頂空氣相色譜法測定雙氯芬酸鈉緩釋膠囊中丙酮和乙醇殘留量

王超眾，王萌萌，姜 佳，楊 敏，任曼妮，代昕陽

（1．黑龍江省齊齊哈爾市食品藥品檢驗檢測中心，黑龍江 齊齊哈爾 161006； 2．黑龍江省齊齊哈爾市第一醫院，黑龍江 齊齊哈爾 161005； 3．黑龍江省齊齊哈爾市建華醫院，黑龍江 齊齊哈爾 161006）

頂空氣相色譜法測定雙氯芬酸鈉緩釋膠囊中丙酮和乙醇殘留量

王超眾1，王萌萌2，姜 佳3，楊 敏1，任曼妮1，代昕陽1

（1．黑龍江省齊齊哈爾市食品藥品檢驗檢測中心，黑龍江 齊齊哈爾 161006； 2．黑龍江省齊齊哈爾市第一醫院，黑龍江 齊齊哈爾 161005； 3．黑龍江省齊齊哈爾市建華醫院，黑龍江 齊齊哈爾 161006）

目的建立測定雙氯芬酸鈉緩釋膠囊中丙酮和乙醇殘留量的頂空氣相色譜法。方法色譜柱為Agilent HP-FFAP毛細管氣相色譜柱（30 m×0．320 m，0．25 m），柱溫為40℃，進樣口溫度為180℃，FID檢測器溫度為240℃，頂空瓶平衡溫度為85℃，平衡時間為30 min，進樣量為1 mL，載氣為氮氣，流速為2．0 mL／min。結果丙酮、乙醇質量濃度分別在0．102 10～2．042 00 g／L（r=0．999 9）和0．102 51～2．050 20 g／L（r=1．000 0）范圍內與峰面積呈良好線性關系（n=6），平均回收率分別為99．00%（RSD=0．98%，n=6）和101．54%（RSD=0．48%，n=6）。結論該方法簡單、準確、重復性好，可用于雙氯芬酸鈉緩釋膠囊中丙酮、乙醇殘留量的測定。

頂空氣相色譜法；雙氯芬酸鈉緩釋膠囊；丙酮；乙醇；質量控制

雙氯芬酸鈉為強效消炎鎮痛藥[1]。近年來，隨著臨床的廣泛應用，其不良反應時有報道，如過敏性皮炎、全身皮疹、過敏性休克、消化道出血、全身發麻等[2-4]。由于在雙氯芬酸鈉的合成中用到了丙酮，緩釋微丸的制備工藝中用到了乙醇[5-6]，而2010年版《中國藥典（二部）》中規定丙酮和乙醇都屬于第三類溶劑[7]，故有必要對其進行控制。筆者采用頂空氣相色譜法，以正丙醇為內標物，采用內標法對雙氯芬酸鈉緩釋膠囊中丙酮和乙醇的殘留量進行了測定，為制劑的質量控制提供試驗依據。

1 儀器與試藥

Agilent 7890A GC System 型氣相色譜儀；Agilent 7694E

Headspace Sampler型頂空自動進樣器；Agilent GC ChemStation型工作站；Sartorius BP221S型電子分析天平。雙氯芬酸鈉緩釋膠囊（珠海潤都民彤制藥有限公司，規格為每粒100 mg）；雙氯芬酸鈉對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號為100334-200302，規格為100 mg）；無水乙醇（Merck公司）、丙酮（Merck公司）均為色譜純，正丙醇（天津市光復精密化工研究所）為優級純，水為超純水。

2 方法與結果

2．1 色譜條件

色譜柱：AgilentHP-FFAP毛細管氣相色譜柱（30 m×0．320 m，0．25 μm）；檢測器：氫火焰離子化檢測器（FID）；柱溫：40℃；進樣口溫度：180℃；檢測器溫度：240℃；頂空瓶平衡溫度：90℃；平衡時間：30 min；定量環溫度：105℃；傳輸管溫度：120℃；載氣：氮氣；流速：2．0 mL／min；分流比：40∶1；進樣量：1 mL。

