復方苦參酊劑急性毒性試驗研究*

劉玉明，劉慧民，沈先榮，李珂嫻，羅 群，蔣定文，劉 瓊，侯登勇，何 穎，陳 偉，王慶蓉

(1.中國人民解放軍海軍醫(yī)學研究所，上海 200433；2.福建中醫(yī)藥大學，福建 福州 350122)

復方苦參酊劑急性毒性試驗研究*

劉玉明1，劉慧民2，沈先榮1，李珂嫻1，羅 群1，蔣定文1，劉 瓊1，侯登勇1，何 穎1，陳 偉1，王慶蓉1

(1.中國人民解放軍海軍醫(yī)學研究所，上海 200433；2.福建中醫(yī)藥大學，福建 福州 350122)

目的觀察復方苦參酊劑對大鼠皮膚的急性毒性反應。方法取60只大鼠，按體重隨機分為6組，將受試藥物涂于各組動物完整皮膚和破損創(chuàng)面皮膚，觀察各組大鼠急性毒性反應。結果與對照組相比，用藥后各組大鼠的正常皮膚和破損皮膚均未產(chǎn)生急性毒性反應。結論復方苦參酊劑對大鼠無急性毒性反應，是一種安全性較好的外用制劑。

急性毒性；大鼠；毒理學；酊劑

復方苦參酊劑是海軍醫(yī)學研究所研制的純中藥外用制劑，具有殺菌消炎、清熱利濕、消炎止癢、去濕消滯的功效，主要用于治療手癬、足癬、股癬、脂溢性皮炎、皮膚瘙癢等常見皮膚疾患，組方為苦參、苦瓜、辣椒、延胡索等。在該藥物的前期研究中，已對其處方篩選、質(zhì)量標準、制備工藝、藥效學等內(nèi)容進行了研究。為了評價其臨床應用的安全性，并申請中藥保護，根據(jù)衛(wèi)生部《新藥審批辦法》中有關中藥毒理學研究的技術要求，現(xiàn)對其急性毒性反應進行了研究，報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器、試藥與動物

體重計（上海天平廠）；旋轉蒸發(fā)器（上海申勝生物技術有限公司）；85-2型恒溫磁力攪拌器（上海司樂儀器廠）；SJ3200型超聲波清洗機（上海潔凈超聲波設備廠）；電熱恒溫水浴鍋（上海醫(yī)療器械五廠）；GL-21M型離心機（上海市離心機械研究所）。復方苦參酊劑(自制)；苦味酸（國藥集團化學制劑）；70%乙醇溶液（國藥集團，分析純）。SD大鼠60只，體重180～200 g，普通級，雌雄各半（均由中國第二軍醫(yī)大學動物實驗動物中心提供，動物合格證號2008001632526，實施單位許可證號SYXK-＜軍＞2012-0051）。試驗環(huán)境為第二軍醫(yī)大學動物實驗中心，大鼠環(huán)境溫度控制在 20～25℃，相對濕度為 40% ～70%；換氣次數(shù)為 10～20次/分；12 h明暗交替光照；試驗期間動物單獨分籠飼養(yǎng)；自由飲用清潔自來水。

1.2 試驗方法[1]

將60只SD大鼠隨機分為6組，每組10只（雌雄各半），分別為完整皮膚空白對照組(A1組)、完整皮膚低劑量組(B1組)、完整皮膚高劑量組(C1組)、破損皮膚空白對照組(A2組)、破損皮膚低劑量組(B2組)、破損皮膚高劑量組(C2組)。給藥前24 h將大鼠背部脊柱兩側去毛而不損傷皮膚，去毛面積共約為9 cm2（約為體表面積的10%），破損皮膚組在去毛后用砂紙磨損皮膚，面積約3 cm×3 cm，以滲血為度，左右兩側皮膚的破損程度應基本一致。給藥方法為在脫毛區(qū)外用給藥，每只1 mL。高劑量組(C組)予以預先濃縮好的高濃度酊劑1 mL（相當于低劑量的15倍），低劑量組(B組)予以低濃度酊劑1 mL，對照組(A組)給予70%乙醇1 mL。給藥結束24 h后用溫水紗布洗去藥物，并于1，24，48，72 h至第7日，連續(xù)觀察給藥部位出現(xiàn)的紅斑、水腫情況，記錄動物體重[2-5]。觀察大鼠神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、腸胃系統(tǒng)、皮膚、毛發(fā)等中毒表現(xiàn)和死亡情況，如果有死亡動物應進行尸檢和肉眼觀察，當有肉眼可見病變時，應進行病理組織學檢查。

