尼美舒利聯合順鉑對肺腺癌的影響

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·短篇論著·

尼美舒利聯合順鉑對肺腺癌的影響

朱天吉張卿季曉磊呂秀云

(NYFY ZD2012001)

作者單位： 010050 內蒙古醫科大學附屬醫院呼吸內科

【關鍵詞】尼美舒利；順鉑；非小細胞肺癌；模型

當前選擇性COX-2抑制劑尼美舒利對各種腫瘤的治療研究報道不斷涌現，且取得了比較理想的結果。COX-2是轉化為前列腺素過程當中的限速酶，COX-2過量表達可導致前列腺素合成增多，從而降低細胞介導的免疫反應而發揮作用。目前化療聯合COX-2抑制劑等綜合治療逐漸成為研究熱點。周崧雯等[1]用COX-2抑制劑聯合化療治療晚期NSCLC，結果顯示聯合方案組較單獨用藥組抑制腫瘤生長優先，但差異無統計學意義。也有研究顯示COX -2抑制劑聯合傳統化療藥物對肺癌有抑制作用[2]。梁娜等[3]在抑制乳腺癌裸鼠移植瘤生長的藥物試驗中證實，COX-2抑制劑治療優于單一用藥組和放療聯合化療組。

本試驗以尼美舒利聯合順鉑干預A549細胞接種的裸鼠移植瘤為研究對象，觀察體內尼美舒利聯合順鉑對裸鼠移植瘤生長的影響。

材料與方法

一、選擇實驗對象

肺腺癌A549細胞株購自博爾迪生物科技公司，于內蒙古醫科大學臨床研究中心傳代培養；無特定病原體(SPF)級BALB/C裸鼠32只，購于中國醫學科學院試驗動物研究所，鼠齡4周，體量18g～20 g，雄性。【試驗裸鼠許可證號SCXK(北京)-2012-0001】。

二、主要試劑及儀器設備

尼美舒利(海南康芝制藥廠)，順鉑(山東齊魯制藥廠)，胰蛋白酶(Gibco公司)，PBS緩沖液(HyClone公司)，RPIM-1640培養基及胎牛血清(美國Gibco公司)，恒溫CO2培養箱(上海精宏試驗設備公司)，裸鼠用游標卡尺(北京精益恒源量具公司)，分析天平(日本BW320)。

三、細胞培養

于37 ℃、5% CO2及飽和濕度恒溫培養箱中，用RPIM-1640培養基(10%胎牛血清)，細胞狀態為貼壁生長，1～2 d換液1次，2～3 d傳代1次。

四、裸鼠移植瘤實驗

32只試驗用裸鼠隨機分成4組，每8只，分別為對照組，尼美舒利組，順鉑組，尼美舒利聯合順鉑組。取A549細胞分別接種于裸鼠背部皮下組織，0.2 ml/只。接種8 d后給予藥物干預，對照組給予灌胃CMC溶液，10 ml·kg·-1d·-1給藥，連續給藥21 d和腹腔注射0.9%生理鹽水，0.5 ml/次，每4 d給1次，共4次。尼美舒利組給予尼美舒利灌胃，逐日60 mg·kg·-1d·-1，連續給藥3周。順鉑組給予順鉑腹腔注射，5 mg·kg·-1d·-1，每4 d給1次，共4次。聯合組給予尼美舒利灌胃，逐日給予60 mg·kg·-1d·-1，連續給藥3周和順鉑腹腔注射，5 mg·kg·-1d·-1，每4 d給1次，共4次。3周后停藥并處死裸鼠。實驗中注意觀察裸鼠的精神、進食、排便及體重情況。每周2次以游標卡尺測量裸鼠移植瘤的大小：測量腫瘤最長瘤徑(a)和最短瘤徑(b)計算近似體積V=ab2/2，并繪制腫瘤生長曲線。實驗結束后處死裸鼠取瘤稱重，結合用藥過程測量的瘤長，按公司分別計算相應的瘤體積抑制率及瘤重量抑制率：裸鼠體積抑制率=(對照組瘤體積-用藥組瘤體積)/對照組瘤體積×100%；裸鼠瘤重抑制率=(對照組移植瘤重-用藥組移植瘤重)/對照組移植瘤×100%。