2．2 溶液制備

精密稱取正丙醇2．0 g，置2 000 mL容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得內標溶液。分別精密稱取丙酮、無水乙醇0．2 g，置 200 mL容量瓶中，加內標溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取上述溶液5 mL，置頂空瓶中，密封，即得對照品溶液。取雙氯芬酸鈉緩釋膠囊20粒，取內容物置乳缽中，研細，精密稱取上述細粉1 g，置頂空瓶中，精密加入內標溶液5 mL，密封，振搖10 min，即得供試品溶液。精密稱取雙氯芬酸鈉對照品0．3 g，緩釋輔料0．7 g，膠囊殼3粒，置頂空瓶中，精密加水5 mL，密封，振搖10 min，即得陰性對照品溶液。

2．3 方法學考察

專屬性試驗：取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照品溶液各1 mL，分別頂空進樣，記錄色譜圖(見圖1)。理論板數按丙酮、乙醇峰計算均不低于5 000，丙酮峰、乙醇峰與正丙醇峰之間的分離度符合要求，陰性對照品溶液對測定無干擾。

振搖時間考察：精密稱取雙氯芬酸鈉緩釋膠囊內容物細粉1．0 g，置頂空瓶中，精密加入內標溶液5 mL，密封，分別振搖2，10，20 min，依法測定，計算丙酮、乙醇殘留量。結果振搖10 min和20min時的殘留量比2min時明顯增加，振搖時間為10min和20min時無顯著變化，故確定最佳振搖時間為10 min。

線性關系考察：分別精密稱取丙酮、無水乙醇2．042 0 g和2．050 2 g，置200 mL容量瓶中，加內標溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液。精密量取對照品貯備液，用內標溶液稀釋成含丙酮、乙醇質量濃度分別為0．1，0．2，0．5，1．0，1．2，2．0 g／L的溶液，按擬訂色譜條件進樣分析，記錄色譜圖。以對照品質量濃度（X）為橫坐標、對照品與正丙醇峰面積的比值（Y）為縱坐標進行線性回歸，得丙酮和乙醇的回歸方程 Y=1．878 X+9．504×10-3（r=0．999 9）和 Y=5．076×10-1X-1．895×10-3（r=1．000 0）。結果表明，丙酮、乙醇質量濃度分別在 0．102 10～2．042 00 g／L和0．102 51～2．050 20 g／L范圍內與峰面積比值線性關系良好。

檢出限、定量限考察：取線性關系考察項下最低質量濃度的溶液繼續稀釋，按擬訂色譜條件進樣測定。結果丙酮的檢出限質量濃度為 0．11 μg／mL（S／N=3），定量限質量濃度為 0．30 μg／mL（S／N=10）；乙醇的檢出限質量濃度為0．27 μg／mL（S／N=3），定量限質量濃度為0．99 μg／mL（S／N=10）。

精密度試驗：取同一對照品溶液，連續進樣 6次，記錄色譜圖，分別計算對照品峰面積與正丙醇峰面積的比值。結果乙醇、丙酮的 RSD分別為0．53%和0．77%(n=6)，表明該方法精密度良好。

重復性試驗：取同一批樣品6份，按擬訂方法制備供試品溶液，進樣測定，采用內標法計算丙酮、乙醇殘留量。結果供試品溶液中丙酮、乙醇殘留量的 RSD分別為0．94%和1．02%(n=6)，表明該方法重復性良好。

穩定性試驗：取同一供試品溶液，分別于0，1，2，4，6，8，24 h時進樣，記錄色譜圖，采用內標法計算丙酮、乙醇的殘留量。結果的 RSD分別為0．34%和0．42%(n=7)，表明供試品溶液在24 h內穩定。

耐用性試驗：取同一對照品溶液，以2．1項下色譜條件為標準色譜條件，將柱溫（35，40，45℃）、流速（1．5，2．0，2．5 mL／min）、進樣口溫度（175，180，185℃）、檢測器溫度（235，240，245℃）、頂空平衡溫度（80，85，90℃）、頂空平衡時間（20，30，40 min）及不同批號的色譜柱作為變動因素，分別進樣分析。結果表明，丙酮、乙醇峰的理論板數及各峰間分離度均符合規定，表明該方法的耐用性良好。

加樣回收試驗：分別精密稱取丙酮、無水乙醇適量，加內標溶液稀釋成含丙酮、乙醇質量濃度分別為 2．555 0，1．002 5 g／L的對照品貯備液。分別精密稱取雙氯芬酸鈉緩釋膠囊內容物細粉 1 g，置 6個頂空瓶中，分別精密加入對照品貯備液 5 mL，密封，振搖10 min，依法進樣測定，記錄色譜圖，計算回收率。結果見表1。