2 結果

結果見表1至表4。

表1 各組完整皮膚和損傷皮膚大鼠體重變化比較（g，n=10）

表1 各組完整皮膚和損傷皮膚大鼠體重變化比較（g，n=10）

注：與給藥前相比，βP＜0.01。

完整皮膚 破損皮膚組別A組B組C組給藥前190.49±15.84 191.03±12.31 192.46±11.9給藥7 d 218.98±19.14β215.14±21.23β216.04±21.96β給藥前193.21±12.78 190.55±14.33 190.29±10.50給藥7 d 219.45±19.37β217.16±25.41β218.30±28.40β

表2 各組受試藥物對局部皮膚紅斑水腫的平均反應值、積分總和（分，n=10）

表3 急性毒性試驗中檢查方法及癥狀指標

表4 各組大鼠急性毒性觀察結果（n=10）

3 討論

在破損皮膚制作時，以大鼠皮膚輕度滲血為度。目前制作破損皮膚的方法多以細針頭在皮膚上劃出“#”形傷口的方法，也有以細砂紙磨損皮膚來制作破損皮膚。在采用細砂紙磨損皮膚時，使用力度應盡量一致，否則出現(xiàn)滲血時間的快慢和深淺不同，會給實驗結果判定帶來誤差。

受試藥物為酊劑，故應選擇采用移液器予藥物涂抹。由于脫毛區(qū)皮膚吸收藥液速度及能力有限，給藥過程中，可能會出現(xiàn)藥液殘留而后粘連他處或者直接流失其他部位。為避免藥物的流失，在每次給藥時盡量慢慢涂抹，且涂抹后將大鼠單獨留置并待藥液基本吸收后，放回籠子。

部分大鼠脫毛區(qū)毛發(fā)增長迅速，在1周的觀察期內(nèi)應予以再次剃毛，每日予拍照、記錄、觀察。

本試驗結果顯示，使用復方苦參酊劑未出現(xiàn)任何急性毒性反應，具有很好的研究價值。

致謝:本文得到了第二軍醫(yī)大學生藥學教研室黃寶康教授的悉心指導。

[1]崔淑芳.實驗動物學[M].上海：第二軍醫(yī)大學出版社，2007：118.

[2]傅承清，白 鈺，張晉云.灰指靈藥膏皮膚毒性及過敏性試驗觀察[J].藥學實踐雜志，2002，20(4)：224-226.

[3]唐志立，彭賢東，譚正懷，等.替硝唑螺內(nèi)酯乳膏的急性毒性試驗[J].中國藥業(yè)，2011，20（21）：10-12.

[4]孟德勝，陳 雅，楊 征，等.膚康洗劑經(jīng)皮給藥毒性實驗[J].醫(yī)藥導報，2009，28（11）：1 436-1 437.

[5]柳文紅，王思農(nóng).藏藥十八味歐曲膏皮膚毒性試驗研究[J].中國科技，2012，25（10）：64-67.

Study on Actue Toxicity of Compound Kushen Tincture

Liu Yuming1,Liu Huimin2,Shen Xianrong1,Li Kexian1,Luo Qun1,Jiang Dingwen1,Liu Qiong1,Hou Dengyong1,He Ying1,Chen Wei1,Wang Qingrong1
(1.Naval Medical Research Institute,Shanghai,China 200433; 2.Fujian University of Traditional Chinese Medicine,Fuzhou,China 350122)

Objective To observe the acute toxicity of the compound Kushen Tincture to rats,which might provide scientific foundation for its clinical use.M ethods 60 Rats were randomized into 6 groups according to the body weight.Integrated and disrepaired skins in the rats were smeared with compound Kushen Tincture and the acute toxic reaction of the animals were observed and recorded continuously from the beginningof using the drug.Results Theresultsindicated thatthistincturecauseno skin acutetoxicity.Conclusion The tincture had no acute toxic reaction to rats′skin and the results suggest that this tincture is relatively safe in clinical application.

acute toxicity;rats;toxicology;tincture

R285.5；R286

A

1006-4931(2015)19-0005-02

劉玉明（1974-），男，漢族，山西和順人，博士研究生，副研究員，主要從事藥物核輻射防護及中藥現(xiàn)代化研究，（電子信箱）liuyuming888627＠sohu.com；沈先榮（1965-），男，漢族，福建永定人，博士研究生，研究員，研究室主任，博士研究生導師，主要從事海洋藥物在核輻射損傷和核事故應急中的防護研究，本文通訊作者，（電子信箱）xianrong-sh＠yahoo.com。

2015-01-27)

β總后衛(wèi)生部中醫(yī)藥管理局重點項目，項目編號：10A207。