五、統計學方法

結果

一、用藥后裸鼠移植瘤生長情況及平均瘤體積

各組平均腫瘤體積分別為：對照組(0.412±0.192)cm3；尼美舒利組(0.314±0.125)cm3；順鉑組(0.139±0.085)cm3；聯合用藥組(0.049±0.028)cm3，見表1。對比對照組，尼美舒利組、順鉑組、尼美舒利連和順鉑組腫瘤生長緩慢，腫瘤體積比對照組小(P<0.05 )，順鉑與尼美舒利聯合組用藥平均瘤體積小于尼美舒利組和順鉑組(P<0.05 )。

二、裸鼠移植瘤平均移植瘤重量及裸鼠一般狀況

各組平均腫瘤重量分別為：對照組(0.309±0.177)g；尼美舒利組(0.223±0.189)g；順鉑組(0.216±0.141)g；聯合用藥組(0.211±0.131)g, 見表1。同對照比比較，尼美舒利組、順鉑組和尼美舒利聯合順鉑組瘤重量顯著小于對照組(P<0.05 )，尼美舒利與順鉑聯合用藥組平均瘤重量低于尼美舒利組及順鉑組(P<0.05 )。用藥期間：對照組及尼美舒利組用藥后生長狀態良好，飲食變化不明顯。

表1　用藥治療后不同組別腫瘤重量(g)及腫瘤體積(cm3)

三、裸鼠移植瘤體積抑制率

尼美舒利組平均瘤體積為50.49%，順鉑組平均瘤體積抑制率：57.62%，尼美舒利聯合順鉑組平均瘤體積抑制率65.23%，聯合組平均瘤體積抑制率增加(P<0.05 )。

四、裸鼠移植瘤生長曲線及移植瘤重量抑制率

以A549細胞接種后的天數為橫坐標，從第5天開始每隔4d測量的腫瘤體積為縱坐標(mm3)(圖1)。尼美舒利組平均瘤重量抑制率為27.82%，順鉑組平均瘤重量抑制率29.96%，尼美舒利聯合順鉑組平均瘤重量抑制率為31.58%，聯合組平均腫瘤重量抑制率增加(P<0.05 )。

圖1　人肺腺癌裸鼠移植瘤生長曲線

討論

順鉑與其他多種抗腫瘤方法綜合應用有協同作用，是目前肺癌綜合治療最常用的藥物，其單獨多次使用會加劇免疫抑制。但順鉑殺傷大量癌細胞同時，也殺傷了大量正常細胞，使機體的免疫功能下降。多療程、大劑量化療還會損傷患者機體，加重腫瘤的免疫逃逸。尋找一種副作用低且有效的肺癌綜合治療方法，對肺癌患者很重要。目前COX-2抑制劑作為一種新的生物靶向分子，在研究治療肺癌中逐漸嶄露頭角[4]。

化療與選擇性COX-2抑制劑聯合應用在肺癌治療，正成為NSCLC的治療主要模式。李根[5]發現COX-2抑制劑聯合化療可提高細胞對比藥物的敏感性，使抗癌藥物濃度增加，增強傳統化療的療效。化療藥物聯合選擇性COX-2抑制劑可降低單純化療藥物所引起的副作用，通過調節機體的細胞因子來增加腫瘤的免疫，與其有關的治療還在不斷探索過程中。目前國內外已有試驗證實COX-2抑制劑與化療聯合應用對肺癌生長的影響[6]。張平[7]在研究COX-2抑制劑與化療聯合用藥對肺腺癌細胞的作用中證實，COX-2(NS-398)與化療(順鉑)在抑制肺癌細胞的增殖生長方面有協同作用。Nishiyama等[8]研究也顯示，選擇性COX-2抑制劑可提高NSCLC患者對化療藥物的敏感性，進一步抑制腫瘤生長。Huang等[9]也報道了NSCLC來源的PGE2通過調節細胞因子平衡，抑制宿主免疫，繼而抑制了腫瘤的生長。美國臨床腫瘤協會(ASCO)曾經報道COX-2抑制劑可與化療藥物結合治療復發性NSCLC。

