宮頸疾病嚴(yán)重程度以及預(yù)測宮頸病變進(jìn)展的有效指標(biāo)。

表3　HPV病毒載量與組織病理學(xué)結(jié)果比較

2.3　246例陰道鏡檢查者三種檢測方法結(jié)果比較

HC2-HPV-DNA與TCT檢查均為陽性組與病理檢查符合率為62.4%(123/197)。HPV陽性率: LSIL組與ASCUS組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=7.82,P<0.05); LSIL組與HSIL組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=18.91,P<0.01)。見表4。

表4　246例陰道鏡檢查者三種檢測方法結(jié)果比較

2.4　TCT檢查陽性組和HC2+TCT同時陽性組與病理檢查的比較

TCT檢查陽性者246例，其中陰道鏡下宮頸活檢病理檢查陽性者127例，陽性符合率為51.6%; HC2-HPV-DNA與TCT檢查同時陽性者197例，病理檢查陽性者123例，陽性符合率為62.4%。該2組與病理檢查結(jié)果符合率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05), 見表2。

3討論

宮頸癌是威脅婦女健康和生命的主要疾病之一。該病是可以預(yù)防、治愈的疾病。宮頸液基細(xì)胞學(xué)(TCT)是目前較為先進(jìn)及成熟的宮頸癌篩查技術(shù)，作為宮頸疾病階梯診斷的第一步，可以在早期發(fā)現(xiàn)宮頸病變，但對宮頸低度病變有一定的假陰性率和假陽性率，隨著細(xì)胞學(xué)級別增高，二者的符合率隨之增高。本文以 TCT檢測陽性患者246例作為觀察對象，對其進(jìn)行陰道鏡下宮頸活組織病理學(xué)檢查，病理檢查陽性者127例，病理符合率為51.6%; TCT診斷宮頸高度病變26例，病理檢查高度病變20例，一致率為76.9%; LSIL組與HSIL組宮頸高度病變檢出率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，這與張建新等的研究報道基本一致[3], 說明TCT檢測對宮頸高度病變具有有效的預(yù)警作用。

近年來研究[4-5]表明，高危型HPV持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的必要條件和主要危險因素, Tsai等[6]研究認(rèn)為高危性HPV可引起95%以上宮頸癌，高危性HPV已作為篩查CIN及宮頸癌的重要標(biāo)志應(yīng)用于臨床。當(dāng)HPV陽性時，需進(jìn)一步行細(xì)胞學(xué)檢查或陰道鏡檢查；而當(dāng)HPV陰性時，宮頸癌的發(fā)生概率非常低，即使細(xì)胞學(xué)發(fā)生改變也不會惡變，因此對這部分人群就沒必要進(jìn)行陰道鏡檢查，這樣就能減少過度檢查[7-9]。HC2-HPV-DNA檢測方法是目前唯一經(jīng)美國食品和藥品管理局批準(zhǔn)用于宮頸癌初篩的檢測方法，2012年美國國立綜合癌癥網(wǎng)絡(luò)(NCCN)公布的《宮頸癌篩查臨床實(shí)驗(yàn)指南》已將HPV聯(lián)合細(xì)胞學(xué)檢查作為30～65歲女性宮頸癌的篩查手段[10]。本文對TCT檢測陽性患者246例全部進(jìn)行HC2檢查，HPV陽性者197例，病理檢查陽性者123例，陽性符合率為62.4%; HPV檢查陰性者49例，病理檢查陽性者4例。本研究中宮頸高度病變HPV感染率為96.0%(48/50), 與文獻(xiàn)報道相符，可見HPV陽性預(yù)示著宮頸高度病變的存在或?qū)碛锌赡馨l(fā)展為高度病變，而7例宮頸癌HPV均陽性，意味著HPV陰性幾乎不會發(fā)生宮頸癌。

在宮頸細(xì)胞學(xué)診斷中, ASCUS是最常見的描述，也是細(xì)胞學(xué)診斷的難點(diǎn)，可重復(fù)性比較低，細(xì)胞的異常程度不夠?qū)m頸病變的診斷標(biāo)準(zhǔn)，可理解為增生活躍的良性病變或潛在的惡性病變，它的意義可能與炎癥刺激、宮內(nèi)節(jié)育器、制片不良有關(guān)，還可能包括HPV感染、不典型增生，修復(fù)、角化不良及萎縮性改變[11], 因此，選擇適當(dāng)?shù)臋z測方法準(zhǔn)確的分流其中的高危人群有著重要的指導(dǎo)意義。HC2聯(lián)合TCT檢查有利于宮頸病變的分流管理，尤其是對ASCUS患者可以用HPV檢測進(jìn)行有效分流。卞美璐[12]在WHO(2006年)宮頸癌綜合防治實(shí)踐指南簡介中指出：在ASCUS的婦女中，只有高危型HPVDNA陽性者需要進(jìn)行陰道鏡檢查和活檢，可減少患者不必要的宮頸損傷及經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。本文結(jié)果中TCT診斷ASCUS的患者中宮頸高度病變檢出率僅為8.5%, 均為HPV陽性患者; HPV陽性組宮頸病變檢出率50.8%(64/126), HPV陰性組發(fā)病率為0%。因此，對于ASCUS患者應(yīng)用HPV檢測進(jìn)行分流管理，對HPV陽性者應(yīng)積極行陰道鏡檢查，提高宮頸高度病變的檢出率，減少因長期隨診而造成的患者流失；對HPV陰性者則定期復(fù)查細(xì)胞學(xué)，根據(jù)檢測結(jié)果進(jìn)行相應(yīng)處理。

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收稿日期:2015-02-03

中圖分類號:R 737.33

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

文章編號:1672-2353(2015)11-107-03

DOI:10.7619/jcmp.201511035