圖1 頂空氣相色譜圖

表1 丙酮、乙醇殘留量加樣回收試驗結果（n=6）

2．4 樣品含量測定

取樣品3批，按2．2項下方法制備供試品溶液，按擬訂色譜條件進樣測定，采用內標法計算丙酮、乙醇的殘留量。結果見表2。

表2 樣品含量測定結果（%，n=3）

3 討論

乙醇作為一種有效的溶劑、洗滌劑、萃取劑、黏合劑及合成原料等，在制藥工業中有著非常廣泛的用途；丙酮作為重要的有機合成原料及良好的有機溶劑，在制藥工業中亦有非常廣泛的用途。2010年版《中國藥典（二部）》將丙酮和乙醇規定為第三類溶劑，《藥品生產質量規范》(GMP)或其他質量要求均限制使用，故有必要建立其殘留檢測的方法。

采用直接進樣氣相色譜法檢測藥品中丙酮、乙醇殘留[8-10]，缺點是藥品制劑中的輔料同丙酮、乙醇一起進入儀器分析，輔料峰容易對主峰造成干擾，氣相色譜儀及色譜柱也會受到損害。本研究中建立的方法可消除輔料對丙酮和乙醇峰及內標物峰的干擾，專屬性更強。

參考文獻：

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[3]蘇娜一，徐 ，唐 堯．雙氯芬酸鈉致不良反應的文獻分析[J]．中國藥業，2008，17（17）：44-45．

[4]彭衛珍，陳 華，孔令春．雙氯芬酸鈉致不良反應46例分析[J]．醫藥導報，2012，31（3）：392-394．

[5]秦丙昌，陳 靜，廖新成，等．雙氯芬酸鈉合成工藝研究[J]．應用化工，2008，37（3）：275-278．

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[10]姚洪艷，盧德剛．氣相色譜法測定醋酸棉酚中丙酮殘留量[J]．黑龍江醫藥，2008，21（5）：22-23．

Determination of Residual Amount of Acetone and Ethanol in Diclofenac Sodium Sustained-Release Capsules by HS-GC

Wang Chaozhong1，Wang Mengmeng2，Jiang Jia3，Yang Min1，Ren Manni1，Dai Xinyang1
（1．Qiqihaer Municipal Institute for Food and Drug Control，Qiqihaer，Heilongjian，China 161006； 2．Qiqihaer Municipal First Hospital，Qiqihaer，Heilongjian，China 161005； 3．Qiqihaer Municipal Jianhua Hospital，Qiqihaer，Heilongjian，China 161006）

Objective To establish a headspace gas chromatography(HS-GC)method for determining the residual amountof acetone and ethanol in Diclofenac Sodium Sustained-Release Capsules．M ethods The Agilent HP-FFAP capillary column（30 m×0．320 m，0．25 μm）was used as the chromatographic column．The column temperature was 40℃．The injection port temperature was 180℃．The FID detector temperature was 240℃．The equilibrium temperature of the headspace gas bottle was 85℃．The equilibrium time was 30 minutes．The injection volume was 1 mL．The carrier gas was nitrogen．The flow rate was 2．0 mL／min．Results The mass concentrations in the range of 0．102 10-2．042 00 g／L for acetone（r=0．999 9）and in the range of 0．102 51-2．050 20 g／L for ethanol（r=1．000 0）showed good linear relation with the peak area．The average recovery rates of acetone and ethanol were 99．00%(RSD=0．98%，n=6）and 101．54%(RSD=0．48%，n=6）．Conclusion The established method is simple，accurate and repeatable，which can be applied to determine the residual amount of acetone and ethanol in Diclofenac Sodium Sustained-Release Capsules．

HS-GC；Diclofenac Sodium Sustained-Release Capsules；residual acetone；residual ethanol；quality control

R927.11；R971+.1

A

1006-4931(2015)04-0043-03

王超眾，齊齊哈爾人，碩士研究生，主管藥師，研究方向為藥物分析，（電子信箱）wangchaozhongkcn＠163．com。

2013－12－09；

2014－09－18)