基于以上研究表明，尼美舒利與順鉑聯合藥物干預對肺腺癌生長的抑制作用強于單獨任何一種藥物，從而證實尼美舒利和順鉑單獨藥物干預時，對腫瘤的生長具有一定的抑制作用；兩者聯合用藥干預時，尼美舒利可以改善順鉑的抗腫瘤活性，以實現對腫瘤的抑制作用。Watikins等[10]采用，COX-2抑制劑聯合化療6例膽管癌患者，其中完全緩解1例，病情穩定2例，患者耐受良好，顯示COX-2抑制劑聯合化療組對腫瘤治療優于單一治療組。

本研究結果顯示，尼美舒利聯合順鉑對A549細胞及裸鼠移植瘤有顯著的協同抗腫瘤作用，但由于動物臟器的特點，如胃黏膜屏障等的生理特點有別于人類，且尼美舒利抗腫瘤的最佳劑量上缺乏可靠的數據，故COX-2抑制劑與化療藥物在人體內聯合應用能否增加抗腫瘤作用并減少不良反應，尚有待于進一步證實。

參考文獻

1周崧雯, 周彩純, 徐建芳, 等. 長春瑞濱和順鉑聯合西樂一線治療晚期非小細胞肺癌[J]. 同濟大學學報(醫學版), 2007, 28(5): 87-92.

2魏海明, 田志剛, 等. 以“預存免疫”為基礎的IL-12抗肺癌免疫化療技術[J]. 科技計劃成果, 2010(3): 18-19.

3梁娜, 張樹友, 王輝, 等. COX-2抑制劑聯合放療對人乳腺癌裸鼠移植瘤作用的研究[J]. 山東醫藥, 2011, 51(12): 33-34.

4Dreicer R, Stadler WM, Ahmann FR, et al. MVA-MUC1-IL-2 vaccine

immunotherapy(TG4010)improves PSA doubling time in patients with prostate cancer with biochemical failure[J]. Invest New Drugs, 2009, 27(4)：379-386.

5李根. 選擇性COX-2抑制劑塞來昔布抗癌作用研究進展[J]. 武警后勤學院學報(醫學版), 2012, 21(3)：214-220.

6Trifan OC, Durhamw F, Salazar VS, et al. Cyclooxygenase-2 inhibition

with celecoxib enhances antitumor efficacy and reduces diarrhea side effect of CPT-11[J]. Cancer Res, 2002, 62(20): 5778-5784.

7張平. 環氧化酶-2抑制劑的藥理作用進展[J]. 藥物流行病學雜志, 2010, 19(2)：107-110.

8Nishiyama O, Taniguchi H, Kondoh Y, et al. Meloxicam a selective cyclooxygenase-2(cox-2) inhibition enhances the response to carboplatin and weekly paclitaxel in advanced non-small cell lung cancer(NSCLC)[J]. J Clin Oncol, 2006, 23(16s): 7312.

9Huang M, Shama S, Mao JT, et al. Non-small cell lung cancer derived soluble mediators and prostaglandin E2enhance peripheral blood lymphocyte IL-10 transcription and peotein production[J]. J Immunol, 1996, 157(12): 5512-5520.

10Watkins JF, Mayo MS, Smith HJ, et al. Gemcitabine, irrnotecan and celecoxib in patients with biliary cancer[J]. Anticancer Drugs, 2009, 20(4): 294-300.

(本文編輯：王亞南)

朱天吉，張卿，季曉磊，等. 尼美舒利聯合順鉑對肺腺癌的影響[J/CD]. 中華肺部疾病雜志： 電子版， 2015， 8(6)： 739-741.

(收稿日期：2015-05-14)

中圖法分類號：R743，R563

文獻標識碼：B

通訊作者：張卿，Email:nmg740912@163.com

基金項目：內蒙古醫科大學附屬醫院科研項目資助

DOI：10.3877/cma.j.issn.1674-6902.2015.06.014